公开(公告)号：CN112812178B

公开(公告)日：2022-03-25

申请号：CN202110157245.5

申请日：2021-02-04

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 张改平 ,  蒋敏 ,  王爱萍 ,  陈玉梅 ,  刘东民 ,  刘红亮 ,  梁超 ,  刘燕凯 ,  王彦伟 ,  贾蕊

IPC分类号： C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  C12P21/08 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

摘要： 本发明涉及PCV3Cap蛋白抗原表位肽、抗PCV3Cap蛋白的单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明提供了抗PCV3Cap蛋白单克隆抗体，并进一步提供了单克隆抗体的重链可变区序列和轻链可变区的核苷酸和氨基酸序列，在此基础上，可以通过基因工程方式来制备抗体；同时，能够采用基因工程和蛋白质工程的方法，进行一个或多个氨基酸的添加、删除、替换等修饰，获得其活性片段或保守性变异体，为进一步提升抗体的特异性和亲和力奠定基础。该抗体具有较高特异性，与PCV1、PCV2及其他猪源病毒如CSFV、PRRSV、PRV等均无交叉反应，在抗原/抗体检测试剂盒、抗原/抗体免疫层析试纸、IFA、IPMA以及Western Blotting等免疫学检测中具有广泛的研究应用价值和商业使用价值。

公开(公告)号：CN109187968B

公开(公告)日：2022-01-28

申请号：CN201811091645.5

申请日：2018-09-19

申请人： 郑州大学 ,  河南中泽生物工程有限公司

发明人： 张改平 ,  王爱萍 ,  陈玉梅 ,  刘东民 ,  周景明 ,  王彦伟 ,  祁艳华 ,  刘燕凯 ,  刘红亮 ,  秦云飞 ,  李永欣

IPC分类号： G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/531

摘要： 本发明公开了一种猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒的二联金标检测试纸及其制备方法，包括支撑板、样品垫、金标垫、NC膜和吸水垫，NC膜上含有猪瘟病毒检测线T1“│”，猪伪狂犬病毒检测线T2“│”和质控线C“│”印迹。检测时，在检测膜显现三条红色条带“│││”为猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒共感染，出现检测线T1和质控线C两条红色条带“││”为只有猪瘟病毒感染；出现检测线T2和质控线C两条红色条带“││”为只有猪伪狂犬病毒感染；只显现一条红色条带“│”为阴性，两种病毒都未感染。本检测试纸特异性强，敏感性高，反应谱广，可检测现有多数流行毒株，且操作简便、快速，可广泛用于猪瘟病毒感染与猪伪狂犬病毒感染检测，易于在生产实践中推广应用。

公开(公告)号：CN113325050A

公开(公告)日：2021-08-31

申请号：CN202110600343.1

申请日：2021-05-31

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 张改平 ,  王爱萍 ,  陈玉梅 ,  张磊 ,  张晨阳 ,  孙亚宁 ,  丁培阳 ,  朱习芳

IPC分类号： G01N27/26 ,  G01N27/327 ,  G01N33/543 ,  G01N21/31 ,  G01N21/33 ,  G01N23/20 ,  G01N23/20008 ,  G01N23/2202 ,  G01N23/2206 ,  G01N23/2251 ,  G01N1/28 ,  G01N1/38 ,  G01N1/40

摘要： 本发明公开了一种快速高灵敏度检测动物源性食品中SM2的方法，所述的检测方法为：本发明的优点在于：合成纳米复合材料银‑氧化石墨烯(Ag‑GO)；构建电化学免疫传感器；检测样品处理；将免疫传感器置于样品溶液中进行检测。本研究构建的免疫传感器检测SM2具有低的LOD，以及较宽的检测范围。这是由于本研究使用了GO作为固载纳米材料，GO的大比表面积以及良好的生物相容性也有利于传感器的构建。并且AuNPs和AgNPs也有助于电子的传递，在一系列生物大分子依次结合在电极表面上，AgNPs和AuNPs可以突破绝缘层的阻碍，增强电信号，提高传感器的灵敏度。

公开(公告)号：CN112730562A

公开(公告)日：2021-04-30

申请号：CN202011522826.6

申请日：2020-12-22

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 王爱萍 ,  张改平 ,  有小娟 ,  周景明 ,  陈玉梅 ,  刘红亮 ,  丁培阳 ,  祁艳华 ,  李永欣 ,  张静 ,  马红芳

