抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN112552396B

    公开(公告)日:2022-07-12

    申请号:CN202011607066.9

    申请日:2020-12-30

    摘要: 本发明涉及抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体、制备方法及应用。本发明设计并合成能够模拟保守性p54蛋白NTD的多肽,并将其与BSA偶联作为免疫原,通过免疫学方法免疫BALB/c小鼠制备获得抗ASFVp54蛋白单克隆抗体,该抗体能够特异性的识别并结合p54蛋白的N端区域,该识别区域(aa 1‑29)区别于现有商品化单抗。本发明提供了上述抗体的重链可变区及轻链可变区基因序列,在此基础上,可以采用常规基因工程或蛋白质工程方法获得本发明的单克隆抗体。该单克隆抗体特异性强,灵敏度高,能与ASFV HLJ/18株病毒发生特异性反应,而与CSFV、PCV2、PRRSV、PEDV及PRV等猪源病毒不发生反应,为进行ASFV病原学和致病机理的研究及ASFV病原的临床检测研究奠定了基础。

    一条结合猪瘟病毒E0蛋白的多肽序列及应用

    公开(公告)号:CN112707948A

    公开(公告)日:2021-04-27

    申请号:CN202011565011.6

    申请日:2020-12-25

    IPC分类号: C07K7/06 G01N33/569

    摘要: 本发明主要涉及猪瘟病毒E0蛋白亲和多肽及应用,该多肽利用计算机辅助由虚拟分子对接技术设计而成,序列为WRHDFQ(P3)。本发明以牛病毒性腹泻病毒E0蛋白同源建模获得的猪瘟病毒E0蛋白晶体结构为模板,利用分子对接技术获得多肽序列P3;合成多肽后,采用等离子共振试验和酶联免疫吸附测定试验,鉴定该序列与猪瘟E0蛋白相互作用的亲和力和特异性,结果表明P3序列与猪瘟E0蛋白具有较高的亲和力和特异性;本发明可通过对多肽进行标记,从而对猪瘟抗原进行快速定性和定量检测,并可通过多肽对蛋白的结合能力,利用多肽对猪瘟E0蛋白进行富集,为蛋白纯化提供新思路。

    抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN112552396A

    公开(公告)日:2021-03-26

    申请号:CN202011607066.9

    申请日:2020-12-30

    摘要: 本发明涉及抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体、制备方法及应用。本发明设计并合成能够模拟保守性p54蛋白NTD的多肽,并将其与BSA偶联作为免疫原,通过免疫学方法免疫BALB/c小鼠制备获得抗ASFVp54蛋白单克隆抗体,该抗体能够特异性的识别并结合p54蛋白的N端区域,该识别区域(aa 1‑29)区别于现有商品化单抗。本发明提供了上述抗体的重链可变区及轻链可变区基因序列,在此基础上,可以采用常规基因工程或蛋白质工程方法获得本发明的单克隆抗体。该单克隆抗体特异性强,灵敏度高,能与ASFV HLJ/18株病毒发生特异性反应,而与CSFV、PCV2、PRRSV、PEDV及PRV等猪源病毒不发生反应,为进行ASFV病原学和致病机理的研究及ASFV病原的临床检测研究奠定了基础。

    检测非洲猪瘟病毒的分子探针、试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN109781981A

    公开(公告)日:2019-05-21

    申请号:CN201910088473.4

    申请日:2019-01-30

    摘要: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒的分子探针、试剂盒及其应用,旨在解决现有检测技术可靠性和实用性差的技术问题。本发明检测非洲猪瘟病毒的分子探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明配制了一种检测非洲猪瘟病毒的RT-PCR反应液,制备了一种检测非洲猪瘟病毒RT-PCR反应液冻干粉、一种非洲猪瘟病毒检测试剂盒,并提供了非洲猪瘟病毒的定性和定量检测方法。本发明设计的分子探针及建立RT-PCR检测方法具有敏度性高、重复性好、特异性强的特点,提高PCR技术检测ASFV的可靠性和易用性,实现无污染、高通量的检测,可用于检测易感动物及相关动物制品中ASFV核酸。