一种检测转基因作物外源基因对土壤线虫安全性的方法

    公开(公告)号:CN103695541A

    公开(公告)日:2014-04-02

    申请号:CN201310682486.7

    申请日:2013-12-12

    申请人: 北京大学

    IPC分类号: C12Q1/68 C12Q1/02 C12R1/19

    摘要: 本发明提供一种检测转基因作物外源基因对土壤线虫安全性的方法,通过生物信息学分析获得转基因植物中外源基因与秀丽隐杆线虫基因组中相同短片段,通过将短片段克隆和转化来饲喂秀丽隐杆线虫,根据秀丽隐杆线虫的表型差异来检测外源基因对线虫的安全性。以往转基因作物的安全性评价集中在取食外源蛋白对非靶标生物影响,本发明用于检测外源基因对线虫这类重要土壤生态系统组成者的安全性问题,填补了这一转基因作物安全评价领域的空白。本发明是利用饲喂的方法来进行RNAi,不需要特殊的试剂和仪器,线虫饲养容易,方法简单易行。

    秀丽新杆线虫中真核生物蛋白质和核酸分子的生产

    公开(公告)号:CN100422334C

    公开(公告)日:2008-10-01

    申请号:CN02827596.9

    申请日:2002-11-26

    摘要: 描述了一种秀丽新杆线虫中的质粒表达载体,该载体具有热诱导型启动子核苷酸序列、任选地含有用于在秀丽新杆线虫和大肠杆菌之间有效穿梭的Shine-Dalgarno序列的合成内含子核苷酸序列、任选的编码核定位信号或分泌信号的核苷酸序列、编码可识别的标记的核苷酸序列、任选的编码荧光蛋白质的核苷酸序列、编码蛋白酶切割位点的核苷酸序列、含有编码真核生物如人类的蛋白质或核酸分子的核苷酸序列的多克隆位点以及编码翻译终止的核苷酸序列。也描述了在线虫中特别大规模地生产真核生物如人类的蛋白质和核酸分子的方法。该方法包含将一种或几种不同的质粒载体注射入秀丽新杆线虫雌雄同体的生殖腺中,于低于25℃的温度在生长培养基中培养线虫,任选地包含作为线虫饲料的标记的细菌,随后改变为30-33℃,以在几百个体细胞中诱导真核生物蛋白质或核酸分子的表达,在神经元和表皮细胞中具有最高表达水平,并从该细胞中分离真核生物蛋白质或核酸分子。

    秀丽新杆线虫中真核生物蛋白质和核酸分子的生产

    公开(公告)号:CN1617930A

    公开(公告)日:2005-05-18

    申请号:CN02827596.9

    申请日:2002-11-26

    IPC分类号: C12N15/85

    摘要: 描述了一种秀丽新杆线虫中的质粒表达载体,该载体具有热诱导型启动子核苷酸序列、任选地含有用于在秀丽新杆线虫和大肠杆菌之间有效穿梭的Shine-Dalgarno序列的合成内含子核苷酸序列、任选的编码核定位信号或分泌信号的核苷酸序列、编码可识别的标记的核苷酸序列、任选的编码荧光蛋白质的核苷酸序列、编码蛋白酶切割位点的核苷酸序列、含有编码真核生物如人类的蛋白质或核酸分子的核苷酸序列的多克隆位点以及编码翻译终止的核苷酸序列。也描述了在线虫中特别大规模地生产真核生物如人类的蛋白质和核酸分子的方法。该方法包含将一种或几种不同的质粒载体注射入秀丽新杆线虫雌雄同体的生殖腺中,于低于25℃的温度在生长培养基中培养线虫,任选地包含作为线虫饲料的标记的细菌,随后改变为30-33℃,以在几百个体细胞中诱导真核生物蛋白质或核酸分子的表达,在神经元和表皮细胞中具有最高表达水平,并从该细胞中分离真核生物蛋白质或核酸分子。