IPC分类号： G01N27/327 ,  G01N27/48 ,  G01N33/577

摘要： 本发明提供了一种检测泰妙菌素抗原的电化学免疫传感器及制备方法。本发明将AgNPs原位还原至GO上获得Ag‑GO纳米复合材料表现出良好的导电性和氧化还原活性。全氟磺酸具有优良的成膜能力和高的化学稳定性，作为分散剂获得Ag‑GO‑Nf复合溶液，并用该复合溶液在基础电极表面进行修饰。随后，将金纳米粒子电沉积在Ag‑GO‑Nf表面，起到固定抗体和放大电化学信号的作用。本发明应用上述方法构建的电化学免疫传感器简便、高效、灵敏，不仅检测泰妙菌素抗原具有较宽的检测范围和较低的检测限，而且应用于检测动物源性食品如鸡蛋、猪肉和猪肝等样品中的泰妙菌素残留具有较好的准确性。

公开(公告)号：CN112707948A

公开(公告)日：2021-04-27

申请号：CN202011565011.6

申请日：2020-12-25

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 张改平 ,  王爱萍 ,  王方雨 ,  刘东民 ,  赵建国 ,  陈玉梅 ,  刘红亮 ,  丁培杨 ,  冯景

IPC分类号： C07K7/06 ,  G01N33/569

摘要： 本发明主要涉及猪瘟病毒E0蛋白亲和多肽及应用，该多肽利用计算机辅助由虚拟分子对接技术设计而成，序列为WRHDFQ(P3)。本发明以牛病毒性腹泻病毒E0蛋白同源建模获得的猪瘟病毒E0蛋白晶体结构为模板，利用分子对接技术获得多肽序列P3；合成多肽后，采用等离子共振试验和酶联免疫吸附测定试验，鉴定该序列与猪瘟E0蛋白相互作用的亲和力和特异性，结果表明P3序列与猪瘟E0蛋白具有较高的亲和力和特异性；本发明可通过对多肽进行标记，从而对猪瘟抗原进行快速定性和定量检测，并可通过多肽对蛋白的结合能力，利用多肽对猪瘟E0蛋白进行富集，为蛋白纯化提供新思路。

公开(公告)号：CN110408633A

公开(公告)日：2019-11-05

申请号：CN201910618587.5

申请日：2019-07-10

申请人： 郑州大学 ,  河南中泽生物工程有限公司

发明人： 陈玉梅 ,  王爱萍 ,  刘运超 ,  刘燕凯 ,  冯景

IPC分类号： C12N15/46 ,  C12N15/70 ,  C07K14/14 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/22

摘要： 本申请属于动物疫苗制备技术领域，具体涉及一种利用基因工程技术制备BTV1（蓝舌病1型病毒）VP2蛋白的制备方法专利申请事宜。蓝舌病1型病毒VP2蛋白基因编码序列VP2U由2886bp碱基组成，具体碱基序列如SEQ ID NO.1所示。具体原核表达制备BTV1 VP2蛋白时，包括：PCR扩增，酶切、与质粒pET28连接构建重组质粒pET28-VP2U，转化，诱导表达等步骤。本申请通过对相关编码基因的优化，进一步借助于原核表达系统的技术优势，为发酵制备BTV1 VP2蛋白奠定了一定技术基础。初步实验结果表明，发酵液上清中的目的蛋白表达量可达到58.4μg/ml，可为工业化生产奠定良好技术基础。

公开(公告)号：CN108752471A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810332092.1

申请日：2018-04-13

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 张改平 ,  王爱萍 ,  陈玉梅 ,  蒋敏 ,  刘东民 ,  刘运超 ,  周景明 ,  刘燕凯

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/06 ,  G01N33/577

摘要： 本发明公开了一种抗PCV2单克隆抗体的制备方法及其应用。公开该抗PCV2单克隆抗体及其重链可变区和轻链可变区的DNA序列和氨基酸序列。设计了所述的抗PCV2单克隆抗体的制备方法。将所述单克隆抗体在抗原/抗体检测试剂盒、抗原/抗体免疫层析试纸以及IFA、IPMA中和PCV2或PCV2 Cap的免疫亲和柱中应用。本发明的单克隆抗体能够同时识别PCV2a和PCV2b这两种主要的流行亚型，与PCV2全病毒以及PCV2 Cap蛋白都具有良好的反应原性，而与PCV1、PCV3亚型和猪源病毒均无交叉反应；为进行PCV2病原学和致病机理的研究及PCV2病原的临床检测研究奠定了基础。

