一种抗菌蛋白的分离纯化方法

    公开(公告)号:CN107686855A

    公开(公告)日:2018-02-13

    申请号:CN201711078209.X

    申请日:2017-11-06

    申请人: 扬州大学

    CPC分类号: C07K14/32

    摘要: 本发明公开了一种抗菌蛋白分离纯化的方法,解决了现有蛋白质的分离纯化方法无法获得B.amyloliquefaciensF1高纯度的抗菌蛋白、杂质蛋白多和抗菌蛋白收率低的问题,对其稳定性研究,为开发抗菌蛋白的应用前景奠定了基础。本发明通过超滤浓缩、硫酸铵沉淀的方法获得抗菌粗蛋白;离子交换对抗菌粗蛋白进行初步纯化;凝胶层析纯化后获得较纯的抗菌蛋白。本发明的B.amyloliquefaciensF1抗菌蛋白在100℃处理30min时抑菌活性保留率在80%以上;在pH为5.0-9.0范围内其抑菌活性仍然在70%以上;对胰蛋白酶较为敏感;经紫外线照射与反复冻融后仍然具有良好的抑菌活性;一价金属离子对抗真菌蛋白的抑菌活性没有显著性影响,表现出较好的稳定性。

    一株高效合成聚-γ-谷氨酸的地衣芽孢杆菌工程菌

    公开(公告)号:CN107502585A

    公开(公告)日:2017-12-22

    申请号:CN201710796200.6

    申请日:2017-09-06

    IPC分类号: C12N1/21 C12P7/62 C12R1/10

    摘要: 一株高效合成聚-γ-谷氨酸的地衣芽孢杆菌工程菌,属于微生物代谢工程领域。本发明采用常规的分子生物学技术,在实验室保存的地衣芽孢杆菌WX-02的基础上,通过外源强化表达双组份调控因子degU,得到了一株可以在无外源谷氨酸添加的情况下,高效合成聚-γ-谷氨酸的地衣芽孢杆菌工程菌株WX-02/pHY-degU。进行液体发酵验证,发酵终点的聚-γ-谷氨酸浓度达到了32.78g/L,与原始菌株地衣芽孢杆菌WX-02相比提高了47.59%,聚-γ-谷氨酸的合成能力显著增强。该菌株于2016年5月27日保存于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号为CCTCC NO:M2016294。

    一种提高枯草芽孢杆菌发酵液中α‑淀粉酶活的方法

    公开(公告)号:CN106754605A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201710015951.X

    申请日:2017-01-10

    IPC分类号: C12N1/21 C12N9/28 C12R1/125

    摘要: 本申请属于生物发酵工程技术领域,具体涉及一种提高枯草芽孢杆菌发酵液中α‑淀粉酶活的方法。该方法通过采用基因工程方法对枯草芽孢杆菌菌株基因组进行改造实现,具体包括:PCR克隆扩增sdpBC部分序列DNA、酶切和连接、转化、筛选并鉴定、同源单交换重组质粒转化枯草芽孢杆菌168、检测鉴定等步骤。本申请以生理及转化背景比较清楚、并已经完成序列测定的枯草芽孢杆菌168菌株作为研究示例,通过同源重组的方法,对芽孢形成延迟蛋白基因sdpC进行插入突变。初步研究表明,通过该方法所获得的改造后的菌株,其活菌数及α‑淀粉酶活均得到了较好提升,表现出较好的应用价值,同时也为其他菌株改造奠定了应用基础。