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公开(公告)号：CN116426497A
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202310271233.4
申请日：2023-03-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种L‑精氨酸‑甘氨酸脒基转移酶及其在生产胍基乙酸中的应用。本发明采用了多位点氨基酸组合型突变方式，实现了突变体AkAGATT225Q/A258P/L278K酶活性显著高于野生型菌株的技术效果，为工业上大规模生产胍基乙酸提供了应用价值。将本发明构建的L‑精氨酸‑甘氨酸脒基转移酶突变体用于生产胍基乙酸，通过优化转化条件，在1L转化体系中，反应24h胍基乙酸产量达21.4g/L，转化率为90.4％，较原始酶生产胍基乙酸的产量提高了49.6％。
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公开(公告)号：CN116218796A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310094369.2
申请日：2023-02-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种GMAS突变体及其在合成茶氨酸中的应用，属于生物技术领域。本发明通过易错PCR对Methylovorus mays来源的γ‑谷氨基甲酰胺合成酶进行随机突变，筛选得到酶活提高的突变酶GMASY198S，比酶活为24.4±1.6U/mg，比酶活比原始酶提高35.8％。本发明还通过偶联多聚磷酸盐激酶PPK，提高ATP的供给能力。进一步通过优化PPK酶的底物浓度，在仅添加5mM ATP的情况下，2.5U/mL PPK和10U/mL GMASY198S偶联催化100mM谷氨酸产生94.6±3.5mM L‑茶氨酸，转化率可达94.6％，提高了L‑茶氨酸的转化率，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN116083394A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202310223117.5
申请日：2023-03-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种多聚磷酸盐激酶及其偶联谷胱甘肽双功能酶生产谷胱甘肽的方法。本发明通过分子对接和定点突变，理性设计来扩大多聚磷酸盐激酶的双底物polyP6和ADP通道腔，并提高多聚磷酸盐激酶的比酶活，将筛选获得的聚磷酸盐激酶突变体用于生产谷胱甘肽，通过发酵菌体生产并积累GshAB和多聚磷酸盐激酶，收集菌体后破细胞得到裂解液，该裂解液具有内源性的ATP可启动再生系统的优点，避免谷胱甘肽胞内生产过程中细胞屏障和复杂的通路修饰等问题，快速在体外重构谷胱甘肽的生产通路。偶联ATP再生体系后，可以减少ATP的使用，对生产体系优化后可以实现高效生产谷胱甘肽。
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公开(公告)号：CN114480357B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210086071.2
申请日：2022-01-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶突变体及其在γ‑氨基丁酸生产中的应用，属于生物工程技术领域。本发明所述谷氨酸脱羧酶突变体酶活提高19.8％，同时在60℃孵育24h仍能保持90％的催化活性。以重组谷氨酸棒杆菌的谷氨酸脱羧酶突变体进行转化时，在5L罐中12h分批补料800g底物最终产量高达547.51g/L，比序列如SEQ ID NO.3所述的谷氨酸脱羧酶提高约67.13％，最终底物摩尔转化率达到97.67％。本发明有效提高谷氨酸脱羧酶的酶活以及热稳定性，为工业上高产γ‑氨基丁酸奠定了基础。
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公开(公告)号：CN115851673A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211130008.0
申请日：2022-09-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种β‑淀粉酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明提供的β‑淀粉酶突变体是对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β‑淀粉酶的第252位和/或第503位的氨基酸进行定点突变获得的。本发明在天然β‑淀粉酶的基础上，通过理性设计，结合定点突变生物技术改造β‑淀粉酶分子结构，分析了突变后残基对酶热稳定性的影响，并最终获得了稳定性提高的突变体G252T、F503S及组合突变体G252T/F503S，本发明的β‑淀粉酶突变体在热稳定显著提高的同时酶的活性不受影响，本发明的β‑淀粉酶突变体比野生型更适合于催化淀粉生成麦芽糖的应用，更利于生产工艺的灵活性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113234620B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202110388080.2
