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公开(公告)号:CN105734007B
公开(公告)日:2019-06-07
申请号:CN201610136832.5
申请日:2016-03-10
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
IPC: C12N5/071 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种筛选对牛病毒性腹泻/黏膜病毒敏感的MDBK细胞系的方法。先对MDBK细胞进行单克隆,然后接种两种生物型(致细胞病变型和非致细胞病变型)的牛病毒性腹泻/黏膜病毒,最后用间接免疫荧光技术测定病毒滴度,确定病毒滴度高于106TCID50/mL的为对牛病毒性腹泻/黏膜病毒敏感的MDBK细胞系。本发明筛选的MDBK细胞系对两种生物型的牛病毒性腹泻/黏膜病毒均敏感,可直接应用于牛病毒性腹泻/黏膜病疫苗的研究和生产。
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公开(公告)号:CN106497945A
公开(公告)日:2017-03-15
申请号:CN201610940503.6
申请日:2016-10-25
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
Inventor: 王秀明 , 魏学峰 , 关平原 , 张贵刚 , 周伟光 , 陈君彦 , 韩志玲 , 王艳杰 , 王云凌 , 张宸 , 韩四娥 , 闫聪 , 羡东堡 , 陈光达 , 田志辉 , 樊雅婷 , 杨波
CPC classification number: C07K14/005 , C12N7/00 , C12N15/1003 , C12N15/11 , C12N2770/32121 , C12Q2531/113
Abstract: 本发明公开了口蹄疫O型病毒JMS株的全基因组序列及其扩增引物。本发明先用高保真PCR方法扩增出口蹄疫O型病毒JMS株的9个片段(5’UTR-1、5’UTR-2、L、1ABC、VP1、P2、3ABC、3D-3’UTR和Poly(A))并进行测序,再将9个片段序列重叠部分进行序列拼接、编辑及校正,最终得到口蹄疫O型病毒JMS株的全基因组序列。本发明获得的口蹄疫O型病毒JMS株的全基因组序列有利于对口蹄疫病毒的遗传学、分子流行病学及反向遗传学等研究,为研究口蹄疫病毒的致病机理和探讨新的防治措施提供了重要工具。
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公开(公告)号:CN106048094B
公开(公告)日:2020-05-19
申请号:CN201610634845.5
申请日:2016-08-03
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明一种用于检测猪伪狂犬病野毒株与基因缺失株gB基因和gE基因的双重实时荧光定量PCR检测试剂盒及其专用引物、TaqMan探针。本发明建立了针对gB基因和gE基因的双重实时荧光定量PCR方法,能够快速鉴别伪狂犬病野毒株(同时含有gB基因和gE基因)与基因缺失株(仅含有gB基因),并可对病毒拷贝数进行精确定量。本发明的试剂盒和检测方法操作简便、特异性强、灵敏度高,将在猪伪狂犬病毒的检测、毒株鉴定及疫苗生产中发挥作用。
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公开(公告)号:CN106048094A
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201610634845.5
申请日:2016-08-03
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
Abstract: 本发明一种用于检测猪伪狂犬病野毒株与基因缺失株gB基因和gE基因的双重实时荧光定量PCR检测试剂盒及其专用引物、TaqMan探针。本发明建立了针对gB基因和gE基因的双重实时荧光定量PCR方法,能够快速鉴别伪狂犬病野毒株(同时含有gB基因和gE基因)与基因缺失株(仅含有gB基因),并可对病毒拷贝数进行精确定量。本发明的试剂盒和检测方法操作简便、特异性强、灵敏度高,将在猪伪狂犬病毒的检测、毒株鉴定及疫苗生产中发挥作用。
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公开(公告)号:CN107412758A
公开(公告)日:2017-12-01
申请号:CN201710630886.1
申请日:2017-07-28
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
CPC classification number: A61K39/098 , A61K9/19 , A61K47/20 , A61K2039/54 , A61K2039/552
Abstract: 本发明公开了一种用于预防羊布氏菌病的疫苗。其中,该疫苗为滴眼接种疫苗,疫苗包括:布氏菌病活疫苗和疫苗稀释液。应用本发明的疫苗,该疫苗为滴眼接种疫苗,包括布氏菌病活疫苗和疫苗稀释液,通过滴眼接种,使用剂量小、接种方式简单安全,不会造成疫苗液大量散入环境中,降低了生物安全风险。
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公开(公告)号:CN105886662A
公开(公告)日:2016-08-24
申请号:CN201610053986.8
申请日:2016-01-26
