公开(公告)号：US20120034697A1

公开(公告)日：2012-02-09

申请号：US13206637

申请日：2011-08-10

申请人： P. Samuel Jayakumar ,  Jeffrey Beringer ,  Paul R. Schmitzer ,  Frank Burroughs ,  Robbi J. Garisson ,  William M. Ainley ,  Narasimha C. Samboju

发明人： P. Samuel Jayakumar ,  Jeffrey Beringer ,  Paul R. Schmitzer ,  Frank Burroughs ,  Robbi J. Garisson ,  William M. Ainley ,  Narasimha C. Samboju

IPC分类号： C12N5/04

CPC分类号： C12N5/04 ,  C12N5/0025 ,  C12N15/8201

摘要： The subject invention provides simple and consistent methods to break suspension cell aggregates to single cells with intact primary cell walls. The subject invention relates in part to cell separation of suspension cell aggregates cultured in medium containing pectin-degrading enzymes or tubulin de-polymerizing compounds including colchicine. The subject invention also relates to novel uses of compounds for such purposes. Another aspect of the subject invention relates to transformation of the subject, isolated cells. Such processes simplify and integrate single-cell-based transformation and selection processes into transgenic and transplastomic event-generation work processes. The subject invention also removes technical constraints and produces marker-free and uniformly expressing transgenic lines in a high throughput fashion to support various needs of animal health, biopharma, and trait and crop protection platforms.

摘要翻译： 本发明提供简单且一致的方法来将悬浮细胞聚集体破碎成具有完整原始细胞壁的单个细胞。 本发明部分涉及在包含果胶降解酶或包含秋水仙素的微管蛋白去聚合化合物的培养基中培养的悬浮细胞聚集体的细胞分离。 本发明还涉及化合物用于这些目的的新用途。 本发明的另一方面涉及受试者，分离的细胞的转化。 这样的过程简化并将基于单细胞的转化和选择过程整合到转基因和转基因组事件生成工作过程中。 本发明还消除了技术限制，并以高通量方式产生无标记和均匀表达的转基因品系，以支持动物健康，生物制药和性状和作物保护平台的各种需要。

公开(公告)号：US08012752B2

公开(公告)日：2011-09-06

申请号：US11965543

申请日：2007-12-27

申请人： P. Samuel Jayakumar ,  Jeffrey Beringer ,  Paul R. Schmitzer ,  Frank Burroughs ,  Robbi J. Garrison ,  William M. Ainley ,  Narasimha C. Samboju

发明人： P. Samuel Jayakumar ,  Jeffrey Beringer ,  Paul R. Schmitzer ,  Frank Burroughs ,  Robbi J. Garrison ,  William M. Ainley ,  Narasimha C. Samboju

IPC分类号： C12N5/00 ,  C12N5/02

CPC分类号： C12N5/04 ,  C12N5/0025 ,  C12N15/8201

摘要： The subject invention provides simple and consistent methods to break suspension cell aggregates to single cells with intact primary cell walls. The subject invention relates in part to cell separation of suspension cell aggregates cultured in medium containing pectin-degrading enzymes or tubulin de-polymerizing compounds including colchicine. The subject invention also relates to novel uses of compounds for such purposes. Another aspect of the subject invention relates to transformation of the subject, isolated cells. Such processes simplify and integrate single-cell-based transformation and selection processes into transgenic and transplastomic event-generation work processes. The subject invention also removes technical constraints and produces marker-free and uniformly expressing transgenic lines in a high throughput fashion to support various needs of animal health, biopharma, and trait and crop protection platforms.

摘要翻译： 本发明提供简单且一致的方法来将悬浮细胞聚集体破碎成具有完整原始细胞壁的单个细胞。 本发明部分涉及在包含果胶降解酶或包含秋水仙素的微管蛋白去聚合化合物的培养基中培养的悬浮细胞聚集体的细胞分离。 本发明还涉及化合物用于这些目的的新用途。 本发明的另一方面涉及受试者，分离的细胞的转化。 这样的过程简化并将基于单细胞的转化和选择过程整合到转基因和转基因组事件生成工作过程中。 本发明还消除了技术限制，并以高通量方式产生无标记和均匀表达的转基因品系，以支持动物健康，生物制药和性状和作物保护平台的各种需要。

公开(公告)号：US08206983B2

公开(公告)日：2012-06-26

申请号：US13206637

申请日：2011-08-10

申请人： P. Samuel Jayakumar ,  Jeffrey Beringer ,  Paul R. Schmitzer ,  Frank Burroughs ,  Robbi J. Garrison ,  William M. Ainley ,  Narasimha C. Samboju

