公开(公告)号：US5766884A

公开(公告)日：1998-06-16

申请号：US466443

申请日：1995-06-06

申请人： Tim M. Townes ,  Thomas M. Ryan ,  Richard D. Palmiter ,  Ralph L. Brinster ,  Richard R. Behringer

发明人： Tim M. Townes ,  Thomas M. Ryan ,  Richard D. Palmiter ,  Ralph L. Brinster ,  Richard R. Behringer

IPC分类号： A01K67/027 ,  A61K38/00 ,  A61K48/00 ,  C07K14/805 ,  C12N15/85 ,  C12N15/00 ,  C12N15/79

CPC分类号： C12N15/8509 ,  A01K67/0275 ,  A01K67/0278 ,  A61K48/00 ,  C07K14/805 ,  C12N15/85 ,  A01K2207/15 ,  A01K2217/00 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/105 ,  A01K2227/108 ,  A01K2267/01 ,  A01K2267/0306 ,  A01K2267/0381 ,  A61K38/00 ,  C12N2830/00 ,  C12N2830/008 ,  C12N2830/85 ,  Y10S435/948

摘要： The present invention relates to the synthesis of functional human hemoglobin and other proteins in erythroid tissues of transgenic non-human animals and erythroid cell lines. It is based on the discovery that two of the five hypersensitivity sites of the .beta.-globin locus are sufficient to result in high level expression of human .alpha.- or .beta.-globin transgenes. The present invention also provides for novel recombinant nucleic acid vectors which may be used to produce .alpha.-globin as well as other proteins of interest in quantity in the red blood cells of transgenic animals or cell cultures of erythroid lineage. The vectors of the invention comprise at least one of the major DNase I hypersensitivity sites associated with the .beta.-globin locus together with a gene of interest. In a specific embodiment of the invention, a vector which comprises two DNase I hypersensitivity sites together with the human .alpha.-globin gene is used to create transgenic animals which produce human .alpha.-globin protein in erythroid tissues, including red blood cells. In a preferred specific embodiment of the invention, transgenic animals are created which comprise human .alpha.-globin and .beta.-globin genes, each under the transcriptional influence of two .beta.-globin locus DNase hypersensitivity sites; these transgenic animals express human hemoglobin in their erythroid tissues, and can be used to produce human hemoglobin in quantity.

摘要翻译： 本发明涉及转基因非人动物和红系细胞系的红细胞组织中功能性人血红蛋白和其他蛋白质的合成。 基于以下发现：β-珠蛋白基因座的五个超敏性位点中的两个足以导致人α或β-珠蛋白转基因的高水平表达。 本发明还提供新的重组核酸载体，其可用于在转基因动物或红细胞谱系的细胞培养物的红细胞中产生量的α-珠蛋白以及其它目标蛋白。 本发明的载体包含与β-球蛋白基因座相关联的主要DNA酶I超敏反应位点与感兴趣的基因中的至少一种。 在本发明的一个具体实施方案中，使用包含两个DNA酶I超敏反应位点与人α-珠蛋白基因一起的载体来产生在包括红细胞在内的红细胞组织中产生人α-珠蛋白的转基因动物。 在本发明的优选具体实施方案中，产生包含人α-珠蛋白和β-珠蛋白基因的转基因动物，每个基因在两个β-球蛋白基因座DNA酶超敏位点的转录影响下; 这些转基因动物在其红细胞组织中表达人血红蛋白，并且可用于量产生人血红蛋白。

公开(公告)号：US5602306A

公开(公告)日：1997-02-11

申请号：US275313

申请日：1994-07-13

申请人： Tim M. Townes ,  Thomas M. Ryan ,  Richard D. Palmiter ,  Ralph L. Brinster ,  Richard R. Behringer

发明人： Tim M. Townes ,  Thomas M. Ryan ,  Richard D. Palmiter ,  Ralph L. Brinster ,  Richard R. Behringer

IPC分类号： A01K67/027 ,  A61K38/00 ,  A61K48/00 ,  C07K14/805 ,  C12N15/85 ,  C12N15/00

CPC分类号： C12N15/8509 ,  A01K67/0275 ,  A01K67/0278 ,  A61K48/00 ,  C07K14/805 ,  C12N15/85 ,  A01K2207/15 ,  A01K2217/00 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/105 ,  A01K2227/108 ,  A01K2267/01 ,  A01K2267/0306 ,  A01K2267/0381 ,  A61K38/00 ,  C12N2830/00 ,  C12N2830/008 ,  C12N2830/85 ,  Y10S435/948