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
Abstract: 本发明公开了一种用逆转录PCR(RT?PCR)技术和实时荧光定量RT?PCR技术快速选育猪瘟兔化弱毒株(C株)ST(猪睾丸)敏感细胞系的方法。包括1)获得ST单克隆细胞;2)接种猪瘟兔化弱毒株(C株);3)提取连续收获的各批次猪瘟兔化弱毒液(病毒液)的RNA,用RT?PCR技术确定ST单克隆细胞系能够持续感染猪瘟兔化弱毒(C株);4)用实时荧光定量RT?PCR技术确定拷贝数在106拷贝(copies)/mL以上的为猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞系。本发明能够快速的为猪瘟弱毒疫苗的生产提供敏感细胞系,缩短了疫苗生产周期并降低了疫苗成本。
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公开(公告)号:CN106048054A
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201610634844.0
申请日:2016-08-03
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q2600/16
Abstract: 本发明公开了对实验室常用的七种不同种属来源的细胞(MDBK、MDCK、BHK21、ST、SP20、293、VERO)的PCR检测引物和检测方法与应用。本发明的检测引物包括7对引物,且各引物仅对各自种属细胞的细胞色素b(Cytb)基因片段有特异性扩增,因此,用本发明的引物可以一次性对7种种属来源的细胞进行检测,具有较高的特异性,不仅可以对实验室常用细胞的种属来源(即细胞来源的可靠性)进行鉴定,还可以对培养过程中是否存在不同种属间细胞的交叉污染进行判定,对细胞培养以及后续实验的顺利进行提供科学依据。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速、简便的优点。
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公开(公告)号:CN105886662B
公开(公告)日:2020-03-24
申请号:CN201610053986.8
申请日:2016-01-26
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种用逆转录PCR(RT‑PCR)技术和实时荧光定量RT‑PCR技术快速选育猪瘟兔化弱毒株(C株)ST(猪睾丸)敏感细胞系的方法。包括1)获得ST单克隆细胞;2)接种猪瘟兔化弱毒株(C株);3)提取连续收获的各批次猪瘟兔化弱毒液(病毒液)的RNA,用RT‑PCR技术确定ST单克隆细胞系能够持续感染猪瘟兔化弱毒(C株);4)用实时荧光定量RT‑PCR技术确定拷贝数在106拷贝(copies)/mL以上的为猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞系。本发明能够快速的为猪瘟弱毒疫苗的生产提供敏感细胞系,缩短了疫苗生产周期并降低了疫苗成本。
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公开(公告)号:CN106167837A
公开(公告)日:2016-11-30
申请号:CN201610784167.0
申请日:2016-08-31
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
Inventor: 王艳杰 , 魏学峰 , 刘国英 , 范秀丽 , 张贵刚 , 周伟光 , 关平原 , 张七斤 , 陈君彦 , 韩志玲 , 王秀明 , 王云凌 , 张宸 , 张妍 , 韩四娥 , 羡东堡 , 田志辉 , 张燕红 , 谯小燕
Abstract: 本发明公开了一种用于检测I型和II型牛病毒性腹泻‑粘膜病病毒的实时荧光定量PCR检测试剂盒及其专用引物和TaqMan探针。利用本发明的试剂盒对BVDV检测操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性好,不仅可用于I型、II型牛病毒性腹泻‑粘膜病病毒和猪瘟病毒的鉴别,更可以实现I型和II型牛病毒性腹泻‑粘膜病病毒的准确定量,可用于疫苗生产中原料和半成品检测、牛奶产品质检等领域。
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公开(公告)号:CN105734007A
公开(公告)日:2016-07-06
申请号:CN201610136832.5
申请日:2016-03-10
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
IPC: C12N5/071 , G01N33/569
CPC classification number: C12N5/0686 , C12N2500/84 , C12N2509/00 , G01N33/56983 , G01N2333/183
Abstract: 本发明公开了一种筛选对牛病毒性腹泻/黏膜病毒敏感的MDBK细胞系的方法。先对MDBK细胞进行单克隆,然后接种两种生物型(致细胞病变型和非致细胞病变型)的牛病毒性腹泻/黏膜病毒,最后用间接免疫荧光技术测定病毒滴度,确定病毒滴度高于106TCID50/mL的为对牛病毒性腹泻/黏膜病毒敏感的MDBK细胞系。本发明筛选的MDBK细胞系对两种生物型的牛病毒性腹泻/黏膜病毒均敏感,可直接应用于牛病毒性腹泻/黏膜病疫苗的研究和生产。
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