发明人： P. Samuel Jayakumar ,  Jeffrey Beringer ,  Paul R. Schmitzer ,  Frank Burroughs ,  Robbi J. Garrison ,  William M. Ainley ,  Narasimha C. Samboju

IPC分类号： C12N5/00 ,  C12N5/02

CPC分类号： C12N5/04 ,  C12N5/0025 ,  C12N15/8201

摘要： The subject invention provides simple and consistent methods to break suspension cell aggregates to single cells with intact primary cell walls. The subject invention relates in part to cell separation of suspension cell aggregates cultured in medium containing pectin-degrading enzymes or tubulin de-polymerizing compounds including colchicine. The subject invention also relates to novel uses of compounds for such purposes. Another aspect of the subject invention relates to transformation of the subject, isolated cells. Such processes simplify and integrate single-cell-based transformation and selection processes into transgenic and transplastomic event-generation work processes. The subject invention also removes technical constraints and produces marker-free and uniformly expressing transgenic lines in a high throughput fashion to support various needs of animal health, biopharma, and trait and crop protection platforms.

摘要翻译： 本发明提供简单且一致的方法来将悬浮细胞聚集体破碎成具有完整原始细胞壁的单个细胞。 本发明部分涉及在包含果胶降解酶或包含秋水仙素的微管蛋白去聚合化合物的培养基中培养的悬浮细胞聚集体的细胞分离。 本发明还涉及化合物用于这些目的的新用途。 本发明的另一方面涉及受试者，分离的细胞的转化。 这样的过程简化并将基于单细胞的转化和选择过程整合到转基因和转基因组事件生成工作过程中。 本发明还消除了技术限制，并以高通量方式产生无标记和均匀表达的转基因品系，以支持动物健康，生物制药和性状和作物保护平台的各种需要。

公开(公告)号：US20100159598A1

公开(公告)日：2010-06-24

申请号：US11965543

申请日：2007-12-27

申请人： P. Samuel Jayakumar ,  Jeffrey Beringer ,  Paul R. Schmitzer ,  Frank Burroughs ,  Robbi J. Garrison ,  William M. Ainley ,  Narasimha C. Samboju

发明人： P. Samuel Jayakumar ,  Jeffrey Beringer ,  Paul R. Schmitzer ,  Frank Burroughs ,  Robbi J. Garrison ,  William M. Ainley ,  Narasimha C. Samboju

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N5/04 ,  C12N5/10

CPC分类号： C12N5/04 ,  C12N5/0025 ,  C12N15/8201

摘要： The subject invention provides simple and consistent methods to break suspension cell aggregates to single cells with intact primary cell walls. The subject invention relates in part to cell separation of suspension cell aggregates cultured in medium containing pectin-degrading enzymes or tubulin de-polymerizing compounds including colchicine. The subject invention also relates to novel uses of compounds for such purposes. Another aspect of the subject invention relates to transformation of the subject, isolated cells. Such processes simplify and integrate single-cell-based transformation and selection processes into transgenic and transplastomic event-generation work processes. The subject invention also removes technical constraints and produces marker-free and uniformly expressing transgenic lines in a high throughput fashion to support various needs of animal health, biopharma, and trait and crop protection platforms.

摘要翻译： 本发明提供简单且一致的方法来将悬浮细胞聚集体破碎成具有完整原始细胞壁的单个细胞。 本发明部分涉及在包含果胶降解酶或包含秋水仙素的微管蛋白去聚合化合物的培养基中培养的悬浮细胞聚集体的细胞分离。 本发明还涉及化合物用于这些目的的新用途。 本发明的另一方面涉及受试者，分离的细胞的转化。 这样的过程简化并将基于单细胞的转化和选择过程整合到转基因和转基因组事件生成工作过程中。 本发明还消除了技术限制，并以高通量方式产生无标记和均匀表达的转基因品系，以支持动物健康，生物制药和性状和作物保护平台的各种需要。

公开(公告)号：US08686222B2

公开(公告)日：2014-04-01

申请号：US12901312

申请日：2010-10-08

申请人： Jayakumar P. Samuel ,  Narasimha C. Samboju ,  Kerrm Y. Yau ,  Steven R. Webb ,  Frank Burroughs

发明人： Jayakumar P. Samuel ,  Narasimha C. Samboju ,  Kerrm Y. Yau ,  Steven R. Webb ,  Frank Burroughs

IPC分类号： C12N5/10 ,  B82Y5/00

CPC分类号： C12N15/8206

摘要： Provided are methods for introducing a molecule of interest into a plant cell having a cell wall by using dendrimers, and optionally one or more Cell Penetrating Peptides (CPPs). Methods are provided for genetically or otherwise modifying plants and for treating or preventing disease in plant cells comprising a cell wall.

