一种从抗虫棉种子中纯化Bt毒蛋白的方法

    公开(公告)号:CN103145815B

    公开(公告)日:2014-12-31

    申请号:CN201310070417.0

    申请日:2013-03-06

    Abstract: 本发明公开了一种从抗虫棉种子中纯化Bt毒蛋白的方法。本发明提供的从抗虫棉种子中纯化Bt Cry1Ac蛋白的方法,包括如下步骤:(1)将抗虫棉种子去壳后进行可溶性总蛋白的提取,得到溶液甲;(2)将所述溶液甲进行60%饱和度的硫酸铵沉淀,离心收集沉淀;(3)溶解步骤(2)得到的沉淀并进行透析,得到溶液乙;(4)将所述溶液乙进行免疫亲和层析,收集与抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体特异结合的蛋白组分,即为Bt毒蛋白;所述抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体为是由杂交瘤Bt2F9CGMCC No.5162分泌产生的单克隆抗体。本发明具有以下优点:(1)简化了纯化流程,降低了纯化成本;(2)缩短了纯化时间,减少了目的蛋白损失。

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