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公开(公告)号：CN105567749A
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201610135144.7
申请日：2016-03-10
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
CPC classification number: C12P7/48
Abstract: 本发明公开一种淀粉质原料的处理方法，以柠檬酸废水为原料，包括原料粉碎、调浆、一次加酶一次喷射、闪蒸、固液分离步骤，所述酶选自耐酸型α—高温淀粉酶，该方法能适应低pH液化条件，既可大大简化操作，降低能耗和生产成本，又能保证理想的蛋白絮凝和提纯效果，减少对后续发酵和提纯造成的负面影响；将本发明方法应用柠檬酸制备工业，种子生长速率显著加快，种子培养周期缩短，发酵指标进一步提高，发酵周期缩短，转化率提高，具有重要工业应用价值。
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公开(公告)号：CN104109697A
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201410321671.8
申请日：2014-07-08
Applicant: 江南大学 , 宜兴协联生物化学有限公司
Abstract: 柠檬酸废水回流发酵生产柠檬酸的方法：（1）淀粉质原料与柠檬酸废水混合均匀，加入高温α-淀粉酶；（2）将混合液经两次喷射，经碘试合格得到液化混液；再将液化混液经过板框压滤得到液化清液；（3）将液化清液与液化混液混合，加入柠檬酸废水进行补水得到种子培养基，进行菌种的种子培养；（4）将液化清液与液化混液混合，加入柠檬酸废水进行补水得到发酵营养液，进行发酵培养；（5）发酵结束后经固液分离除去菌体，经氢钙法或色谱法提取得到柠檬酸，产生的废水回到步骤（1）和步骤（3）、（4），如此循环。本方法发酵稳定且与原工艺技术水平相当，节约了工艺用水和蒸汽用量，节省了污水处理成本，具有重要的环境效益、经济效益。
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公开(公告)号：CN103352007A
公开(公告)日：2013-10-16
申请号：CN201310225029.5
申请日：2013-06-05
Applicant: 江南大学 , 宜兴协联生物化学有限公司
Abstract: 本发明公开了一种分两阶段溶氧控制技术提高发酵生产柠檬酸产量的方法，属于发酵过程优化领域。在发酵的第一阶段（28-32h）控制溶氧在45-55%，在发酵的第二阶段（37-50h）控制溶氧在35-45%，用此两阶段溶氧控制工艺，柠檬酸产量得到显著提高，其糖酸转化率最高为99%，而对照实施例的糖酸转化率为86%。本发明所提供的两阶段溶氧控制发酵工艺简单、高效，有着重要的工业应用价值，同时对其它有机酸的发酵法生产就有一定的指导和启迪意义。
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公开(公告)号：CN101942487A
公开(公告)日：2011-01-12
申请号：CN201010513719.7
申请日：2010-10-21
Applicant: 江南大学 , 宜兴协联生物化学有限公司
Abstract: 一种添加糖化酶发酵制备柠檬酸的方法，属于发酵工程技术领域。传统柠檬酸发酵采用以水和淀粉原料混合调浆后加淀粉酶使原料液化、加温灭菌、发酵的方法，发酵过程中利用生产菌株黑曲霉自身分泌的糖化酶进行边糖化边发酵。该法的缺点是黑曲霉生长到分泌糖化酶需要一个时间过程，而随着产酸增加，酸度持续升高，黑曲霉自身糖化酶又会逐步受到抑制，在发酵后期无法起到正常的糖化作用，导致最终柠檬酸发酵醪液中残糖偏高。本发明采用淀粉原料加淀粉酶液化、加温灭菌后，加入适量糖化酶，再按现有工艺经发酵、过滤、脱色、离子交换、分离、结晶等工序制备柠檬酸。本发明优点：降低了原料消耗，原料转化率提高，产酸率提高，缩短发酵时间，降低废水CODCr排放。
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公开(公告)号：CN113604365B
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202111026526.3
申请日：2021-09-02
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 本发明公开了一种超声波控制菌丝球粒径的方法及其应用。本发明所述方法包括如下步骤：(1)种子培养基的制备；(2)将步骤(1)制备的种子培养基灭菌、冷却后，接入曲霉孢子，培养得到含曲霉菌丝球的种子液；(3)对步骤(2)含曲霉菌丝球的种子液进行超声处理，得到含不同粒径的菌丝球的种子液；将含不同粒径菌丝球的种子液加入发酵培养基中搅拌发酵得到柠檬酸发酵液。本发明方法有利于柠檬酸发酵实现高浓度、高转化率和高效率的统一，对柠檬酸产业技术提升具有重要促进作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109055444B
公开(公告)日：2020-06-05
申请号：CN201810986196.4
申请日：2018-08-28
