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公开(公告)号：CN105296435A
公开(公告)日：2016-02-03
申请号：CN201510753950.6
申请日：2015-11-06
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司 , 北京三联博悦生物技术有限公司
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/543 , G01N33/535 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了能持续、稳定分泌抗口蹄疫O型(O/GX/09-7)病毒的特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株6D6，以及由其分泌得到的特异性单克隆抗体6D6anti。6D6anti能够特异性地识别口蹄疫O型(O/GX/09-7)病毒，在ELISA检测中以6D6anti作为包被及酶标抗体可用于检测口蹄疫O型(O/GX/09-7)病毒，并具有高特异性、高灵敏度的优点。本发明将在口蹄疫O型(O/GX/09-7)病毒的检测、疫苗生产、流行病学研究中发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN105734007B
公开(公告)日：2019-06-07
申请号：CN201610136832.5
申请日：2016-03-10
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
IPC分类号： C12N5/071 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种筛选对牛病毒性腹泻/黏膜病毒敏感的MDBK细胞系的方法。先对MDBK细胞进行单克隆，然后接种两种生物型(致细胞病变型和非致细胞病变型)的牛病毒性腹泻/黏膜病毒，最后用间接免疫荧光技术测定病毒滴度，确定病毒滴度高于106TCID50/mL的为对牛病毒性腹泻/黏膜病毒敏感的MDBK细胞系。本发明筛选的MDBK细胞系对两种生物型的牛病毒性腹泻/黏膜病毒均敏感，可直接应用于牛病毒性腹泻/黏膜病疫苗的研究和生产。
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公开(公告)号：CN107201334A
公开(公告)日：2017-09-26
申请号：CN201710154847.9
申请日：2017-03-15
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
摘要： 本发明公开了能悬浮培养的牛肾细胞及其悬浮培养方法与应用。本发明牛肾细胞MDBK悬浮培养方法省去了细胞消化、换液、频繁分种等大量人工操作，培养方法简便、快速，而且采用反应器培养实现了工艺自动化，不仅提高了单位体积的细胞产量，还解决了传统贴壁培养细胞批间存在差异的技术难题。本发明的牛肾细胞MDBK及其悬浮培养细胞可用于各类敏感病毒的培养、抗体蛋白生产、疫苗生产、产品外源病毒检验等领域。
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公开(公告)号：CN106048054A
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201610634844.0
申请日：2016-08-03
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
CPC分类号： C12Q1/6888 , C12Q2600/16
摘要： 本发明公开了对实验室常用的七种不同种属来源的细胞(MDBK、MDCK、BHK21、ST、SP20、293、VERO)的PCR检测引物和检测方法与应用。本发明的检测引物包括7对引物，且各引物仅对各自种属细胞的细胞色素b(Cytb)基因片段有特异性扩增，因此，用本发明的引物可以一次性对7种种属来源的细胞进行检测，具有较高的特异性，不仅可以对实验室常用细胞的种属来源(即细胞来源的可靠性)进行鉴定，还可以对培养过程中是否存在不同种属间细胞的交叉污染进行判定，对细胞培养以及后续实验的顺利进行提供科学依据。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速、简便的优点。
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公开(公告)号：CN105886662A
公开(公告)日：2016-08-24
申请号：CN201610053986.8
申请日：2016-01-26
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
摘要： 本发明公开了一种用逆转录PCR(RT?PCR)技术和实时荧光定量RT?PCR技术快速选育猪瘟兔化弱毒株(C株)ST(猪睾丸)敏感细胞系的方法。包括1)获得ST单克隆细胞；2)接种猪瘟兔化弱毒株(C株)；3)提取连续收获的各批次猪瘟兔化弱毒液(病毒液)的RNA，用RT?PCR技术确定ST单克隆细胞系能够持续感染猪瘟兔化弱毒(C株)；4)用实时荧光定量RT?PCR技术确定拷贝数在106拷贝(copies)/mL以上的为猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞系。本发明能够快速的为猪瘟弱毒疫苗的生产提供敏感细胞系，缩短了疫苗生产周期并降低了疫苗成本。
