公开(公告)号：CN112552396A

公开(公告)日：2021-03-26

申请号：CN202011607066.9

申请日：2020-12-30

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 陈玉梅 ,  王爱萍 ,  蒋敏 ,  赵建国 ,  冯景 ,  石海宁 ,  赵孟孟

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/13 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

摘要： 本发明涉及抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体、制备方法及应用。本发明设计并合成能够模拟保守性p54蛋白NTD的多肽，并将其与BSA偶联作为免疫原，通过免疫学方法免疫BALB/c小鼠制备获得抗ASFVp54蛋白单克隆抗体，该抗体能够特异性的识别并结合p54蛋白的N端区域，该识别区域(aa 1‑29)区别于现有商品化单抗。本发明提供了上述抗体的重链可变区及轻链可变区基因序列，在此基础上，可以采用常规基因工程或蛋白质工程方法获得本发明的单克隆抗体。该单克隆抗体特异性强，灵敏度高，能与ASFV HLJ/18株病毒发生特异性反应，而与CSFV、PCV2、PRRSV、PEDV及PRV等猪源病毒不发生反应，为进行ASFV病原学和致病机理的研究及ASFV病原的临床检测研究奠定了基础。

公开(公告)号：CN106148358A

公开(公告)日：2016-11-23

申请号：CN201610557798.9

申请日：2016-07-15

申请人： 河南省农业科学院 ,  河南中泽生物工程有限公司

发明人： 张改平 ,  刘运超 ,  王爱萍 ,  陈玉梅 ,  邢广旭 ,  姬鹏超 ,  刘文英 ,  王娟 ,  冯景 ,  刘东民 ,  邓瑞广

IPC分类号： C12N15/35 ,  C07K14/015 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N7/04 ,  A61K39/23 ,  A61P31/20 ,  C12R1/19

CPC分类号： C07K14/005 ,  A61K39/12 ,  A61K2039/5258 ,  C12N7/00 ,  C12N15/70 ,  C12N2750/14322 ,  C12N2750/14323 ,  C12N2750/14334 ,  C12N2800/101 ,  C12N2800/22

摘要： 本发明公开了一种猪细小病毒VP2蛋白的编码基因、原核表达VP2蛋白病毒样颗粒的方法及其在疫苗制备中的应用。对序列进行优化，人工合成VP2基因，将合成的基因插入pET28a载体，然后和伴侣蛋白质粒共转入BL21(DE3)宿主菌中，使VP2蛋白和伴侣蛋白共表达，以促进VP2蛋白的正确折叠。实验证明，通过该重组菌表达的VP2蛋白能在体外实现自组装，且具有良好的免疫原性。使用由本发明表达的VP2蛋白制备的病毒样颗粒亚单位疫苗免疫小鼠和豚鼠能够诱导高水平的血凝抑制抗体和中和抗体产生，而且此疫苗能够预防豚鼠免受猪细小病毒强毒的感染。采用本发明的重组菌能够高效制备猪细小病毒病毒样颗粒，生产成本低、操作简单、具有更好的生物安全性。

公开(公告)号：CN112409494B

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN202011133005.3

申请日：2020-10-21

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 王爱萍 ,  张改平 ,  丁培阳 ,  陈玉梅 ,  刘红亮 ,  刘东民 ,  梁超 ,  冯景

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  A61K39/145 ,  A61P31/16 ,  B82Y5/00 ,  B82Y40/00 ,  C12R1/19

摘要： 本发明提供了一种通用型流感病毒抗原蛋白。本发明将PCV2的Cap蛋白与来源于人、猪和禽的M2e表位蛋白融合表达。所述PCV2的Cap蛋白与来源于人、猪和禽的M2e表位蛋白融合表达，为来源于人、猪和禽的M2e表位按照不同的次序与Cap蛋白的羧基端融合串联表达并自组装形成Cap‑3M2e的抗原蛋白。本发明确定了基于M2e表位的通用型流感疫苗的最佳排列次序，并研制最适用于猪的基于M2e表位的通用型流感疫苗；该疫苗能够诱导高水平的PCV2特异性中和抗体，具有成为二价疫苗的潜力；经过优化的基因更适合在大肠杆菌宿主中高效率表达目标蛋白，而且能够满足工业化生产的要求，产量高，成本低。

公开(公告)号：CN112707948A

公开(公告)日：2021-04-27

申请号：CN202011565011.6

申请日：2020-12-25

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 张改平 ,  王爱萍 ,  王方雨 ,  刘东民 ,  赵建国 ,  陈玉梅 ,  刘红亮 ,  丁培杨 ,  冯景

IPC分类号： C07K7/06 ,  G01N33/569

摘要： 本发明主要涉及猪瘟病毒E0蛋白亲和多肽及应用，该多肽利用计算机辅助由虚拟分子对接技术设计而成，序列为WRHDFQ(P3)。本发明以牛病毒性腹泻病毒E0蛋白同源建模获得的猪瘟病毒E0蛋白晶体结构为模板，利用分子对接技术获得多肽序列P3；合成多肽后，采用等离子共振试验和酶联免疫吸附测定试验，鉴定该序列与猪瘟E0蛋白相互作用的亲和力和特异性，结果表明P3序列与猪瘟E0蛋白具有较高的亲和力和特异性；本发明可通过对多肽进行标记，从而对猪瘟抗原进行快速定性和定量检测，并可通过多肽对蛋白的结合能力，利用多肽对猪瘟E0蛋白进行富集，为蛋白纯化提供新思路。

公开(公告)号：CN110408633A

公开(公告)日：2019-11-05

申请号：CN201910618587.5

申请日：2019-07-10

申请人： 郑州大学 ,  河南中泽生物工程有限公司

发明人： 陈玉梅 ,  王爱萍 ,  刘运超 ,  刘燕凯 ,  冯景

IPC分类号： C12N15/46 ,  C12N15/70 ,  C07K14/14 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/22

摘要： 本申请属于动物疫苗制备技术领域，具体涉及一种利用基因工程技术制备BTV1（蓝舌病1型病毒）VP2蛋白的制备方法专利申请事宜。蓝舌病1型病毒VP2蛋白基因编码序列VP2U由2886bp碱基组成，具体碱基序列如SEQ ID NO.1所示。具体原核表达制备BTV1 VP2蛋白时，包括：PCR扩增，酶切、与质粒pET28连接构建重组质粒pET28-VP2U，转化，诱导表达等步骤。本申请通过对相关编码基因的优化，进一步借助于原核表达系统的技术优势，为发酵制备BTV1 VP2蛋白奠定了一定技术基础。初步实验结果表明，发酵液上清中的目的蛋白表达量可达到58.4μg/ml，可为工业化生产奠定良好技术基础。