一种特异性识别展青霉素的核酸适配体及其筛选方法与应用

    公开(公告)号:CN118910062A

    公开(公告)日:2024-11-08

    申请号:CN202410884182.7

    申请日:2024-07-03

    摘要: 本发明涉及一种特异性识别展青霉素的核酸适配体及其筛选方法与应用,核酸适配体包括的核苷酸序列为:5’GGGACGACGGGTTACCTAGTGGGCGCA AGCCATACGGAGTCGTCCC3’。特异性识别展青霉素的核酸适配体筛选方法,进行十八轮核酸适配体筛选,每轮核酸适配体筛选包括如下步骤:将人工合成的ssDNA文库以SELEX缓冲液溶解后加入biotin引物,得到第一混合物;将第一混合物加入到链霉亲和素树脂中,再用SELEX缓冲液洗涤若干次后,加入200μM的展青霉素,收集洗脱液。经纯化后进行PCR扩增,产物再加入链霉亲和素树脂于室温中孵育,加入0.2M的氢氧化钠回收洗脱液,完成一轮核酸适配体筛选。本发明提供的特异性识别展青霉素的核酸适配体筛选方法采用将文库固定于树脂上,利用游离的小分子去捕获树脂上的核酸适配体,不仅文库固定效率高,也更能筛选出特异性识别靶标的核酸适配体。

    一种检测呋喃西林的FAM荧光标记核苷酸适配体、传感器、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN115927344B

    公开(公告)日:2024-10-29

    申请号:CN202211125127.7

    申请日:2022-09-14

    发明人: 乐涛 文煦 郑晓玲

    摘要: 本发明公开了一种检测呋喃西林的FAM荧光标记核苷酸适配体、传感器、试剂盒及应用。本发明通过固定的磁珠‑SELEX筛选方法,得到呋喃西林的适配体;通过对获得的适配体一级结构、二级结构分析,挑选出候选序列;通过对候选适配体的截短优化,截短的适配体亲和力提高了2.5倍,通过分子对接和分子模拟分析得到了适配体的核心识别区域,获得了NFZ的最佳适配体。本发明还提供适配体与氧化石墨烯(GO)构建得到的荧光适配体传感器,及包含此传感器的呋喃西林检测试剂盒。本发明的荧光检测试剂盒用于检测呋喃西林,灵敏度高、操作简单、特异性强、速度快、价格低廉。在呋喃西林检测中具有良好的应用前景。

    一种检测S-腺苷甲硫氨酸的荧光RNA适配体生物传感器制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN118795150A

    公开(公告)日:2024-10-18

    申请号:CN202410774474.5

    申请日:2024-06-17

    申请人: 湘潭大学

    摘要: 本发明提供了一种检测S‑腺苷甲硫氨酸的荧光RNA适配体生物传感器的制备方法及其应用。所述荧光RNA适配体生物传感器包括特异性与S‑腺苷甲硫氨酸结合的RNA适配体、传感片段RNA和SRB‑2发光适体,其中RNA适配体通过传感片段RNA与SRB‑2发光适体进行连接,发光适体SRB‑2的二级结构被破坏。当SAM存在时,SAM适配体特异性与SAM小分子结合,诱导SRB‑2恢复正确的二级结构,激活磺酰罗丹明B与二硝基苯胺猝灭剂的缀合物(SR‑DN)的猝灭荧光,从而实现对S‑腺苷甲硫氨酸的灵敏检测。

    特异性识别细交链孢菌酮酸的核酸适配体及其筛选方法与应用

    公开(公告)号:CN118745427A

    公开(公告)日:2024-10-08

    申请号:CN202410954311.5

    申请日:2024-07-17

    摘要: 本发明涉及一种特异性识别细交链孢菌酮酸的核酸适配体及其筛选方法与应用,其中特异性识别细交链孢菌酮酸的核酸适配体包括核苷酸序列为:5′‑GACGACAGGGATGGGCCCCTTATAGG GAGGTACGATGTCGTC‑3′。本发明提供的特异性识别细交链孢菌酮酸的核酸适配体筛选方法采用将文库固定于树脂上,利用游离的小分子去捕获树脂上的随机单链DNA文库,不仅可以实现多靶标同时筛选,也更能筛选出识别小分子危害物的核酸适配体。另外,利用筛选得到的适配体构建了一种荧光传感器,拓展核酸适配体的应用性能。

    一种检测25(OH)D3的生物传感器及其构建方法和用途

    公开(公告)号:CN118731375A

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202410726878.7

    申请日:2024-06-06

    摘要: 本发明公开了一种检测25(OH)D3的生物传感器及其构建方法和用途,属于光电传感分析技术领域。将HOFs‑C3N4‑CeO2滴涂在电极上作为ECL发光基底材料并改善电极的电化学性能。识别25(OH)D3的适体链VDBA14通过酰胺键与传感界面结合。同时,Au NRs修饰的VDBA14互补链(Au NRs‑ssDNA)通过碱基互补配对原则与VDBA14结合。此时,Au NRs与HOFs‑C3N4‑CeO2发生ECL‑RET现象,导致ECL信号猝灭。当目标物25(OH)D3存在时,目标物会与特异性识别的适体链VDBA14结合,并将Au NRs‑ssDNA释放到溶液中,导致ECL‑RET消失,传感器的ECL信号得到恢复,从而实现了对25(OH)D3的灵敏检测。该传感器利用新型ECL发光材料HOFs‑C3N4‑CeO2与Au NRs之间的共振能量转移效应,开发了一种高灵敏检测25(OH)D3的ECL生物传感器。该技术对25(OH)D3有较好的特异性,可以快速灵敏的实现对25(OH)D3的早期检测。