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公开(公告)号：CN106048094B
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN201610634845.5
申请日：2016-08-03
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明一种用于检测猪伪狂犬病野毒株与基因缺失株gB基因和gE基因的双重实时荧光定量PCR检测试剂盒及其专用引物、TaqMan探针。本发明建立了针对gB基因和gE基因的双重实时荧光定量PCR方法，能够快速鉴别伪狂犬病野毒株(同时含有gB基因和gE基因)与基因缺失株(仅含有gB基因)，并可对病毒拷贝数进行精确定量。本发明的试剂盒和检测方法操作简便、特异性强、灵敏度高，将在猪伪狂犬病毒的检测、毒株鉴定及疫苗生产中发挥作用。
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公开(公告)号：CN106048094A
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201610634845.5
申请日：2016-08-03
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
摘要： 本发明一种用于检测猪伪狂犬病野毒株与基因缺失株gB基因和gE基因的双重实时荧光定量PCR检测试剂盒及其专用引物、TaqMan探针。本发明建立了针对gB基因和gE基因的双重实时荧光定量PCR方法，能够快速鉴别伪狂犬病野毒株(同时含有gB基因和gE基因)与基因缺失株(仅含有gB基因)，并可对病毒拷贝数进行精确定量。本发明的试剂盒和检测方法操作简便、特异性强、灵敏度高，将在猪伪狂犬病毒的检测、毒株鉴定及疫苗生产中发挥作用。
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公开(公告)号：CN107201334B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201710154847.9
申请日：2017-03-15
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
摘要： 本发明公开了能悬浮培养的牛肾细胞及其悬浮培养方法与应用。本发明牛肾细胞MDBK悬浮培养方法省去了细胞消化、换液、频繁分种等大量人工操作，培养方法简便、快速，而且采用反应器培养实现了工艺自动化，不仅提高了单位体积的细胞产量，还解决了传统贴壁培养细胞批间存在差异的技术难题。本发明的牛肾细胞MDBK及其悬浮培养细胞可用于各类敏感病毒的培养、抗体蛋白生产、疫苗生产、产品外源病毒检验等领域。
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公开(公告)号：CN105886662B
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201610053986.8
申请日：2016-01-26
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种用逆转录PCR(RT‑PCR)技术和实时荧光定量RT‑PCR技术快速选育猪瘟兔化弱毒株(C株)ST(猪睾丸)敏感细胞系的方法。包括1)获得ST单克隆细胞；2)接种猪瘟兔化弱毒株(C株)；3)提取连续收获的各批次猪瘟兔化弱毒液(病毒液)的RNA，用RT‑PCR技术确定ST单克隆细胞系能够持续感染猪瘟兔化弱毒(C株)；4)用实时荧光定量RT‑PCR技术确定拷贝数在106拷贝(copies)/mL以上的为猪瘟兔化弱毒株(C株)ST敏感细胞系。本发明能够快速的为猪瘟弱毒疫苗的生产提供敏感细胞系，缩短了疫苗生产周期并降低了疫苗成本。
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公开(公告)号：CN105296435B
公开(公告)日：2019-03-12
申请号：CN201510753950.6
申请日：2015-11-06
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司 , 北京标驰泽惠生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/543 , G01N33/535 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了能持续、稳定分泌抗口蹄疫O型(O/GX/09‑7)病毒的特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株6D6，以及由其分泌得到的特异性单克隆抗体6D6anti。6D6anti能够特异性地识别口蹄疫O型(O/GX/09‑7)病毒，在ELISA检测中以6D6anti作为包被及酶标抗体可用于检测口蹄疫O型(O/GX/09‑7)病毒，并具有高特异性、高灵敏度的优点。本发明将在口蹄疫O型(O/GX/09‑7)病毒的检测、疫苗生产、流行病学研究中发挥重要作用。
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