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公开(公告)号:CN112552396B
公开(公告)日:2022-07-12
申请号:CN202011607066.9
申请日:2020-12-30
申请人: 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
摘要: 本发明涉及抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体、制备方法及应用。本发明设计并合成能够模拟保守性p54蛋白NTD的多肽,并将其与BSA偶联作为免疫原,通过免疫学方法免疫BALB/c小鼠制备获得抗ASFVp54蛋白单克隆抗体,该抗体能够特异性的识别并结合p54蛋白的N端区域,该识别区域(aa 1‑29)区别于现有商品化单抗。本发明提供了上述抗体的重链可变区及轻链可变区基因序列,在此基础上,可以采用常规基因工程或蛋白质工程方法获得本发明的单克隆抗体。该单克隆抗体特异性强,灵敏度高,能与ASFV HLJ/18株病毒发生特异性反应,而与CSFV、PCV2、PRRSV、PEDV及PRV等猪源病毒不发生反应,为进行ASFV病原学和致病机理的研究及ASFV病原的临床检测研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN112625091A
公开(公告)日:2021-04-09
申请号:CN202011565041.7
申请日:2020-12-25
申请人: 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号: C07K7/06 , G01N33/569 , G01N33/68
摘要: 本发明主要涉及猪瘟病毒Erns蛋白亲和多肽及应用,该多肽由计算机模拟的虚拟分子对接技术设计而成,序列为WRHYIH。本发明以同源建模获得的猪瘟Erns蛋白晶体结构为模板,根据虚拟分子筛选技术,获得多肽序列P1。人工合成多肽后,采用酶联免疫吸附测定试验和等离子共振试验鉴定该序列与猪瘟Erns蛋白相互作用的亲和性,结果表明P1序列与猪瘟Erns蛋白具有较高的特异性和亲和力;本发明为以亲和肽作为亲和配基的亲和层析提供了可靠理论基础,可通过对多肽标记,从而对猪瘟Erns蛋白进行快速检测。
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公开(公告)号:CN110423761A
公开(公告)日:2019-11-08
申请号:CN201910608585.8
申请日:2019-07-08
申请人: 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司 , 河南百奥生物工程有限公司
IPC分类号: C12N15/34 , C12N15/11 , C12N15/866 , C07K14/01 , G01N33/558 , G01N33/569 , G01N33/68
摘要: 本发明属于免疫蛋白制备及其应用技术领域,具体涉及一种非洲猪瘟病毒抗体检测试纸。本发明提出了编码非洲猪瘟病毒p54蛋白胞外区的基因序列E183L-1,基于一个总的发明构思,本发明还提出了扩增该基因序列的引物对和该基因序列编码的合成蛋白;为了解决非洲猪瘟病毒检测中存在的问题,本发明利用上述基因编码的合成蛋白制备了一种检测非洲猪瘟病毒抗体的试纸,能够快速、准确的检测非洲猪瘟病毒抗体,非常适用于基层和现场快速检测与诊断。
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公开(公告)号:CN110423761B
公开(公告)日:2022-07-05
申请号:CN201910608585.8
申请日:2019-07-08
申请人: 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司 , 河南百奥生物工程有限公司
IPC分类号: C12N15/34 , C12N15/11 , C12N15/866 , C07K14/01 , G01N33/558 , G01N33/569 , G01N33/68
摘要: 本发明属于免疫蛋白制备及其应用技术领域,具体涉及一种非洲猪瘟病毒抗体检测试纸。本发明提出了编码非洲猪瘟病毒p54蛋白胞外区的基因序列E183L‑1,基于一个总的发明构思,本发明还提出了扩增该基因序列的引物对和该基因序列编码的合成蛋白;为了解决非洲猪瘟病毒检测中存在的问题,本发明利用上述基因编码的合成蛋白制备了一种检测非洲猪瘟病毒抗体的试纸,能够快速、准确的检测非洲猪瘟病毒抗体,非常适用于基层和现场快速检测与诊断。
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公开(公告)号:CN108823218A
公开(公告)日:2018-11-16
申请号:CN201810797851.1
申请日:2018-07-19
申请人: 河南省农业科学院 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因、其表达产物、其亚单位疫苗及应用。本发明提供了一种鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的核酸序列、克隆该核酸序列的引物、含该核酸序列的表达载体、由表达载体转化而得的工程菌、由核酸序列编码、表达载体表达或所工程菌分离的鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白,及鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白自组装而成的鸡传染性法氏囊病毒病毒样颗粒。还提供了由鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白制得的亚单位疫苗,由鸡传染性法氏囊病毒病毒样颗粒制得的亚单位疫苗。将亚单位疫苗在预防鸡传染性法氏囊病病毒引起的鸡相关疾病中应用。本发明生产成本低、操作简单、生物安全性好,疫苗可有效预防鸡传染性法氏囊病毒对鸡群的感染。
