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    一种皮肤成纤维细胞培养的选择性培养基及其制备方法
    1.
    发明授权
    一种皮肤成纤维细胞培养的选择性培养基及其制备方法 有权

    公开(公告)号：CN107418926B

    公开(公告)日：2018-07-06

    申请号：CN201710735226.X

    申请日：2017-08-24

    申请人： 上海科医联创生物科技有限公司

    发明人： 柴勋 ,  杨娟 ,  刘根桃 ,  吴国祥

    IPC分类号： C12N5/071

    摘要： 一种皮肤成纤维细胞培养的选择性培养基，包括基础培养基、胎牛血清、人血清白蛋白、牛脑垂体提取物、胰岛素、维生素C、生物素、胰岛素样生长因子和表皮生长因子，并且按照1ml：0.0125ml‑0.05ml：0.005ml‑0.025ml：80μg‑423μg：7μg‑18μg：22μg‑60μg：37μg‑214μg：1μg‑20μg：0.1μg‑1μg的比例混合；所述基础培养包括DMEM培养基和F12培养基。本发明的优点在于对成纤维细胞具有选择性，提高成纤维细胞的纯度，避免杂细胞污染，有效缩短细胞传代数，细胞增殖速度快。本发明的选择性培养基还能够降低血清使用量，节约成本。

    一种TM4SF1特异性嵌合抗原受体及其应用
    3.
    发明授权
    一种TM4SF1特异性嵌合抗原受体及其应用 有权 转让

    公开(公告)号：CN107216395B

    公开(公告)日：2018-07-20

    申请号：CN201710533614.X

    申请日：2017-07-03

    申请人： 上海科医联创生物科技有限公司

    发明人： 郝瑞栋 ,  刘根桃 ,  吴国祥

    IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N5/10 ,  A61K35/17 ,  A61P35/00

    摘要： 本发明公开了一种TM4SF1特异性嵌合抗原受体，包含胞外识别区、铰链区、跨膜区和胞内信号区，其中胞外识别区为scFv序列，铰链区为CD8区域，跨膜区为CD8跨膜区或CD28跨膜区中的任一个，胞内信号区包含CD28、4‑1BB、CD3ζ中的至少一个；上述嵌合抗原受体具体为L6‑28Z、L6‑BBZ和L6‑28BBZ，其分别由SEQ ID NO.12～SEQ ID NO.14所示序列的核酸编码；本发明还提供一种包含上述核酸的重组表达载体及其宿主细胞、构建方法、在哺乳动物肿瘤治疗中的应用，本发明所述的TM4SF1特异性嵌合抗原受体可以通过修饰T细胞，并使特异性CAR‑T细胞高效特异的治疗实体肿瘤。

    一种自体皮肤来源的成纤维细胞培养方法
    4.
    发明授权
    一种自体皮肤来源的成纤维细胞培养方法 有权

    公开(公告)号：CN107354129B

    公开(公告)日：2018-07-06

    申请号：CN201710734675.2

    申请日：2017-08-24

    申请人： 上海科医联创生物科技有限公司

    发明人： 柴勋 ,  杨娟 ,  刘根桃 ,  吴国祥

    IPC分类号： C12N5/077 ,  C12N5/071

    摘要： 一种自体皮肤来源的成纤维细胞培养方法，包括下述步骤：1)取自体皮肤，分为多个组织块，将所述组织块贴在培养皿中，往所述组织块上滴加浓缩胎牛血清，充分浸润组织块，使组织块不易干燥，并促进成纤维细胞爬出；2)往所述步骤1)中的培养皿中加入选择培养基，将培养皿置于培养箱中培养直至成纤维细胞融合完成；所述选择培养基促进成纤维细胞生长，抑制其他杂细胞生长；3)将所述步骤2)的培养皿从培养箱中取出，加入胰酶消化，使成纤维细胞从培养皿中脱落；4)将所述步骤3)得到的成纤维细胞使用完全培养基接种至培养瓶中，并使成纤维细胞密度达到90％，得到原代成纤维细胞；所述完全培养基终止步骤3)的消化，并作为成纤维细胞生长增殖的培养基；5)将所述步骤4)中的原代成纤维细胞传代扩瓶培养。