摘要： The present invention relates to the synthesis of functional human hemoglobin and other proteins in erythroid tissues of transgenic non-human animals and erythroid cell lines. It is based on the discovery that two of the five hypersensitivity sites of the .beta.-globin locus are sufficient to result in high level expression of human .alpha.- or .beta.-globin transgenes. The present invention also provides for novel recombinant nucleic acid vectors which may be used to produce .alpha.-globin as well as other proteins of interest in quantity in the red blood cells of transgenic animals or cell cultures of erythroid lineage. The vectors of the invention comprise at least one of the major DNase I hypersensitivity sites associated with the .beta.-globin locus together with a gene of interest. In a specific embodiment of the invention, a vector which comprises two DNase I hypersensitivity sites together with the human .alpha.-globin gene is used to create transgenic animals which produce human .alpha.-globin protein in erythroid tissues, including red blood cells. In a preferred specific embodiment of the invention, transgenic animals are created which comprise human .alpha.-globin and .beta.-globin genes, each under the transcriptional influence of two .beta.-globin locus DNase hypersensitivity sites; these transgenic animals express human hemoglobin in their erythroid tissues, and can be used to produce human hemoglobin in quantity.

摘要翻译： 本发明涉及转基因非人动物和红系细胞系的红细胞组织中功能性人血红蛋白和其他蛋白质的合成。 基于以下发现：β-珠蛋白基因座的五个超敏性位点中的两个足以导致人α或β-珠蛋白转基因的高水平表达。 本发明还提供新的重组核酸载体，其可用于在转基因动物或红细胞谱系的细胞培养物的红细胞中产生量的α-珠蛋白以及其它目标蛋白。 本发明的载体包含与β-球蛋白基因座相关联的主要DNA酶I超敏反应位点与感兴趣的基因中的至少一种。 在本发明的一个具体实施方案中，使用包含两个DNA酶I超敏反应位点与人α-珠蛋白基因一起的载体来产生在包括红细胞在内的红细胞组织中产生人α-珠蛋白的转基因动物。 在本发明的优选具体实施方案中，产生包含人α-珠蛋白和β-珠蛋白基因的转基因动物，每个基因在两个β-球蛋白基因座DNA酶超敏位点的转录影响下; 这些转基因动物在其红细胞组织中表达人血红蛋白，并且可用于量产生人血红蛋白。

公开(公告)号：US06613957B1

公开(公告)日：2003-09-02

申请号：US09388401

申请日：1999-09-01

申请人： Tim M. Townes ,  Thomas M. Ryan ,  Richard D. Palmiter ,  Ralph L. Brinster ,  Richard R. Behringer

发明人： Tim M. Townes ,  Thomas M. Ryan ,  Richard D. Palmiter ,  Ralph L. Brinster ,  Richard R. Behringer

IPC分类号： A01K67027

CPC分类号： C12N15/8509 ,  A01K67/0275 ,  A01K67/0278 ,  A01K2207/15 ,  A01K2217/00 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/105 ,  A01K2227/108 ,  A01K2267/01 ,  A01K2267/0306 ,  A01K2267/0381 ,  A61K38/00 ,  A61K48/00 ,  C07K14/805 ,  C12N15/85 ,  C12N2830/00 ,  C12N2830/008 ,  C12N2830/85 ,  Y10S435/948

摘要： The present invention relates to the synthesis of functional human hemoglobin and other proteins in erythroid tissues of transgenic non-human animals and erythroid cell lines. It is based on the discovery that two of the five hypersensitivity sites of the &bgr;-globin locus are sufficient to result in high level expression of human &agr;- or &bgr;-globin transgenes.

摘要翻译： 本发明涉及转基因非人动物和红系细胞系的红细胞组织中功能性人血红蛋白和其他蛋白质的合成。 基于以下发现：β珠蛋白基因座的五个超敏反应位点中的两个足以导致人α或β-珠蛋白转基因的高水平表达。

公开(公告)号：US6022736A

公开(公告)日：2000-02-08

申请号：US471483

申请日：1995-06-06

申请人： Tim M. Townes ,  Thomas M. Ryan ,  Richard D. Palmiter ,  Ralph L. Brinster ,  Richard R. Behringer

发明人： Tim M. Townes ,  Thomas M. Ryan ,  Richard D. Palmiter ,  Ralph L. Brinster ,  Richard R. Behringer