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公开(公告)号:CN112707948A
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN202011565011.6
申请日:2020-12-25
申请人: 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号: C07K7/06 , G01N33/569
摘要: 本发明主要涉及猪瘟病毒E0蛋白亲和多肽及应用,该多肽利用计算机辅助由虚拟分子对接技术设计而成,序列为WRHDFQ(P3)。本发明以牛病毒性腹泻病毒E0蛋白同源建模获得的猪瘟病毒E0蛋白晶体结构为模板,利用分子对接技术获得多肽序列P3;合成多肽后,采用等离子共振试验和酶联免疫吸附测定试验,鉴定该序列与猪瘟E0蛋白相互作用的亲和力和特异性,结果表明P3序列与猪瘟E0蛋白具有较高的亲和力和特异性;本发明可通过对多肽进行标记,从而对猪瘟抗原进行快速定性和定量检测,并可通过多肽对蛋白的结合能力,利用多肽对猪瘟E0蛋白进行富集,为蛋白纯化提供新思路。
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公开(公告)号:CN109781981B
公开(公告)日:2022-04-01
申请号:CN201910088473.4
申请日:2019-01-30
申请人: 河南中泽生物工程有限公司 , 郑州大学
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N21/64
摘要: 本发明公开了一种用于检测非洲猪瘟病毒的分子探针及Realtime‑PCR检测方法,旨在解决现有检测技术可靠性和实用性差的技术问题。本发明检测非洲猪瘟病毒的分子探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明配制了一种检测非洲猪瘟病毒的RT‑PCR反应液,制备了一种检测非洲猪瘟病毒RT‑PCR反应液冻干粉、一种非洲猪瘟病毒检测试剂盒,并提供了非洲猪瘟病毒的定性和定量检测方法。本发明设计的分子探针及建立RT‑PCR检测方法具有敏度性高、重复性好、特异性强的特点,提高PCR技术检测ASFV的可靠性和易用性,实现无污染、高通量的检测,可用于检测易感动物及相关动物制品中ASFV核酸。
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公开(公告)号:CN112552396A
公开(公告)日:2021-03-26
申请号:CN202011607066.9
申请日:2020-12-30
申请人: 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
摘要: 本发明涉及抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体、制备方法及应用。本发明设计并合成能够模拟保守性p54蛋白NTD的多肽,并将其与BSA偶联作为免疫原,通过免疫学方法免疫BALB/c小鼠制备获得抗ASFVp54蛋白单克隆抗体,该抗体能够特异性的识别并结合p54蛋白的N端区域,该识别区域(aa 1‑29)区别于现有商品化单抗。本发明提供了上述抗体的重链可变区及轻链可变区基因序列,在此基础上,可以采用常规基因工程或蛋白质工程方法获得本发明的单克隆抗体。该单克隆抗体特异性强,灵敏度高,能与ASFV HLJ/18株病毒发生特异性反应,而与CSFV、PCV2、PRRSV、PEDV及PRV等猪源病毒不发生反应,为进行ASFV病原学和致病机理的研究及ASFV病原的临床检测研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN109781981A
公开(公告)日:2019-05-21
申请号:CN201910088473.4
申请日:2019-01-30
申请人: 河南中泽生物工程有限公司 , 郑州大学
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N21/64
摘要: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒的分子探针、试剂盒及其应用,旨在解决现有检测技术可靠性和实用性差的技术问题。本发明检测非洲猪瘟病毒的分子探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明配制了一种检测非洲猪瘟病毒的RT-PCR反应液,制备了一种检测非洲猪瘟病毒RT-PCR反应液冻干粉、一种非洲猪瘟病毒检测试剂盒,并提供了非洲猪瘟病毒的定性和定量检测方法。本发明设计的分子探针及建立RT-PCR检测方法具有敏度性高、重复性好、特异性强的特点,提高PCR技术检测ASFV的可靠性和易用性,实现无污染、高通量的检测,可用于检测易感动物及相关动物制品中ASFV核酸。
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公开(公告)号:CN109187967B
公开(公告)日:2021-10-01
申请号:CN201811091582.3
申请日:2018-09-19
申请人: 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/531
摘要: 本发明涉及一种检测并区分O型、A型口蹄疫病毒的双联快速检测卡及其制备方法。该检测卡利用双抗夹心ELISA检测抗原的原理,分别将可以特异性识别O型口蹄疫病毒的单克隆抗体mAbI和能特异性识别A型口蹄疫病毒的单克隆抗体mAbII喷到检测膜(硝酸纤维膜)的T1、T2检测线位置制备检测印记;将羊抗或兔抗小鼠IgG或SPA喷到检测膜的质控区C线位置制备质控印记。金标抗体纤维层分为上下两层,分别吸附的是胶体金标记的能特异性识别O型口蹄疫病毒的单克隆抗体mAbIII和能特异性识别A型口蹄疫病毒的单克隆抗体mAbIV。该试纸条可用于快速检测O型、A型口蹄疫病毒(FMDV)感染。应用本发明,操作简单快速,结果清晰易辩,适合基层推广。
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