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公开(公告)号：CN113817686B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202010560039.4
申请日：2020-06-18
申请人： 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/18 , C07K14/765 , C07K1/22 , G01N33/68 , G01N33/577
摘要： 本发明公开了一种杂交瘤细胞株及其分泌的单克隆抗体和应用，所述杂交瘤细胞株的保藏编号为CCTCC NO：C2020105，能够分泌抗人血清白蛋白的单克隆抗体，单克隆抗体的腹水间接ELISA效价大于10‑5，IAC纯化的纯度高达99.971％。利用本发明获得的杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体，可用于极微量白蛋白的检测、残留量白蛋白的检测、制备纯化亲和层析柱和免疫学检测试剂盒等，稳定性好，保质期长。
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公开(公告)号：CN109957521A
公开(公告)日：2019-07-02
申请号：CN201711421153.3
申请日：2017-12-25
申请人： 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
摘要： 本发明公开了一种表达人血清白蛋白的基因工程菌，其是在巴斯德毕赤氏酵母菌(Pichia pastoris)中整合有人血清白蛋白基因的表达载体的工程菌，所述的表达载体依次含有启动子、α引导肽、人血清白蛋白基因和终止子；所述的基因工程菌具有抗遗传霉素性能。利用该基因工程菌进行人血清白蛋白的表达时，甲醇诱导96小时后蛋白的产量即可达8.86g/L，生产效率可达92.29mg/L/h；且发酵过程中可无需通入无菌氧气。因此，本发明中的菌株生产效率明显更高，能大幅度缩短生产周期，降低时间及人员和设备运作成本，产业化意义较大。
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公开(公告)号：CN104805167B
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201410038238.3
申请日：2014-01-26
申请人： 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
摘要： 本发明公开了一种生产β‑胡萝卜素的方法及其基因工程菌。其中包括以下步骤：培养大肠杆菌基因工程菌，从发酵液中获得β‑胡萝卜素，所述的大肠杆菌基因工程菌是含有外源的含四个β‑胡萝卜素合成基因的表达载体的大肠杆菌，该四个β‑胡萝卜素合成基因分别是：crtE、crtI、crtB和crtY，并且，所述的大肠杆菌基因工程菌还含有含四个MEP途径基因的表达载体，该四个MEP途径基因分别是：dxs、idi、ispD和ispF。本发明过表达MEP途径中的4个酶，构建不同强度启动子的MEP途径，从而提高β‑胡萝卜素的产量。
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公开(公告)号：CN103374558B
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201210109382.2
申请日：2012-04-13
申请人： 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
摘要： 本发明公开了一种一步法裂解CPC生产7-ACA的酰化酶及编码它的多核苷酸，含有该核苷酸序列的重组表达载体和重组表达转化体及其制备方法，以及该重组酶在合成7-ACA中的应用。所述CPC酰化酶是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的第180位的缬氨酸经过取代且具有CPC酰化酶活性的蛋白质；(b)在(a)中的氨基酸序列的N端或C端添加一个或几个氨基酸且具有CPC酰化酶活性的由(a)衍生的蛋白质。本发明公开的CPC酰化酶的酶活性和底物耐受性均有提高，从而为CPC酰化酶的人工定向进化改造提供了有力前提。
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公开(公告)号：CN103374579A
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201210109366.3
申请日：2012-04-13
申请人： 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
IPC分类号： C12N15/31 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , C07K1/36 , C07K1/22 , C07K1/20 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种菌丝霉素及其基因和制备方法。所述的菌丝霉素的基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示。本发明公开了菌丝霉素融合蛋白的基因序列、氨基酸序列、包含该基因的重组表达载体以及包含编码菌丝霉素融合蛋白基因的重组表达转化体；所述融合蛋白基因序列中含His-tag和TEV酶的酶切位点。所述菌丝霉素的制备方法包括以下步骤：培养本发明所述的重组表达转化体；分离纯化所得的菌丝霉素融合蛋白；加入TEV酶进行酶切；分离纯化得到菌丝霉素蛋白即可。本发明使菌丝霉素表达量大大提高，分离纯化也更简单易行。本发明纯化得到的菌丝霉素可以有效抑制革兰氏阳性菌枯草杆菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的生长。