IPC分类号： A01K67/027 ,  A61K38/00 ,  A61K48/00 ,  C07K14/805 ,  C12N15/85 ,  C12N15/63 ,  C12N5/00 ,  C12N15/00 ,  C12N15/09

CPC分类号： C12N15/8509 ,  A01K67/0275 ,  A01K67/0278 ,  A61K48/00 ,  C07K14/805 ,  C12N15/85 ,  A01K2207/15 ,  A01K2217/00 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/105 ,  A01K2227/108 ,  A01K2267/01 ,  A01K2267/0306 ,  A01K2267/0381 ,  A61K38/00 ,  C12N2830/00 ,  C12N2830/008 ,  C12N2830/85 ,  Y10S435/948

摘要： The present invention provides novel recombinant nucleic acid vectors which may be used to produce .alpha.-globin as well as other proteins of interest in quantity in the red blood cells of transgenic animals or cell cultures of erythroid lineage. The present invention also provides for the transgenic animals which contain these recombinant nucleic acid vectors. The vectors of the invention comprise at least one of the major DNase I hypersensitivity sites associated with the .beta.-globin locus together with a gene of interest. According to various embodiments of the invention, the vectors may be used to create transgenic animals or to transfect cells in culture. In a specific embodiment of the invention, a vector which comprises two DNase I hypersensitivity sites together with the human .alpha.-globin gene is used to create transgenic animals which produce human .alpha.-globin protein in erythroid tissues, including red blood cells. In a preferred specific embodiment of the invention, transgenic animals are created which comprise human .alpha.-globin and .beta.-globin genes, each under the transcriptional influence of two .beta.-globin locus DNase hypersensitivity sites; these transgenic animals express human hemoglobin in their erythroid tissues, and can be used to produce human hemoglobin in quantity.

摘要翻译： 本发明提供新的重组核酸载体，其可用于在转基因动物或红细胞谱系的细胞培养物的红细胞中产生量的α-珠蛋白以及其它目标蛋白。 本发明还提供含有这些重组核酸载体的转基因动物。 本发明的载体包含与β-球蛋白基因座相关联的主要DNA酶I超敏反应位点与感兴趣的基因中的至少一种。 根据本发明的各种实施方案，载体可用于产生转基因动物或转染培养物中的细胞。 在本发明的一个具体实施方案中，使用包含两个DNA酶I超敏反应位点与人α-珠蛋白基因一起的载体来产生在包括红细胞在内的红细胞组织中产生人α-珠蛋白的转基因动物。 在本发明的优选具体实施方案中，产生包含人α-珠蛋白和β-珠蛋白基因的转基因动物，每个基因在两个β-球蛋白基因座DNA酶超敏位点的转录影响下; 这些转基因动物在其红细胞组织中表达人血红蛋白，并且可用于量产生人血红蛋白。

公开(公告)号：US5877288A

公开(公告)日：1999-03-02

申请号：US261664

申请日：1994-06-17

申请人： Tim M. Townes ,  Steven L. McCune

发明人： Tim M. Townes ,  Steven L. McCune

IPC分类号： A61K38/00 ,  C07K14/805

CPC分类号： C07K14/805 ,  A61K38/00

摘要： Disclosed are anti-sickling human hemoglobins for use as sickle cell anemia therapeutics.

公开(公告)号：US5610137A

公开(公告)日：1997-03-11

申请号：US100465

申请日：1993-07-30

申请人： Tim M. Townes ,  Steven L. McCune

发明人： Tim M. Townes ,  Steven L. McCune

IPC分类号： A01K67/027 ,  A61K38/00 ,  A61K38/16 ,  A61P7/08 ,  C07K14/00 ,  C07K14/805 ,  C07K19/00 ,  C12N15/00 ,  C12N15/09 ,  C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12P21/02 ,  C07K1/00 ,  C07K2/00 ,  C12P21/06

CPC分类号： C12N15/8509 ,  A01K67/0278 ,  C07K14/805 ,  A01K2207/15 ,  A01K2217/00 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/105 ,  A01K2267/01 ,  A61K38/00

摘要： Transgenic, recombinantly cross-linked polymeric human hemoglobins suitable as cell-free blood substitutes have been produced. A plurality of DNA constructs have been designed for efficient expression of modified human hemoglobins in the erythrocytes of the non-human transgenic animals. Substantially pure, non-immunogenic, artificial human hemoglobins are then easily obtained from the erythroid cells of the transgenic animals.