摘要翻译： 提供了通过使用树枝状大分子和任选的一种或多种细胞穿透肽（CPP）将感兴趣的分子引入具有细胞壁的植物细胞的方法。 提供用于遗传或其他修饰植物和用于治疗或预防包含细胞壁的植物细胞中的疾病的方法。

公开(公告)号：US20120023620A1

公开(公告)日：2012-01-26

申请号：US13178235

申请日：2011-07-07

申请人： Kerrm Y. Yau ,  Jayakumar P. Samuel ,  Frank Burroughs ,  Narasimha C. Samboju ,  Steven R. Webb

发明人： Kerrm Y. Yau ,  Jayakumar P. Samuel ,  Frank Burroughs ,  Narasimha C. Samboju ,  Steven R. Webb

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N5/04 ,  B82Y5/00

CPC分类号： C12N15/8206 ,  B82Y5/00 ,  C12N15/8201 ,  C12N15/8207 ,  C12N15/87 ,  C12Q2600/13

摘要： Methods for introducing a functionalized linear nucleic acid cassette molecule of interest into a plant cell comprising a cell wall include use of nanoparticles. In some embodiments, the cell comprising a cell wall is a cultured plant cell. Methods include genetically or otherwise modifying plant cells and for treating or preventing disease in any plant, especially crop plants. Transgenic plants include a nucleic acid molecule of interest produced by regeneration of whole plants from plant cells transformed with functionalized linear nucleic acid cassette molecules.

摘要翻译： 将功能化的线性核酸盒分子引入到包含细胞壁的植物细胞中的方法包括使用纳米颗粒。 在一些实施方案中，包含细胞壁的细胞是培养的植物细胞。 方法包括遗传或其他修饰植物细胞和用于治疗或预防任何植物，特别是作物植物中的疾病。 转基因植物包括通过使用官能化的线性核酸盒分子转化的植物细胞再生整个植物产生的目的核酸分子。

公开(公告)号：US20120023619A1

公开(公告)日：2012-01-26

申请号：US13178199

申请日：2011-07-07

申请人： Narasimha C. Samboju ,  Kerrm Y. Yau ,  Frank Burroughs ,  Jayakumar P. Samuel ,  Steven R. Webb

发明人： Narasimha C. Samboju ,  Kerrm Y. Yau ,  Frank Burroughs ,  Jayakumar P. Samuel ,  Steven R. Webb

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N5/04 ,  B82Y5/00

CPC分类号： C12N15/8206 ,  B82Y5/00 ,  C12N15/8207 ,  C12N15/8221

摘要： Methods for introducing a linear nucleic acid molecule of interest into a cell comprising a cell wall include use of nanoparticles coated with polyethylene glycol. In some embodiments, the cell comprising a cell wall is a plant cell. Methods include genetically or otherwise modifying plants and for treating or preventing disease in plant cells comprising a cell wall. Transgenic plants include a nucleic acid molecule of interest produced by regeneration of whole plants from plant cells transformed with linear nucleic acid molecules.

摘要翻译： 将目的线性核酸分子引入到包含细胞壁的细胞中的方法包括使用涂覆有聚乙二醇的纳米颗粒。 在一些实施方案中，包含细胞壁的细胞是植物细胞。 方法包括遗传或其他修饰植物和用于治疗或预防包含细胞壁的植物细胞中的疾病。 转基因植物包括由用线性核酸分子转化的植物细胞再生整株植物产生的目的核酸分子。

公开(公告)号：US08653327B2

公开(公告)日：2014-02-18

申请号：US13178199

申请日：2011-07-07

申请人： Narasimha C. Samboju ,  Kerrm Y. Yau ,  Frank Burroughs ,  Jayakumar P. Samuel ,  Steven R. Webb

发明人： Narasimha C. Samboju ,  Kerrm Y. Yau ,  Frank Burroughs ,  Jayakumar P. Samuel ,  Steven R. Webb

IPC分类号： C07K14/415 ,  A01H5/10 ,  A01H1/04 ,  A01H1/02 ,  B82Y30/00 ,  B82Y10/00 ,  B82Y5/00 ,  C12N15/87

CPC分类号： C12N15/8206 ,  B82Y5/00 ,  C12N15/8207 ,  C12N15/8221

摘要： Methods for introducing a linear nucleic acid molecule of interest into a cell comprising a cell wall include use of nanoparticles coated with polyethylene glycol. In some embodiments, the cell comprising a cell wall is a plant cell. Methods include genetically or otherwise modifying plants and for treating or preventing disease in plant cells comprising a cell wall. Transgenic plants include a nucleic acid molecule of interest produced by regeneration of whole plants from plant cells transformed with linear nucleic acid molecules.

