公开(公告)号：CN110423761A

公开(公告)日：2019-11-08

申请号：CN201910608585.8

申请日：2019-07-08

申请人： 郑州大学 ,  河南中泽生物工程有限公司 ,  河南百奥生物工程有限公司

发明人： 王爱萍 ,  张改平 ,  贾蕊 ,  刘运超 ,  周景明 ,  祁元明 ,  赵建国 ,  牛艳 ,  王彦伟 ,  刘亚伟

IPC分类号： C12N15/34 ,  C12N15/11 ,  C12N15/866 ,  C07K14/01 ,  G01N33/558 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68

摘要： 本发明属于免疫蛋白制备及其应用技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒抗体检测试纸。本发明提出了编码非洲猪瘟病毒p54蛋白胞外区的基因序列E183L-1，基于一个总的发明构思，本发明还提出了扩增该基因序列的引物对和该基因序列编码的合成蛋白；为了解决非洲猪瘟病毒检测中存在的问题，本发明利用上述基因编码的合成蛋白制备了一种检测非洲猪瘟病毒抗体的试纸，能够快速、准确的检测非洲猪瘟病毒抗体，非常适用于基层和现场快速检测与诊断。

公开(公告)号：CN110627869B

公开(公告)日：2022-04-22

申请号：CN201910949075.7

申请日：2019-10-08

申请人： 河南省农业科学院 ,  河南中泽生物工程有限公司

发明人： 刘运超 ,  张改平 ,  陈玉梅 ,  王方雨 ,  尚延丽 ,  魏蔷 ,  冯华 ,  刘东民 ,  邢广旭 ,  邓瑞广

IPC分类号： C07K7/06 ,  G01N33/569

摘要： 本发明涉及与禽法氏囊病毒VP2蛋白特异性结合的多肽序列及其应用，属于分子生物学领域。本发明借助于计算机辅助设计，在禽法氏囊病毒VP2蛋白晶体结构的基础上，通过分子对接虚拟筛选技术，搜寻虚拟多肽数据库中与靶标蛋白结合模式与亲和力最佳的多肽配体，其多肽序列为SERWDN，即IBDVL9‑15。本发明利用表达纯化的IBDV VP2蛋白分别进行ELISA和局域表面等离子体共振试验，结果表明，IBDVL9‑15多肽能够与IBDV VP2蛋白有良好的结合能力，借助本发明设计而成的多肽，可用于对IBDV VP2抗原进行快速检测和分离纯化。

公开(公告)号：CN109781981B

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN201910088473.4

申请日：2019-01-30

申请人： 河南中泽生物工程有限公司 ,  郑州大学

发明人： 王爱萍 ,  张改平 ,  刘运超 ,  贾蕊 ,  刘东民 ,  赵建国 ,  祁元明 ,  石海宁

IPC分类号： G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N21/64

摘要： 本发明公开了一种用于检测非洲猪瘟病毒的分子探针及Realtime‑PCR检测方法，旨在解决现有检测技术可靠性和实用性差的技术问题。本发明检测非洲猪瘟病毒的分子探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明配制了一种检测非洲猪瘟病毒的RT‑PCR反应液，制备了一种检测非洲猪瘟病毒RT‑PCR反应液冻干粉、一种非洲猪瘟病毒检测试剂盒，并提供了非洲猪瘟病毒的定性和定量检测方法。本发明设计的分子探针及建立RT‑PCR检测方法具有敏度性高、重复性好、特异性强的特点，提高PCR技术检测ASFV的可靠性和易用性，实现无污染、高通量的检测，可用于检测易感动物及相关动物制品中ASFV核酸。

公开(公告)号：CN108802381B

公开(公告)日：2021-03-12

申请号：CN201810604281.X

申请日：2018-06-13

申请人： 河南中泽生物工程有限公司 ,  扬州大学

发明人： 刘东民 ,  朱礼倩 ,  傅小恬 ,  陈鑫烨 ,  杨继飞 ,  王丽 ,  李青梅 ,  郭军庆 ,  邢广旭 ,  周景明 ,  刘运超

IPC分类号： G01N33/569 ,  G01N33/558

摘要： 本发明公开了一种牛病毒性腹泻病毒鉴别检测试纸条及其制备方法，以快速灵敏检测BVDV抗体。该试纸条由支撑底板、包被吸附材料层、蛋白标记承载材料层、样品缓冲材料层、液体吸收材料层、外层保护材料组成；所述包被吸附材料设有测试线和质控线；所述试纸条的蛋白标记采用胶体金标记；所述蛋白标记所用的蛋白为从噬菌体多肽文库中筛选所得的与BVDV抗体结合的噬菌体单克隆；所述噬菌体单克隆表达的多肽表位为LTPHKHHKHLHA。其制备方法包括金标噬菌体单克隆的制备、金标垫的制备、硝酸纤维素膜的制备、组装各部件，即得。本发明可以在十分钟之内获得检测结果，快速敏感，成本低，操作简单易于基层在生产和科研中推广和应用。

