一种新型牙髓干细胞培养基

    公开(公告)号:CN106011053A

    公开(公告)日:2016-10-12

    申请号:CN201610475763.0

    申请日:2016-06-27

    Inventor: 晁若瑜 王丽丽

    CPC classification number: C12N5/0664 C12N2500/46 C12N2501/15

    Abstract: 本发明公开了一种新型牙髓干细胞培养基,每1L牙髓干细胞培养基中由以下成分组成:100‑150ml的胎牛血清、10‑15ml的青链霉素双抗、1‑5ng TGF‑β、1‑5mM L‑谷氨酰胺、1640培养基余量;制备方法:取总量1/3的1640培养基,加入TGF‑β、L‑谷氨酰胺、青链霉素双抗,搅拌溶解,补加余下1640培养基定容至1L,搅拌均匀;配制的溶液用0.22um滤膜过滤,无菌条件下加入胎牛血清,即得;本发明的培养基中,基础培养基为1640,其含有乳牙牙髓基质细胞向成牙本质细胞方向分化所需要的无机成分;培养基中含有胎牛血清,提供细胞生长所需营养物质并可以促进细胞贴壁生长;谷氨酰胺和TGF‑β可以增强细胞的增殖;青链霉素双抗起到抗菌作用。

    用于CD34-阴性干细胞的扩增培养基

    公开(公告)号:CN102686725A

    公开(公告)日:2012-09-19

    申请号:CN201080059394.8

    申请日:2010-12-23

    Abstract: 本发明提供细胞生长培养基,其包含(a)无直径大于0.22μm的固体物质的人类血小板裂解物,其中所述裂解物构成所述细胞生长培养基的总体积的2%至15%;(b)无直径大于0.22μm的固体物质的人类新鲜冰冻血浆(FFP)滤出物,其中所述FFP滤出物构成所述细胞生长培养基的总体积的1%至10%;(c)浓度为所述细胞生长培养基的0U/ml至10U/ml的肝素;(d)浓度为0.5mM至10mM的L-谷氨酰胺;和(e)适用于哺乳动物细胞生长的无血清低葡萄糖培养基,其中所述无血清低葡萄糖培养基构成所述细胞生长培养基的总体积的75%至97%,并且可包含部分(d)的L-谷氨酰胺;其中所述细胞生长培养基允许人类CD34”干细胞的扩增,且其中得到的经扩增的CD34”干细胞保持分化的能力。本发明还提供了相关的细胞生长培养基补充物、无菌的人类血小板裂解物和人类新鲜冰冻血浆(FFP)滤出物、试剂盒、含CD34’干细胞的组合物,以及相关的生产和细胞扩增方法。

    一种牙髓干细胞分离培养方法

    公开(公告)号:CN106801033A

    公开(公告)日:2017-06-06

    申请号:CN201710067285.4

    申请日:2017-02-06

    Inventor: 张凤宁

    CPC classification number: C12N5/0664

    Abstract: 本发明涉及牙髓干细胞分离培养领域,公开了一种牙髓干细胞分离培养方法,包括以下步骤:将牙齿挤碎,露出牙髓组织,再将牙髓组织剪碎,收集到离心管中,使用Ⅰ型胶原酶和中性蛋白酶分解牙髓组织;加入完全培养液终止分解,离心去上层清液,再用完全培养液将细胞重悬,过滤获得原代细胞悬液;原代细胞种植密度采用1×104/cm2;2天后进行首次换液,后面3天换一次,培养9至19天,每个原代细胞形成数目100左右的克隆细胞,进行细胞收获及传代;按照1×4000/cm2种植传代细胞,待细胞达到70~90%的汇合度,进行细胞收获并再次传代。本发明通过规范牙髓干细胞分离培养的方法及具体操作中的各项参数,提高牙髓干细胞分离培养效率、产出率,降低生产成本。

Patent Agency Ranking