摘要翻译： 将目的线性核酸分子引入到包含细胞壁的细胞中的方法包括使用涂覆有聚乙二醇的纳米颗粒。 在一些实施方案中，包含细胞壁的细胞是植物细胞。 方法包括遗传或其他修饰植物和用于治疗或预防包含细胞壁的植物细胞中的疾病。 转基因植物包括由用线性核酸分子转化的植物细胞再生整株植物产生的目的核酸分子。

公开(公告)号：US08609420B2

公开(公告)日：2013-12-17

申请号：US13427750

申请日：2012-03-22

申请人： Jayakumar P. Samuel ,  Narasimha C. Samboju ,  Kerrm Y. Yau ,  Gaofeng Lin ,  Steven R. Webb ,  Frank Burroughs

发明人： Jayakumar P. Samuel ,  Narasimha C. Samboju ,  Kerrm Y. Yau ,  Gaofeng Lin ,  Steven R. Webb ,  Frank Burroughs

IPC分类号： C07K14/415 ,  C12N15/87 ,  C12N15/74 ,  A01H5/10 ,  B82Y10/00 ,  B82Y30/00 ,  B82Y5/00

CPC分类号： C12N15/8206 ,  B82Y5/00 ,  C12N15/8207 ,  C12N15/8221

摘要： Provided are methods for introducing a molecule of interest into a plant cell having a cell wall by using a QD-peptide conjugate having a quantum dot (QD) with one or more cell penetrating peptides (CPPs). Methods are provided for genetically or otherwise modifying plants and for treating or preventing disease in plant cells comprising a cell wall.

摘要翻译： 提供通过使用具有一个或多个细胞穿透肽（CPP）的具有量子点（QD）的QD-肽缀合物将感兴趣的分子引入具有细胞壁的植物细胞的方法。 提供用于遗传或其他修饰植物以及用于治疗或预防包含细胞壁的植物细胞中的疾病的方法。

公开(公告)号：US20110247100A1

公开(公告)日：2011-10-06

申请号：US13042565

申请日：2011-03-08

申请人： Narasimha C. Samboju ,  Jayakumar P. Samuel ,  Gaofeng Lin ,  Steven R. Webb ,  Frank Burroughs

发明人： Narasimha C. Samboju ,  Jayakumar P. Samuel ,  Gaofeng Lin ,  Steven R. Webb ,  Frank Burroughs

IPC分类号： A01H5/00 ,  C12N5/04 ,  C12N5/10 ,  C12N9/00

CPC分类号： C12N15/8206

摘要： A method of introducing a molecule of interest into a plant cell having a cell wall includes interacting a gamma-zein peptide with a molecule of interest to form a gamma-zein linked structure. The gamma-zein linked structure is then placed in contact with the plant cell having a cell wall, and allowing uptake of the gamma-zein linked structure into the plant cell. Alternatively, a gene of interest can be expressed in a plant cell having an intact cell wall by interacting a gamma-zein peptide with the gene of interest to form a gamma-zein linked gene structure, allowing uptake of the gamma-zein linked gene structure into the plant cell, and expressing the gene of interest in the plant cell and its progeny.

摘要翻译： 将感兴趣的分子引入具有细胞壁的植物细胞中的方法包括将γ-玉米醇溶蛋白肽与感兴趣的分子相互作用以形成γ-玉米醇溶蛋白连接的结构。 然后将γ-玉米醇溶蛋白连接的结构与具有细胞壁的植物细胞接触，并允许将γ-玉米醇溶蛋白连接的结构摄取到植物细胞中。 或者，通过将γ-玉米醇溶蛋白肽与感兴趣的基因相互作用以形成γ-玉米醇溶蛋白连接的基因结构，可以在具有完整细胞壁的植物细胞中表达感兴趣的基因，从而允许γ-玉米醇溶蛋白连接的基因结构 进入植物细胞，并在植物细胞及其后代中表达感兴趣的基因。