申请日：2021-04-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株基于ARTP筛选获得的谷氨酰胺转氨酶高产突变株，属于微生物诱变育种领域。本发明所述茂源链霉菌Streptomyces sp.MTG‑7是以茂源链霉菌Streptomyces mobaraensis DB13为出发菌株，经常温常压等离子诱变筛选获得的。本发明所述茂源链霉菌MTG‑7在摇瓶水平上发酵84h，谷氨酰胺转氨酶酶活可达25U/mL，5L发酵罐发酵42h，谷氨酰胺转氨酶酶活高达80U/mL，最适温度和pH分别为50℃和7.0，且在pH 6.0‑8.0范围内仍保留90％以上的酶活，具有较好的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN108893438B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN201810661242.3
申请日：2018-06-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高钝齿棒杆菌合成L‑鸟氨酸产量的方法，属于生物工程技术领域。本发明利用表达质粒pDXW10质粒，将来源于S.marcescens Y213的编码N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰酶的基因argE进行克隆表达并测定酶学性质。所得N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰酶的比酶活最高为798.89U/mg，最适pH为7.0，pH稳定性为7.0‑9.0，最适温度为37℃，温度稳定性为20‑30℃，添加0.1mM Mn2+，Li+，Mg2+金属离子使比酶活提高50％以上。为国内外首次报道来源于粘质沙雷氏菌的N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰酶酶活最高。5‑L发酵罐发酵重组菌株SYPO/pDXW10‑SmargE 96h，L‑鸟氨酸的产量达到38.5g/L，比出发菌株，L‑鸟氨酸的产量提高了33.2％，产率达0.401g/L/h。实现了异源表达N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰酶实现L‑鸟氨酸的高效合成。
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公开(公告)号：CN114891711A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210614718.4
申请日：2022-05-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过强化电子传递提高重组大肠杆菌催化合成胆绿素的方法，属于生物工程技术领域。本发明以重组大肠杆菌E.coli BL21/pETDuet‑EcgdhA‑Ctho为出发菌株，通过进一步强化电子传递链系统相关基因黄素氧还蛋白yqcA和铁氧还蛋白fpr基因的表达以及通过E.coli来源的膜锚蛋白Blc将Clostridium tetani来源的HO锚定在细胞膜表面，成功构建重组菌株E.coli BL21/pETDuet‑EcgdhA/T7yqcA‑blc/Ctho/gfp/T7fpr。该重组菌相比较重组菌E.coli BL21/pETDuet‑EcgdhA‑Ctho可进一步缩短转化时间，并将转化率进一步提升至77.6％，为胆绿素的放大生产奠定了一定基础。
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公开(公告)号：CN112080479B
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202010945382.0
申请日：2020-09-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了比酶活高的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体V107A、T155N、H164Y和V107A/T155N/H164Y，17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体V107A、T155N、H164Y和V107A/T155N/H164Y的比酶活分别高达1.85、1.93、2.06和5.15U/mg，分别是野生型17β‑羟基类固醇脱氢酶(1.66U/mg)的1.11、1.16、1.24和3.10倍。
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公开(公告)号：CN114634885A
公开(公告)日：2022-06-17
申请号：CN202210088190.1
申请日：2022-01-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12N15/01 , C12N13/00 , C12P13/00 , A61K35/747 , A61P25/20 , A23L33/135 , C12R1/25
Abstract: 本发明涉及一株高产γ‑氨基丁酸的植物乳杆菌，命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HG‑06，于2022年01月21日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CCTCC M 2022109。本发明得到的植物乳杆菌γ‑氨基丁酸产量更高，5L发酵罐转化实验的最终产量为204.37g/L，底物摩尔转化率为97.22％，比出发菌株产量提高了56.83％，为产业化的提高提供了坚实的理论基础和数据参考。
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