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公开(公告)号：CN114480357B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210086071.2
申请日：2022-01-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶突变体及其在γ‑氨基丁酸生产中的应用，属于生物工程技术领域。本发明所述谷氨酸脱羧酶突变体酶活提高19.8％，同时在60℃孵育24h仍能保持90％的催化活性。以重组谷氨酸棒杆菌的谷氨酸脱羧酶突变体进行转化时，在5L罐中12h分批补料800g底物最终产量高达547.51g/L，比序列如SEQ ID NO.3所述的谷氨酸脱羧酶提高约67.13％，最终底物摩尔转化率达到97.67％。本发明有效提高谷氨酸脱羧酶的酶活以及热稳定性，为工业上高产γ‑氨基丁酸奠定了基础。
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公开(公告)号：CN115851673A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211130008.0
申请日：2022-09-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种β‑淀粉酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明提供的β‑淀粉酶突变体是对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β‑淀粉酶的第252位和/或第503位的氨基酸进行定点突变获得的。本发明在天然β‑淀粉酶的基础上，通过理性设计，结合定点突变生物技术改造β‑淀粉酶分子结构，分析了突变后残基对酶热稳定性的影响，并最终获得了稳定性提高的突变体G252T、F503S及组合突变体G252T/F503S，本发明的β‑淀粉酶突变体在热稳定显著提高的同时酶的活性不受影响，本发明的β‑淀粉酶突变体比野生型更适合于催化淀粉生成麦芽糖的应用，更利于生产工艺的灵活性。
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公开(公告)号：CN113234620B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202110388080.2
申请日：2021-04-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株基于ARTP筛选获得的谷氨酰胺转氨酶高产突变株，属于微生物诱变育种领域。本发明所述茂源链霉菌Streptomyces sp.MTG‑7是以茂源链霉菌Streptomyces mobaraensis DB13为出发菌株，经常温常压等离子诱变筛选获得的。本发明所述茂源链霉菌MTG‑7在摇瓶水平上发酵84h，谷氨酰胺转氨酶酶活可达25U/mL，5L发酵罐发酵42h，谷氨酰胺转氨酶酶活高达80U/mL，最适温度和pH分别为50℃和7.0，且在pH 6.0‑8.0范围内仍保留90％以上的酶活，具有较好的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN108893438B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN201810661242.3
申请日：2018-06-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高钝齿棒杆菌合成L‑鸟氨酸产量的方法，属于生物工程技术领域。本发明利用表达质粒pDXW10质粒，将来源于S.marcescens Y213的编码N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰酶的基因argE进行克隆表达并测定酶学性质。所得N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰酶的比酶活最高为798.89U/mg，最适pH为7.0，pH稳定性为7.0‑9.0，最适温度为37℃，温度稳定性为20‑30℃，添加0.1mM Mn2+，Li+，Mg2+金属离子使比酶活提高50％以上。为国内外首次报道来源于粘质沙雷氏菌的N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰酶酶活最高。5‑L发酵罐发酵重组菌株SYPO/pDXW10‑SmargE 96h，L‑鸟氨酸的产量达到38.5g/L，比出发菌株，L‑鸟氨酸的产量提高了33.2％，产率达0.401g/L/h。实现了异源表达N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰酶实现L‑鸟氨酸的高效合成。
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公开(公告)号：CN114891711A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210614718.4
申请日：2022-05-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过强化电子传递提高重组大肠杆菌催化合成胆绿素的方法，属于生物工程技术领域。本发明以重组大肠杆菌E.coli BL21/pETDuet‑EcgdhA‑Ctho为出发菌株，通过进一步强化电子传递链系统相关基因黄素氧还蛋白yqcA和铁氧还蛋白fpr基因的表达以及通过E.coli来源的膜锚蛋白Blc将Clostridium tetani来源的HO锚定在细胞膜表面，成功构建重组菌株E.coli BL21/pETDuet‑EcgdhA/T7yqcA‑blc/Ctho/gfp/T7fpr。该重组菌相比较重组菌E.coli BL21/pETDuet‑EcgdhA‑Ctho可进一步缩短转化时间，并将转化率进一步提升至77.6％，为胆绿素的放大生产奠定了一定基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112080479B
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202010945382.0
申请日：2020-09-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了比酶活高的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体V107A、T155N、H164Y和V107A/T155N/H164Y，17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体V107A、T155N、H164Y和V107A/T155N/H164Y的比酶活分别高达1.85、1.93、2.06和5.15U/mg，分别是野生型17β‑羟基类固醇脱氢酶(1.66U/mg)的1.11、1.16、1.24和3.10倍。
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公开(公告)号：CN114634885A
公开(公告)日：2022-06-17
申请号：CN202210088190.1
申请日：2022-01-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12N15/01 , C12N13/00 , C12P13/00 , A61K35/747 , A61P25/20 , A23L33/135 , C12R1/25
Abstract: 本发明涉及一株高产γ‑氨基丁酸的植物乳杆菌，命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HG‑06，于2022年01月21日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CCTCC M 2022109。本发明得到的植物乳杆菌γ‑氨基丁酸产量更高，5L发酵罐转化实验的最终产量为204.37g/L，底物摩尔转化率为97.22％，比出发菌株产量提高了56.83％，为产业化的提高提供了坚实的理论基础和数据参考。
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公开(公告)号：CN114525268A
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202210086048.3
申请日：2022-01-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种pH耐受性提高的谷氨酸脱羧酶突变体及其在γ‑氨基丁酸合成中的应用，该突变体通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的谷氨酸脱羧酶突变得到。该突变体在pH 6.5时的酶活提高至原始(SEQ ID NO.3所示)的178％，在5L罐中12h分批补料1000g底物最终产量高达688.13g/L，比原始谷氨酸脱羧酶生产性能提高约52％，最终摩尔转化率可达98.2％。本发明不仅拓宽了GAD在最适pH下的酶活，还拓宽其在偏中性pH下的酶活，增强了该酶合成γ‑氨基丁酸的能力，使其更适应于工业生产。
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公开(公告)号：CN111206011B
公开(公告)日：2022-02-15
申请号：CN202010147933.9
申请日：2020-03-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种重组谷氨酸棒杆菌及其在生产L‑谷氨酸中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种可高产L‑谷氨酸的重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum DL01/pDXW‑10‑ppc，将此重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum DL01/pDXW‑10‑ppc接种至5‑L发酵罐中发酵48h，即可使发酵液中L‑谷氨酸的产量高达136.09±5.53g/L、糖酸转化率高达58.9％，分别较野生型谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G01提高了45.5％和13.7％。
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公开(公告)号：CN110607319B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201911040157.6
申请日：2019-10-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于枯草芽孢杆菌分泌表达蛋白的表达载体及应用，属于基因工程和生物技术领域。该分泌载体是将编码信号肽SPphoD的基因(核苷酸序列如SEQ ID NO.1)和编码分子伴侣PrsA的基因(核苷酸序列如SEQ ID NO.3)分别连接到pMA5‑P43上构建分泌质粒pMA5‑SPP。以pMA5‑SPP为载体，在枯草芽孢杆菌中表达L‑天冬酰胺酶，其胞外分泌量占总表达量的38％，胞外分泌量是常见信号肽SPpel介导下分泌量的2.95倍。
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