公开(公告)号：US20080299609A1

公开(公告)日：2008-12-04

申请号：US11823123

申请日：2007-06-26

申请人： Suk-Tae Kwon ,  Mi-Sun Lee ,  Gun-A. Kim ,  Jung-Hyun Lee

发明人： Suk-Tae Kwon ,  Mi-Sun Lee ,  Gun-A. Kim ,  Jung-Hyun Lee

IPC分类号： C12P21/04 ,  C12N9/24 ,  C12N15/11 ,  C12N9/00 ,  C12P19/34 ,  C12N15/00 ,  C12N1/20

CPC分类号： C12Y302/02027 ,  C12N9/2497 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q2521/531

摘要： The present invention provides uracil-DNA glycosylase (UDG) gene originating from Psychrobacter sp. HJ147, and amino acid sequences deduced from the gene; expression and purification of Psp HJ147 UDG gene in Escherichia coli; and characterization of UDG obtained therefrom, and the use thereof in a polymerase chain reaction (PCR). The UDG according to the present invention has a specific activity of excising uracil bases in a uracil-containing DNA substrates at a low temperature, and is easily heat-inactivated. It thus can effectively eliminate cross contamination and carry-over contamination of PCR templates often occurring after a PCR process using dUTP. Therefore, it is useful for increasing preciseness (elimination of false positives), purity and amplification efficiency of PCR.

摘要翻译： 本发明提供源自Psychrobacter sp。的尿嘧啶-DNA糖基化酶（UDG）基因。 HJ147和从该基因推导出的氨基酸序列; 在大肠杆菌中表达和纯化Psp HJ147 UDG基因; 和由其获得的UDG的表征，以及其在聚合酶链式反应（PCR）中的用途。 根据本发明的UDG在低温下具有在含尿嘧啶DNA基质中的尿嘧啶碱基的比活性，并且容易热灭活。 因此，可以有效地消除在使用dUTP的PCR过程之后经常发生的PCR模板的交叉污染和携带污染。 因此，提高PCR的精确度（消除假阳性），纯度和扩增效率是有用的。