公开(公告)号：CN116082466A

公开(公告)日：2023-05-09

申请号：CN202111307917.2

申请日：2021-11-05

申请人： 郑州大学 ,  河南中泽生物工程有限公司

发明人： 王爱萍 ,  张改平 ,  贾蕊 ,  周景明 ,  刘燕凯 ,  刘红亮 ,  陈玉梅 ,  祁艳华 ,  丁培阳 ,  马红芳 ,  梁超

IPC分类号： C07K14/01 ,  C12N15/34 ,  C07K16/08 ,  C12N15/13 ,  G01N33/569

摘要： 本发明涉及非洲猪瘟病毒CD2V表位肽及其应用、抗非洲猪瘟病毒CD2V单克隆抗体。本发明以重组ASFV CD2V为免疫原进行动物免疫，制备得到5株抗ASFV单克隆抗体，采用肽扫描法即重叠多肽法，将ASFV CD2V蛋白的胞外区重叠截短成18段短肽，分别与5株抗ASFV单克隆抗体反应，鉴定出5条表位肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1‑5所示。本发明的表位肽能够用作免疫原刺激动物产生抗ASFV血清或抗ASFV单克隆抗体；能够用于制备ASFV疫苗；能够用于制备非洲猪瘟病毒免疫检测试剂或试剂盒，为ASFV疫苗设计、抗体研发以及抗体检测试剂盒的研发提供新的抗原靶点。

公开(公告)号：CN115466746A

公开(公告)日：2022-12-13

申请号：CN202110655793.0

申请日：2021-06-11

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 王爱萍 ,  贾蕊 ,  张改平 ,  陈玉梅 ,  孙亚宁 ,  刘红亮 ,  丁培阳

IPC分类号： C12N15/50 ,  C12N15/11 ,  C12N15/866 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/558 ,  G01N33/531 ,  G01N33/532

摘要： 本发明涉及S‑mink基因、S‑mink蛋白的制备方法和应用、及用于动物的新型冠状病毒抗体检测试纸和制备方法。本发明在原始S蛋白(GenBank序列号为QNJ45226.1)胞外区基因的基础上进行了大幅度的改进设计，优化后的S‑mink序列密码子适应指数(CodonAdaptation Index,CAI)为0.89，更适用于昆虫杆状病毒表达系统。本发明利用上述真核系统表达纯化得到的重组S蛋白(S‑mink蛋白)作为抗原制备动物感染的新型冠状病毒抗体检测试纸，该试纸能快速准确的检测待测小鼠、水貂、猫、狗、养等动物血清中动物感染的新型冠状病毒抗体，5min内完成检测，并且检测灵敏度高。试验证明，待测水貂血清中新型冠状病毒抗体浓度为100ng/mL时依然可以准确检出，是一种携带方便、快速、准确检测动物感染的新型冠状病毒抗体的产品。

公开(公告)号：CN112552396B

公开(公告)日：2022-07-12

申请号：CN202011607066.9

申请日：2020-12-30

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 陈玉梅 ,  王爱萍 ,  蒋敏 ,  赵建国 ,  冯景 ,  石海宁 ,  赵孟孟

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/13 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

摘要： 本发明涉及抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体、制备方法及应用。本发明设计并合成能够模拟保守性p54蛋白NTD的多肽，并将其与BSA偶联作为免疫原，通过免疫学方法免疫BALB/c小鼠制备获得抗ASFVp54蛋白单克隆抗体，该抗体能够特异性的识别并结合p54蛋白的N端区域，该识别区域(aa 1‑29)区别于现有商品化单抗。本发明提供了上述抗体的重链可变区及轻链可变区基因序列，在此基础上，可以采用常规基因工程或蛋白质工程方法获得本发明的单克隆抗体。该单克隆抗体特异性强，灵敏度高，能与ASFV HLJ/18株病毒发生特异性反应，而与CSFV、PCV2、PRRSV、PEDV及PRV等猪源病毒不发生反应，为进行ASFV病原学和致病机理的研究及ASFV病原的临床检测研究奠定了基础。