以蛋白中色氨酸残基为Forster共振能量转移供体的均相亲和分析方法

    公开(公告)号:CN101452002A

    公开(公告)日:2009-06-10

    申请号:CN200810237000.8

    申请日:2008-12-30

    IPC分类号: G01N33/68 G01N21/76

    摘要: 本发明以蛋白质中色氨酸残基为内在Forster共振能量转移供体并设计特异性分析探针为Forster共振能量转移接受体,从而建立均相荧光亲和分析方法;所用分析探针带萘胺类荧光团,可检测探针与蛋白复合物中色氨酸残基在340nm附近荧光经共振能量转移被猝灭下降或探针经共振能量转移激发而使探针特有荧光升高;测定经过共振能量转移激发产生的探针特有荧光可高灵敏度非竞争性测定蛋白含量;通过候选配体竞争结合,测定共振能量转移产生的探针特有荧光或蛋白自身340nm荧光的变化,可测定非荧光候选配体竞争结合的半有效浓度,考虑分析探针与靶蛋白浓度相当的情况可推算候选配体的解离常数;当分析探针的亲和力比待测配体的亲和力低得多时,通过竞争结合还可以测定高亲和力配体的含量;此技术可用于实验诊断和配体类药物筛选。

    以蛋白中色氨酸残基为Forster共振能量转移供体的均相亲和分析方法

    公开(公告)号:CN101452002B

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN200810237000.8

    申请日:2008-12-30

    IPC分类号: G01N33/68 G01N21/76

    摘要: 本发明以蛋白质中色氨酸残基为内在Forster共振能量转移供体并设计特异性分析探针为Forster共振能量转移接受体,从而建立均相荧光亲和分析方法;所用分析探针带萘胺类荧光团,可检测探针与蛋白复合物中色氨酸残基在340nm附近荧光经共振能量转移被猝灭下降或探针经共振能量转移激发而使探针特有荧光升高;测定经过共振能量转移激发产生的探针特有荧光可高灵敏度非竞争性测定蛋白含量;通过候选配体竞争结合,测定共振能量转移产生的探针特有荧光或蛋白自身340nm荧光的变化,可测定非荧光候选配体竞争结合的半有效浓度,考虑分析探针与靶蛋白浓度相当的情况可推算候选配体的解离常数;当分析探针的亲和力比待测配体的亲和力低得多时,通过竞争结合还可以测定高亲和力配体的含量;此技术可用于实验诊断和配体类药物筛选。

    基于积分球增强光散射检测技术的均相亲和分析新方法

    公开(公告)号:CN101178360B

    公开(公告)日:2010-12-15

    申请号:CN200710092738.5

    申请日:2007-09-24

    IPC分类号: G01N21/64 G01N33/48

    摘要: 一种用有多个相同官能团的树状分子或其它有类似功能的分子,将单活性位点生物分子交联,生成多活性位点共价加合物(本身为多活性位点的生物分子不需交联),再与带强光散射能力的生色团所标记的对应生物活性成分结合,生成非共价产物团聚物,并联用积分球增强光散射信号测量比例的光散射检测技术,不需从反应混合物中分离出这种非共价产物复合物而直接测定其含量,从而建立起来的均相亲和分析新方法,可用于免疫分析和配体类药物离体筛选;用一对有强荧光共振能量转移效应的生色团代替有强散射能力的生色团进行标记,也可建立基于测定荧光共振能量转移的类似均相亲和分析方法。

    联用磁分离与色谱分析测定混合物中配体亲和力的方法

    公开(公告)号:CN101620205B

    公开(公告)日:2012-09-05

    申请号:CN200810237298.2

    申请日:2008-12-30

    IPC分类号: G01N30/00

    摘要: 本发明描述通过将蛋白直接或间接固定在生物相容性磁性纳米材料表面,在液相启动候选配体和参考配体竞争结合达到平衡后,利用磁力回收蛋白-配体复合物,然后变性复合物中蛋白提取所结合配体,用达到所需分辨率和灵敏度的色谱系统分析竞争结合前的样品中和提取的结合配体中候选配体与参考配体的相对峰面积或相对峰高,同时测定各种配体经过磁分离和提取过程后的回收率,在各配体的定量指标显著高于其线性响应截距5倍且处于线性范围内、各配体结合率低于20%的条件下,从而定量测定结合在相同位点候选配体的相对亲和力的方法,可用于未纯化预期配体或组合合成混合物中配体亲和力的测定。

    联用磁分离与色谱分析测定混合物中配体亲和力的方法

    公开(公告)号:CN101620205A

    公开(公告)日:2010-01-06

    申请号:CN200810237298.2

    申请日:2008-12-30

    IPC分类号: G01N30/00

    摘要: 本发明描述通过将蛋白直接或间接固定在生物相容性磁性纳米材料表面,在液相启动候选配体和参考配体竞争结合达到平衡后,利用磁力回收蛋白-配体复合物,然后变性复合物中蛋白提取所结合配体,用达到所需分辨率和灵敏度的色谱系统分析竞争结合前的样品中和提取的结合配体中候选配体与参考配体的相对峰面积或相对峰高,同时测定各种配体经过磁分离和提取过程后的回收率,在各配体的定量指标显著高于其线性响应截距5倍且处于线性范围内、各配体结合率低于20%的条件下,从而定量测定结合在相同位点候选配体的相对亲和力的方法,可用于未纯化预期配体或组合合成混合物中配体亲和力的测定。

    单手性臂氨基酚磺酰胺配体及在不对称催化中的应用

    公开(公告)号:CN113444057B

    公开(公告)日:2023-06-20

    申请号:CN202110715362.9

    申请日:2021-06-27

    摘要: 本发明公开了一类单手性臂氨基酚磺酰胺配体与金属络合物及其在催化反应中的应用;新型单手性臂氨基酚磺酰胺配体结构为:本发明的式(L)化合物中,R1、R2各自独立为n‑Bu或Bn;或者R1、R2相连为‑(CH2)5‑,‑(CH2)2O(CH2)2‑或‑(CH2)4‑;R3为C1‑6烷基;Ar为芳香基。本发明在催化不同取代靛红的直接炔基化反应中,能够以71‑99%的收率及91‑96%的对映选择性得到3‑炔基‑3‑羟基‑2‑羟吲哚衍生物。

    基于积分球增强光散射检测技术的均相亲和分析新方法

    公开(公告)号:CN101178360A

    公开(公告)日:2008-05-14

    申请号:CN200710092738.5

    申请日:2007-09-24

    IPC分类号: G01N21/64 G01N33/48

    摘要: 一种用有多个相同官能团的树状分子或其它有类似功能的分子,将单活性位点生物分子交联,生成多活性位点共价加合物(本身为多活性位点的生物分子不需交联),再与带强光散射能力的生色团所标记的对应生物活性成分结合,生成非共价产物团聚物,并联用积分球增强光散射信号测量比例的光散射检测技术,不需从反应混合物中分离出这种非共价产物复合物而直接测定其含量,从而建立起来的均相亲和分析新方法,可用于免疫分析和配体类药物离体筛选;用一对有强荧光共振能量转移效应的生色团代替有强散射能力的生色团进行标记,也可建立基于测定荧光共振能量转移的类似均相亲和分析方法。