    一种恢复衰竭性免疫细胞功能的融合蛋白及其应用
    5.
    发明授权
    一种恢复衰竭性免疫细胞功能的融合蛋白及其应用 有权 转让 质押

    公开(公告)号：CN107082812B

    公开(公告)日：2018-11-13

    申请号：CN201710197757.8

    申请日：2017-03-29

    申请人： 上海科医联创生物科技有限公司

    发明人： 岳喜连 ,  刘根桃 ,  吴国祥

    IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/85 ,  A61K38/17 ,  A61K38/20 ,  A61P35/00 ,  A61P31/12

    摘要： 本发明涉及一种恢复衰竭免疫细胞功能的融合蛋白，所述融合蛋白包含识别衰竭免疫细胞的功能区和激活扩增衰竭免疫细胞的功能区，两个功能区通过一定长度的非功能性氨基酸片段连接。识别功能区是利用免疫检查点特异性抗体识别衰竭性免疫细胞的表型受体；激活扩增功能区采用细胞因子或功能类似突变体、或者表面受体的配体或功能类似突变体、或者激活性抗体来激活衰竭性免疫细胞；其还涉及该融合蛋白的应用。试验表明，本发明制备的融合蛋白既能识别衰竭性免疫细胞，又能激活扩增识别的免疫细胞，恢复免疫细胞杀伤抗原阳性细胞的功能，其可增强抑制肿瘤生长和控制病毒感染的功能，具有很好的临床前景和广泛的应用范围。

    一种使用冷冻干燥的饲养层细胞制备NK的方法
    7.
    发明公开
    一种使用冷冻干燥的饲养层细胞制备NK的方法 无效

    公开(公告)号：CN109628398A

    公开(公告)日：2019-04-16

    申请号：CN201910114560.2

    申请日：2019-02-14

    申请人： 上海科医联创生物科技有限公司

    发明人： 李彦涛 ,  杨娟 ,  吴卫成 ,  郝瑞栋 ,  刘根桃 ,  吴国祥

    IPC分类号： C12N5/0783 ,  C12N15/867

    摘要： 本发明提供了一种使用冷冻干燥的饲养层细胞制备NK的方法，本发明的制备NK方法中构建表达细胞因子及膜蛋白的工程细胞，该表达细胞因子及膜蛋白的工程细胞经过冷冻干燥。本发明将饲养层细胞冷冻干燥后既保留了工程细胞作为饲养层细胞的刺激作用，又降低了细胞在灭活及保存过程中的成本，降低了实验室及临床使用中的成本并提高了其可使用的便利性。与现有的使用饲养层技术相比，在12～21天的时间获得可满足临床治疗数量的NK细胞，细胞活力高，对K562及A549都有较高的杀伤效果；相比因子法及专用的NK培养基方法，本发明在增殖倍数及数量上都有明显的优势；而干细胞诱导分化成NK后扩增获得的细胞数量及纯度都较本发明差。

    一种自体皮肤来源的成纤维细胞培养方法
    10.
    发明公开
    一种自体皮肤来源的成纤维细胞培养方法 有权

    公开(公告)号：CN107354129A

    公开(公告)日：2017-11-17

    申请号：CN201710734675.2

    申请日：2017-08-24

    申请人： 上海科医联创生物科技有限公司

    发明人： 柴勋 ,  杨娟 ,  刘根桃 ,  吴国祥

    IPC分类号： C12N5/077 ,  C12N5/071

    CPC分类号： C12N5/0656 ,  C12N5/0625 ,  C12N2501/105 ,  C12N2501/11

    摘要： 一种自体皮肤来源的成纤维细胞培养方法，包括下述步骤：1)取自体皮肤，分为多个组织块，将所述组织块贴在培养皿中，往所述组织块上滴加浓缩胎牛血清，充分浸润组织块，使组织块不易干燥，并促进成纤维细胞爬出；2)往所述步骤1)中的培养皿中加入选择培养基，将培养皿置于培养箱中培养直至成纤维细胞融合完成；所述选择培养基促进成纤维细胞生长，抑制其他杂细胞生长；3)将所述步骤2)的培养皿从培养箱中取出，加入胰酶消化，使成纤维细胞从培养皿中脱落；4)将所述步骤3)得到的成纤维细胞使用完全培养基接种至培养瓶中，并使成纤维细胞密度达到90％，得到原代成纤维细胞；所述完全培养基终止步骤3)的消化，并作为成纤维细胞生长增殖的培养基；5)将所述步骤4)中的原代成纤维细胞传代扩瓶培养。