摘要翻译： 已经生产了适合作为无细胞血液代用品的转基因重组交联聚合人血红蛋白。 已经设计了多个DNA构建体用于在非人转基因动物的红细胞中有效表达修饰的人血红蛋白。 然后可以从转基因动物的红细胞容易地获得基本上纯的，非免疫原性的人造血红蛋白。

公开(公告)号：US06475740B2

公开(公告)日：2002-11-05

申请号：US09955518

申请日：2001-09-18

申请人： Tim M. Townes ,  David Donze

发明人： Tim M. Townes ,  David Donze

IPC分类号： C12Q168

CPC分类号： A61K31/711 ,  A61K48/00 ,  C07K14/4702 ,  C07K14/805 ,  C12N15/85 ,  C12N2799/025 ,  C12N2800/108 ,  C12N2830/00 ,  C12N2830/008 ,  C12N2830/15 ,  C12N2830/85 ,  C12N2840/20

摘要： The invention features &dgr;-erythroid krüppel-like factors (&dgr;-EKLFs), and methods of using nucleic acids encoding &dgr;-EKLFs to increase &dgr;-globin gene expression in a cell.

摘要翻译： 本发明的特征在于δ-红系krüppel样因子（delta-EKLFs），以及使用编码δ-EKLFs的核酸增加细胞中δ-珠蛋白基因表达的方法。

公开(公告)号：US06306650B1

公开(公告)日：2001-10-23

申请号：US08874569

申请日：1997-06-13

申请人： Tim M. Townes ,  David Donze

发明人： Tim M. Townes ,  David Donze

IPC分类号： C12N510

CPC分类号： A61K31/711 ,  A61K48/00 ,  C07K14/4702 ,  C07K14/805 ,  C12N15/85 ,  C12N2799/025 ,  C12N2800/108 ,  C12N2830/00 ,  C12N2830/008 ,  C12N2830/15 ,  C12N2830/85 ,  C12N2840/20

摘要： The invention features &dgr;-erythroid krüppel-like factors (&dgr;-EKLFs), and methods of using nucleic acids encoding &dgr;-EKLFs to increase &dgr;-globin gene expression in a cell.

摘要翻译： 本发明的特征在于δ-红系krüppel样因子（delta-EKLFs），以及使用编码δ-EKLFs的核酸增加细胞中δ-珠蛋白基因表达的方法。

公开(公告)号：US5849688A

公开(公告)日：1998-12-15

申请号：US816118

申请日：1997-03-11

申请人： Tim M. Townes ,  Steven L. McCune

发明人： Tim M. Townes ,  Steven L. McCune

IPC分类号： A01K67/027 ,  A61K38/00 ,  A61K38/16 ,  A61P7/08 ,  C07K14/00 ,  C07K14/805 ,  C07K19/00 ,  C12N15/00 ,  C12N15/09 ,  C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  C12P21/02

CPC分类号： C12N15/8509 ,  A01K67/0278 ,  C07K14/805 ,  A01K2207/15 ,  A01K2217/00 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/105 ,  A01K2267/01 ,  A61K38/00

摘要： Transgenic, recombinantly cross-linked polymeric human hemoglobins suitable as cell-free blood substitutes have been produced. A plurality of DNA constructs have been designed for efficient expression of modified human hemoglobins in the erythrocytes of the non-human transgenic animals. Substantially pure, non-immunogenic, artificial human hemoglobins are then easily obtained from the erythroid cells of the transgenic animals.

摘要翻译： 已经生产了适合作为无细胞血液代用品的转基因重组交联聚合人血红蛋白。 已经设计了多个DNA构建体用于在非人转基因动物的红细胞中有效表达修饰的人血红蛋白。 然后可以从转基因动物的红细胞容易地获得基本上纯的，非免疫原性的人造血红蛋白。

公开(公告)号：US5864029A

公开(公告)日：1999-01-26

申请号：US460924

申请日：1995-06-05

申请人： Tim M. Townes ,  Steven L. McCune

发明人： Tim M. Townes ,  Steven L. McCune

IPC分类号： A61K38/00 ,  C07K14/805 ,  C07H21/04 ,  A61K35/14

CPC分类号： C07K14/805 ,  A61K38/00

摘要： Disclosed are anti-sickling human hemoglobins for use as sickle cell anemia therapeutics.

摘要翻译： 公开了用作镰状细胞贫血治疗剂的抗镰状人血红蛋白。