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公开(公告)号：CN116286885A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202210900601.2
申请日：2022-07-28
IPC分类号： C12N15/50 , C12N15/11 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎KC疫苗毒株及其制备方法、疫苗，涉及生物工程技术领域。具体的，本发明基于特定的引物，以Beaudette‑p65为骨架，将Beaudette(S1)编码区的第297‑532位氨基酸替换成QX型流行毒KC毒株的S1，其他序列保持不变。成功拯救出重组病毒rIBV‑Beau‑KC(S1)。通过连续在SPF鸡胚和Vero细胞上传代，获得1株具有Vero细胞适应性的重组毒株rIBV‑Beau‑KC(S1)‑p10V9，EID50和TCID50分别为106.78/mL和105.23/mL，与母本毒相似增殖能力。
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公开(公告)号：CN118496325A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410623114.5
申请日：2024-05-20
申请人： 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC分类号： C07K14/165 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/62 , C12N5/10 , A61K39/215 , A61P31/14
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种用于PEDV亚单位疫苗的抗原及其制备方法、疫苗。其中，抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其可通过CHO‑K1细胞稳定表达。本发明还基于该抗原制备了PEDV亚单位疫苗，该疫苗相对于其他疫苗具有刺激机体产生抗体快、免疫副反应小、免疫抗体水平高、免疫保护效率高以及生物安全性更优等优点，有利于PEDV防控和净化。
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公开(公告)号：CN117987595A
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202410068502.1
申请日：2024-01-17
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的体系，所述基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的体系包含Cas12a蛋白和crRNA，所述crRNA通过靶标序列PAM序列后的20‑23bp的靶点序列设计得到，所述crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述靶标序列为LAMP引物组扩增得到的扩增产物序列，所述LAMP引物组是针对ASFV衣壳蛋白VP72编码基因设计得到的，此外本申请还公开了一种基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的试剂盒及基于CRISPR Cas12a检测非洲猪瘟病毒的体系的构建方法。
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公开(公告)号：CN116949093A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310215818.4
申请日：2023-03-08
摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种目的蛋白的表达载体，包括重组载体pXJ40‑TAT和重组载体pXJ40‑TAR。通过构建利用HIV‑1病毒的RNA序列TAR和其转录激活因子TAT，以及猴病毒SV40Ori构建的哺乳动物细胞高效表达载体在真核细胞中表达病毒蛋白的方法，有助于抗原的高效表达，进而开发预防病毒感染的有效疫苗；同时，本发明还公开了目的蛋白的表达方法。
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公开(公告)号：CN116606963A
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN202310564455.5
申请日：2023-05-18
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明属于生物领域，公开了一种基于LAMP和CRISPR‑Cas12a的IBV快速检测方法，包括如下步骤：步骤1：通过LAMP引物组扩增鸡传染性支气管炎病毒的目标序列；步骤2：通过与目标序列匹配的crRNA、报告探针、Cas12a蛋白对目标序列进行二次检测，以判断鸡传染性支气管炎病毒是否存在靶序列；所述LAMP引物组为第一引物组、第二引物组、第三引物组中的至少一种；所述crRNA包括与第一引物组对应的第一crRNA、与第二引物组对应的第二crRNA、与第三引物组对应的第三crRNA。该方法能够针对IBV进行高灵敏、高特异性检测，提高对IBV检测的准确度，而且操作简单、快速、对仪器设备要求低。
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公开(公告)号：CN116179583A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202211568799.5
申请日：2022-12-06
申请人： 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
摘要： 本发明公开了一种基于昆虫病毒FHV RNA1复制子在外源基因扩增中的应用，该应用通过昆虫病毒FHV RNA1复制子的自主复制能力在mRNA水平上进行外源基因的扩增；本发明公开了上述基于昆虫病毒FHV RNA1复制子的质粒系统和该质粒系统的构建方法；本发明还公开了该质粒系统在细胞中表达蛋白的方法和应用，该质粒系统在双酶切后获得克隆载体，与外源基因进行同源重组后，在细胞中表达动物或植物蛋白。
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公开(公告)号：CN111073841A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911163531.1
申请日：2019-11-25
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种可有效表达外源蛋白的棒状杆菌ATCC 13032改良菌种，其特征在于，所述改良菌种为谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032的基础上敲除谷氨酸棒状杆菌ATCC 13032中的cglIM基因、前噬菌体基因组得到的菌种。该改良菌种通过敲除前噬菌体基因、敲除限制性酶修饰系统基因使之能有效地表达外源蛋白。同时，本发明还公开了该改良菌种的构建方法。
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公开(公告)号：CN112159799A
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN202010499879.4
申请日：2020-06-04
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一种基因VII型NDV突变型感染性克隆重组病毒DHN3‑mF，其序列如序列表SEQ ID NO：1所示。该病毒经过对F蛋白所对应的序列进行基因突变，使之毒性降低，但是同时保证动物产生强烈的保护性免疫反应。同时，本发明还提供了该病毒的制备方法以及基于该病毒制备的疫苗。
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公开(公告)号：CN110592108A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910894754.9
申请日：2019-09-20
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一种针对II类VII型流行NDV株DHN3的感染性重组克隆方法，包括如下步骤：步骤1：构建辅助质粒，所述辅助质粒为三种，辅助质粒上的目标片段分别为NP基因、P基因、L基因；步骤2：构建DHN3全基因组表达载体；将人工重组得到的DHN3全基因组重组入载体质粒中得到全基因组表达载体；DHN3全基因组的序列如序列表SEQ ID NO 1；步骤3：将三种辅助质粒和DHN3全基因组表达载体共转染BHK-21细胞，得到含重组病毒rDHN3的病毒液；NP基因在序列表SEQ ID NO：1中位置为1-1591nt；P基因在序列表SEQ ID NO：1中位置为1925-3109nt；L基因在序列表SEQ ID NO：1中位置为8166-15192nt。该方法可以成功的克隆出于原病毒株完全相同、无突变的重组病毒。
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公开(公告)号：CN115094088A
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210412508.7
申请日：2022-04-19
申请人： 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
摘要： 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种pSFV‑flagX‑CMV复制子质粒，采用含塞姆利基森林病毒复制子的载体，并将p54，p22，p32，p72，pCD2v，M448R，MGF505‑7R和M1249L基因分别插入所述载体而得；所述p54，p22，p32，p72，pCD2v，M448R，MGF505‑7R基因序列依次如SEQ ID NO.15‑NO.21所示。该质粒通过插入非洲猪瘟抗原基因(X)，制得的pSFV‑flagX‑CMV复制子质粒在真核细胞能够高效表达ASFV抗原蛋白，有利于非洲猪瘟鸡尾酒DNA疫苗的研制，也有利于通过Flag抗体胶对这些蛋白进行纯化，制取有别于原核表达的，具备翻译后修饰的高质量抗原蛋白；同时，本发明还公开了该质粒的制备方法和鸡尾酒混合疫苗。
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