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公开(公告)号：CN103374563A
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201210109345.1
申请日：2012-04-13
申请人： 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
摘要： 本发明公开了一种改良7-ACA产生菌的方法，包括以下步骤：1)取含有不同抗性筛选标记基因的两个亲本，其中第一亲本是含有外源野生型头孢菌素C酰基转移酶的基因的顶头孢霉(Acremonium chrysogenum)基因工程菌，第二亲本是含有外源头孢菌素C酰基转移酶正向突变体的基因的顶头孢霉基因工程菌，该头孢菌素C酰基转移酶正向突变体的酶活性和头孢菌素C底物耐受性比野生型均有提高，分别用第一亲本和第二亲本的孢子制备原生质体；2)进行原生质体融合；3)将融合子摇瓶发酵，选择7-ACA含量比两亲本高的融合子即为改良的7-ACA产生菌。本发明的方法可以方便、有效、快速的得到7-ACA产量大幅提高的菌株。
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公开(公告)号：CN111748505B
公开(公告)日：2022-12-30
申请号：CN201910245430.2
申请日：2019-03-28
申请人： 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
摘要： 本发明公开了一种表达羧肽酶G2的基因工程菌及其制备方法和应用。所述的基因工程菌为大肠杆菌(Escherichia coli)中同时表达SUMO蛋白标签和羧肽酶G2基因的基因工程菌，表达所述SUMO蛋白标签的SMT3基因位于表达所述羧肽酶G2的CPG2基因的上游。利用本发明的基因工程菌进行CPG2的制备，具有表达效率高、表达量大、成本低且易操作等特点，且所表达的重组CPG2蛋白纯度高(可高达99.1％)、活性高(可高达1792U/mg)，具有良好的产业化应用前景。
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公开(公告)号：CN111748505A
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201910245430.2
申请日：2019-03-28
申请人： 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
摘要： 本发明公开了一种表达羧肽酶G2的基因工程菌及其制备方法和应用。所述的基因工程菌为大肠杆菌(Escherichia coli)中同时表达SUMO蛋白标签和羧肽酶G2基因的基因工程菌，表达所述SUMO蛋白标签的SMT3基因位于表达所述羧肽酶G2的CPG2基因的上游。利用本发明的基因工程菌进行CPG2的制备，具有表达效率高、表达量大、成本低且易操作等特点，且所表达的重组CPG2蛋白纯度高(可高达99.1％)、活性高(可高达1792U/mg)，具有良好的产业化应用前景。
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公开(公告)号：CN111662944A
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201910164725.7
申请日：2019-03-05
申请人： 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
IPC分类号： C12P21/02 , C12N15/81 , C07K14/765 , C07K1/22 , C12R1/84
摘要： 本发明提供了一种人血清白蛋白的制备方法，其包括将产人血清白蛋白的巴斯德毕赤酵母菌接种于培养基中发酵，从发酵液中获得人血清白蛋白即可；所述培养基为除了甘油和毕赤酵母微量元素1两种组分外，其余组分浓度均至多降低为1/4的BSM培养基，优选降低为1/4～1/2的BSM培养基。本发明还提供了一种人血清白蛋白的纯化方法。利用本发明的制备方法制得的人血清白蛋白的产量及其占总蛋白的比例均显著高于现有技术，且该制备方法中所使用的培养基成本显著降低，且无动物源性病毒污染的风险，从而显著降低制备方法的成本。利用本发明所述的纯化方法纯化的回收率显著提升，并且最终产品的纯度也显著进一步提升。
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公开(公告)号：CN103374558A
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201210109382.2
申请日：2012-04-13
申请人： 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
摘要： 本发明公开了一种一步法裂解CPC生产7-ACA的酰化酶及编码它的多核苷酸，含有该核苷酸序列的重组表达载体和重组表达转化体及其制备方法，以及该重组酶在合成7-ACA中的应用。所述CPC酰化酶是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列的第180位的缬氨酸经过取代且具有CPC酰化酶活性的蛋白质；(b)在(a)中的氨基酸序列的N端或C端添加一个或几个氨基酸且具有CPC酰化酶活性的由(a)衍生的蛋白质。本发明公开的CPC酰化酶的酶活性和底物耐受性均有提高，从而为CPC酰化酶的人工定向进化改造提供了有力前提。
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