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公开(公告)号：CN111073841A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911163531.1
申请日：2019-11-25
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种可有效表达外源蛋白的棒状杆菌ATCC 13032改良菌种，其特征在于，所述改良菌种为谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032的基础上敲除谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032中的cglIM基因、前噬菌体基因组得到的菌种。该改良菌种通过敲除前噬菌体基因、敲除限制性酶修饰系统基因使之能有效地表达外源蛋白。同时，本发明还公开了该改良菌种的构建方法。
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公开(公告)号：CN116286885A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202210900601.2
申请日：2022-07-28
IPC分类号： C12N15/50 , C12N15/11 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎KC疫苗毒株及其制备方法、疫苗，涉及生物工程技术领域。具体的，本发明基于特定的引物，以Beaudette‑p65为骨架，将Beaudette(S1)编码区的第297‑532位氨基酸替换成QX型流行毒KC毒株的S1，其他序列保持不变。成功拯救出重组病毒rIBV‑Beau‑KC(S1)。通过连续在SPF鸡胚和Vero细胞上传代，获得1株具有Vero细胞适应性的重组毒株rIBV‑Beau‑KC(S1)‑p10V9，EID50和TCID50分别为106.78/mL和105.23/mL，与母本毒相似增殖能力。
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公开(公告)号：CN112159799A
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN202010499879.4
申请日：2020-06-04
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一种基因VII型NDV突变型感染性克隆重组病毒DHN3‑mF，其序列如序列表SEQ ID NO：1所示。该病毒经过对F蛋白所对应的序列进行基因突变，使之毒性降低，但是同时保证动物产生强烈的保护性免疫反应。同时，本发明还提供了该病毒的制备方法以及基于该病毒制备的疫苗。
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公开(公告)号：CN110592108A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910894754.9
申请日：2019-09-20
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一种针对II类VII型流行NDV株DHN3的感染性重组克隆方法，包括如下步骤：步骤1：构建辅助质粒，所述辅助质粒为三种，辅助质粒上的目标片段分别为NP基因、P基因、L基因；步骤2：构建DHN3全基因组表达载体；将人工重组得到的DHN3全基因组重组入载体质粒中得到全基因组表达载体；DHN3全基因组的序列如序列表SEQ ID NO 1；步骤3：将三种辅助质粒和DHN3全基因组表达载体共转染BHK-21细胞，得到含重组病毒rDHN3的病毒液；NP基因在序列表SEQ ID NO：1中位置为1-1591nt；P基因在序列表SEQ ID NO：1中位置为1925-3109nt；L基因在序列表SEQ ID NO：1中位置为8166-15192nt。该方法可以成功的克隆出于原病毒株完全相同、无突变的重组病毒。
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公开(公告)号：CN115094088A
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210412508.7
申请日：2022-04-19
申请人： 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种pSFV‑flagX‑CMV复制子质粒，采用含塞姆利基森林病毒复制子的载体，并将p54，p22，p32，p72，pCD2v，M448R，MGF505‑7R和M1249L基因分别插入所述载体而得；所述p54，p22，p32，p72，pCD2v，M448R，MGF505‑7R基因序列依次如SEQ ID NO.15‑NO.21所示。该质粒通过插入非洲猪瘟抗原基因(X)，制得的pSFV‑flagX‑CMV复制子质粒在真核细胞能够高效表达ASFV抗原蛋白，有利于非洲猪瘟鸡尾酒DNA疫苗的研制，也有利于通过Flag抗体胶对这些蛋白进行纯化，制取有别于原核表达的，具备翻译后修饰的高质量抗原蛋白；同时，本发明还公开了该质粒的制备方法和鸡尾酒混合疫苗。
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公开(公告)号：CN114836471A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210297300.5
申请日：2022-03-24
申请人： 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC分类号： C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/113
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于敲除cFOS宿主基因的质粒，所述质粒为连接有sgRNA的载体，所述sgRNA包括添加有Bbsl酶切位点的sgRNA‑F和sgRNA‑R；sgRNA‑F如核苷酸序列SEQ ID NO：1所示；sgRNA‑R如核苷酸序列SEQ ID NO：2所示。此外还公开了敲除了cFOS宿主基因的人肺癌细胞系H1299及其制备方法和用途。本发明通过上述方案得到的H1299细胞系对于cFOS宿主基因的把控更为稳定，能够更确切的为cFOS基因及其调控基因的全功能研究。
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公开(公告)号：CN110951767B
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN201911379403.0
申请日：2019-12-27
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体为一种具有高拷贝能力的棒状杆菌和大肠杆菌双表达载体，所述表达质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示。通过在pXMJ19载体的棒状杆菌复制子调节部位，将第1786位点的核苷酸C进行人工突变，成功获得比pXMJ19质粒拷贝能力高约12.5倍的棒状杆菌/大肠杆菌双用载体pXMJ19C1786T质粒。pXMJ19质粒在棒状杆菌的拷贝数约为20，pXMJ19C1786T质粒在棒状杆菌的拷贝数为251。同时，本发明还公开了该表达质粒的构建方法。
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公开(公告)号：CN116042718A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202111261768.0
申请日：2021-10-28
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种SFV重组复制子载体表达平台的改建方法。所述改建方法包括如下步骤：分别将pSFVCs‑EGFP质粒和pSFV‑Helper1辅助质粒中的SP6启动子更换为CMV启动子，得到质粒pSFV‑EGFP‑CMV和pSFV‑Helper1‑CMV。将pSFV‑EGFP‑CMV中的模式基因EGFP更换成任意抗原基因可获得相应的，能表达特异抗原蛋白的，具自我复制能力的复制子质粒。将pSFV‑EGFP‑CMV与pSFV‑Helper1‑CMV共转染可获得重组的仅具备一代感染性的复制粒子。该系统可安全地应用一代性活病毒载体疫苗的开发以及目的蛋白的制备。
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公开(公告)号：CN110592108B
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN201910894754.9
申请日：2019-09-20
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一种针对II类VII型流行NDV株DHN3的重组克隆方法，包括如下步骤：步骤1：构建辅助质粒，所述辅助质粒为三种，辅助质粒上的目标片段分别为NP基因、P基因、L基因；步骤2：构建DHN3全基因组表达载体；将人工重组得到的DHN3全基因组重组入载体质粒中得到全基因组表达载体；DHN3全基因组的序列如序列表SEQ ID NO 1；步骤3：将三种辅助质粒和DHN3全基因组表达载体共转染BHK‑21细胞，得到含重组病毒rDHN3的病毒液；NP基因在序列表SEQ ID NO：1中位置为1‑1591nt；P基因在序列表SEQ ID NO：1中位置为1925‑3109nt；L基因在序列表SEQ ID NO：1中位置为8166‑15192nt。该方法可以成功的克隆出于原病毒株完全相同、无突变的重组病毒。
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公开(公告)号：CN110951767A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911379403.0
申请日：2019-12-27
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体为一种具有高拷贝能力的棒状杆菌和大肠杆菌双表达载体，所述表达质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示。通过在pXMJ19载体的棒状杆菌复制子调节部位，将第1786位点的核苷酸C进行人工突变，成功获得比pXMJ19质粒拷贝能力高约12.5倍的棒状杆菌/大肠杆菌双用载体pXMJ19C1786T质粒。pXMJ19质粒在棒状杆菌的拷贝数约为20，pXMJ19C1786T质粒在棒状杆菌的拷贝数为251。同时，本发明还公开了该表达质粒的构建方法。
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