寡核苷酸的合成方法
    2.
    发明授权

    公开(公告)号:CN116333023B

    公开(公告)日:2024-09-20

    申请号:CN202310269875.0

    申请日:2023-03-16

    IPC分类号: C07H21/04 C07H21/00 C07H1/00

    摘要: 本申请提供了一种寡核苷酸的合成方法;所述合成方法包括如下步骤:脱保护步骤、偶联步骤、加帽步骤和氧化步骤;其中,在所述氧化步骤使用氧化剂将亚磷酯键转化为磷酸三酯键,所述氧化剂中包括碘液和氮甲基咪唑。本申请利用含有氮甲基咪唑的碘液作为氧化试剂合成寡核苷酸的方法,解决了寡核苷酸探针合成时间长、效率低、操作繁琐等问题。此外,采用本申请的合成方法,能够减少氧化步骤的反应时间、避免MGB探针在合成过程中出现杂质问题,并且在使用仪器合成普通序列时无需更换氧化剂,使得MGB探针与普通寡核苷酸序列的合成变得更加方便、快速、高效。

    一种从细胞培养上清液中富集细胞外囊泡的方法

    公开(公告)号:CN118546885A

    公开(公告)日:2024-08-27

    申请号:CN202410351550.1

    申请日:2024-03-26

    申请人: 天津大学

    IPC分类号: C12N5/09 C12N5/071 C07H21/04

    摘要: 本发明首次提供了一种从细胞培养上清液中富集细胞外囊泡的方法。提出了一种全新的细胞外囊泡分离方法,构建了一种多价胆固醇修饰的两亲性PX‑DNA材料,由四条单链DNA自组装而成,8个粘性末端各修饰一个胆固醇分子,可通过疏水作用锚定细胞外囊泡膜,将多个外囊泡相连,使纳米级的细胞外囊泡转化为微米级的细胞外囊泡团簇,从而提高分离效果,降低分离成本;本申请的方法在分离时仅需使用低速离心,无需额外购置设备,操作简单且耗时短,得到的EVs富集效果好;本申请的方法分离细胞外囊泡的纯度高,不会影响细胞外囊泡的生理活性。

    一种四氮杂环十四烷铜配合物晶体及其合成方法和应用

    公开(公告)号:CN114751923B

    公开(公告)日:2024-08-23

    申请号:CN202210412310.9

    申请日:2022-04-19

    IPC分类号: C07F1/08 C07H21/04 C07H1/00

    摘要: 本发明公开了一种四氮杂环十四烷铜配合物晶体及其合成方法和应用,涉及金属有机配合物技术领域,所述四氮杂环十四烷铜配合物晶体的化学式为CuL(ClO4)2,其中,L=5,7,7,12,14,14‑六甲基‑1,4,8,11‑四氮杂环十四烷;其结构式为:#imgabs0#其合成方法如下:取5,7,7,12,14,14‑六甲基‑1,4,8,11‑四氮杂环十四烷溶于甲醇中配制成溶液,加入Cu(ClO4)2的水溶液,于60℃下搅拌回流反应6h,室温静置结晶,过滤,再于甲醇中重结晶,干燥,得到紫红色粉末状固体;将紫红色粉末状固体溶于去离子水中配制成饱和溶液,静置滤除未溶解沉淀,然后将过滤后的母液室温放置,有蓝色长方形单晶析出,即得。本发明配合物能够有效断裂DNA分子,有望成为新的DNA切割试剂。

    寡核苷酸氨解方法
    7.
    发明授权

    公开(公告)号:CN116102599B

    公开(公告)日:2024-08-09

    申请号:CN202211710645.5

    申请日:2022-12-29

    摘要: 本申请涉及一种寡核苷酸氨解方法,该方法包括以下步骤:向连接有寡核苷酸的固相载体中加入第一氨解处理液进行洗脱处理,得到第一处理液;洗脱处理的时间为30min~120min,洗脱处理的温度为18℃~28℃;将第一处理液在密封条件下加热进行氨解反应,得到氨解后的寡核苷酸;其中,第一氨解处理液包括叔丁胺、甲醇和水,叔丁胺、甲醇和水的体积比为1:(0.8~1.2):(1~6)。上述寡核苷酸氨解方法中,通过控制洗脱时间及氨解处理液的特定组分和配比,使得叔丁胺与甲醇相互配合,将合成的寡核苷酸从固相载体上切割下来,再密封进行氨解,减少了对寡核苷酸结构的破坏,有利于获得纯度高、产率高的寡核苷酸产品。