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公布了一种黑曲霉种子连续培养的方法，所述方法包括如下步骤：(1)启动阶段，将黑曲霉孢子接种至种子培养基，得到种子液；(2)种子连续培养阶段，对步骤(1)得到的种子液进行连续分散处理，分散得到的种子液进行连续培养，并同时补充新鲜种子补料培养基；(3)停止阶段，停止补充新鲜种子补料培养基和分散处理，继续培养得到种子液，移入发酵培养基进行发酵培养。本发明方法突破性解决了多细胞丝状菌生长缓慢，以及菌丝球在连续培养中容易流失的问题，完全实现了种子连续培养，使菌体恒定在最适的生长环境中，避免了菌种退化，使种子液处于连续稳定的高活力状态，对应发酵产柠檬酸的性能提高。
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公开(公告)号：CN105669428B
公开(公告)日：2018-06-01
申请号：CN201610126650.X
申请日：2016-03-07
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
IPC: C07C51/41 , C07C59/265
Abstract: 本发明公开了一种柠檬酸氢钙的生产方法，主要通过将部分柠檬酸溶液与三钙初步混合，另外部分柠檬酸溶液分段分时间加入的方法，使得柠檬酸氢钙反应的酸度维持在一个合适的水平，可以充分降低柠檬酸氢钙反应的过饱和度，从而能得到颗粒大且均匀的氢钙晶体，而且杂质不容易包埋。本发明产生的柠檬酸氢钙经过带滤机处理后水分和RCS都比较低，有效地缓解了酸解工段的处理压力，进而提高酸解液的纯度。
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公开(公告)号：CN104087624B
公开(公告)日：2017-08-08
申请号：CN201410329786.1
申请日：2014-07-11
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 一种黑曲霉连续发酵生产柠檬酸的方法，包括以下步骤：（1）黑曲霉经过逐级扩大培养，获得成熟的孢子；（2）孢子液接种至种子培养基，培养成为成熟的种子液；（3）成熟的种子液转接至发酵培养基F1；（4）发酵培养后，分割发酵液为两部分；其中一部分发酵液继续发酵完毕，获得柠檬酸；（5）分割出的另一部分发酵液经分散器分散处理，获得分散菌丝的发酵液；（6）将分散菌丝发酵液接入发酵培养基F2；发酵培养后，回到步骤（4），如此重复实现连续发酵。本发明显著降低生产成本与运行成本，显著缩短生产周期，提高生产效率；同时提高设备利用率，降低劳动强度，过程简便易操作，可以广泛应用于柠檬酸的生产。
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公开(公告)号：CN104789635B
公开(公告)日：2017-05-03
申请号：CN201510224891.3
申请日：2015-05-05
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法：(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，用磷酸缓冲液清洗，过滤，获得黑曲霉麸曲孢子悬液；(2)添加0.05％(v/v)的吐温80，超声波处理，获得分散均匀的单孢子悬液，调节孢子悬液浓度为106～107个/mL；(3)用磷酸缓冲液配置8～14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液；(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为1:1的比例于比色皿中混合均匀密封，反应420s，于663nm波长处扫描吸光度‑时间曲线；(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度，以吸光度的变化表征细胞活力大小。本发明可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率；其它微生物孢子活力评价，均适用本技术。
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公开(公告)号：CN104789635A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510224891.3
申请日：2015-05-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法：(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，用磷酸缓冲液清洗，过滤，获得黑曲霉麸曲孢子悬液；(2)添加0.05％(v/v)的吐温80，超声波处理，获得分散均匀的单孢子悬液，调节孢子悬液浓度为106～107个/mL；(3)用磷酸缓冲液配置8～14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液；(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为1:1的比例于比色皿中混合均匀密封，反应420s，于663nm波长处扫描吸光度-时间曲线；(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度，以吸光度的变化表征细胞活力大小。本发明可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率；其它微生物孢子活力评价，均适用本技术。
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