公开(公告)号：CN109781981A

公开(公告)日：2019-05-21

申请号：CN201910088473.4

申请日：2019-01-30

申请人： 河南中泽生物工程有限公司 ,  郑州大学

发明人： 王爱萍 ,  张改平 ,  刘运超 ,  贾蕊 ,  刘东民 ,  赵建国 ,  祁元明 ,  石海宁

IPC分类号： G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N21/64

摘要： 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒的分子探针、试剂盒及其应用，旨在解决现有检测技术可靠性和实用性差的技术问题。本发明检测非洲猪瘟病毒的分子探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明配制了一种检测非洲猪瘟病毒的RT-PCR反应液，制备了一种检测非洲猪瘟病毒RT-PCR反应液冻干粉、一种非洲猪瘟病毒检测试剂盒，并提供了非洲猪瘟病毒的定性和定量检测方法。本发明设计的分子探针及建立RT-PCR检测方法具有敏度性高、重复性好、特异性强的特点，提高PCR技术检测ASFV的可靠性和易用性，实现无污染、高通量的检测，可用于检测易感动物及相关动物制品中ASFV核酸。

公开(公告)号：CN108761098A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810960341.1

申请日：2018-08-22

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 周景明 ,  刘东民 ,  郭军庆 ,  蒋敏 ,  刘运超 ,  陈玉梅 ,  孙亚宁 ,  牛艳 ,  贾蕊

IPC分类号： G01N33/68

CPC分类号： G01N33/68

摘要： 本发明公开了一种致病性猪圆环病毒双联抗原快速检测试纸及其制备方法，旨在解决即时检测PCV2与PCV3的技术问题。该测试纸包括支撑板，样品端样品垫，金标垫，检测膜，手柄端吸水垫，检测线T1，检测线T2和质控线C，样品端样品垫、金标垫、检测膜、手柄端吸水垫互相交叉渗透；金标垫标记有PCV2单克隆抗体和PCV3 Cap蛋白单克隆抗体，检测线T1包被有PCV2单克隆抗体，检测线T2包被有PCV3 Cap蛋白单克隆抗体，质控线包被有兔抗小鼠IgG多克隆抗体或金黄色葡萄球菌SPA。本发明试纸廉价、特异、快速、简便无需仪器、易于运输，为疾病防控、检验检疫、感染监测以及临床和养殖基层的即时检测提供方便和效率。

公开(公告)号：CN106148358A

公开(公告)日：2016-11-23

申请号：CN201610557798.9

申请日：2016-07-15

申请人： 河南省农业科学院 ,  河南中泽生物工程有限公司

发明人： 张改平 ,  刘运超 ,  王爱萍 ,  陈玉梅 ,  邢广旭 ,  姬鹏超 ,  刘文英 ,  王娟 ,  冯景 ,  刘东民 ,  邓瑞广

IPC分类号： C12N15/35 ,  C07K14/015 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N7/04 ,  A61K39/23 ,  A61P31/20 ,  C12R1/19

CPC分类号： C07K14/005 ,  A61K39/12 ,  A61K2039/5258 ,  C12N7/00 ,  C12N15/70 ,  C12N2750/14322 ,  C12N2750/14323 ,  C12N2750/14334 ,  C12N2800/101 ,  C12N2800/22

摘要： 本发明公开了一种猪细小病毒VP2蛋白的编码基因、原核表达VP2蛋白病毒样颗粒的方法及其在疫苗制备中的应用。对序列进行优化，人工合成VP2基因，将合成的基因插入pET28a载体，然后和伴侣蛋白质粒共转入BL21(DE3)宿主菌中，使VP2蛋白和伴侣蛋白共表达，以促进VP2蛋白的正确折叠。实验证明，通过该重组菌表达的VP2蛋白能在体外实现自组装，且具有良好的免疫原性。使用由本发明表达的VP2蛋白制备的病毒样颗粒亚单位疫苗免疫小鼠和豚鼠能够诱导高水平的血凝抑制抗体和中和抗体产生，而且此疫苗能够预防豚鼠免受猪细小病毒强毒的感染。采用本发明的重组菌能够高效制备猪细小病毒病毒样颗粒，生产成本低、操作简单、具有更好的生物安全性。

公开(公告)号：CN110423761B

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN201910608585.8

申请日：2019-07-08

申请人： 郑州大学 ,  河南中泽生物工程有限公司 ,  河南百奥生物工程有限公司

发明人： 王爱萍 ,  张改平 ,  贾蕊 ,  刘运超 ,  周景明 ,  祁元明 ,  赵建国 ,  牛艳 ,  王彦伟 ,  刘亚伟

IPC分类号： C12N15/34 ,  C12N15/11 ,  C12N15/866 ,  C07K14/01 ,  G01N33/558 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68

摘要： 本发明属于免疫蛋白制备及其应用技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒抗体检测试纸。本发明提出了编码非洲猪瘟病毒p54蛋白胞外区的基因序列E183L‑1，基于一个总的发明构思，本发明还提出了扩增该基因序列的引物对和该基因序列编码的合成蛋白；为了解决非洲猪瘟病毒检测中存在的问题，本发明利用上述基因编码的合成蛋白制备了一种检测非洲猪瘟病毒抗体的试纸，能够快速、准确的检测非洲猪瘟病毒抗体，非常适用于基层和现场快速检测与诊断。

公开(公告)号：CN108586607B

公开(公告)日：2020-09-11

申请号：CN201810332746.0

申请日：2018-04-13

申请人： 郑州大学 ,  河南中泽生物工程有限公司

发明人： 王爱萍 ,  陈玉梅 ,  张改平 ,  刘东民 ,  王彦伟 ,  刘运超 ,  栗宁 ,  蒋敏

IPC分类号： C07K16/08 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

摘要： 本发明公开了一种抗HPV16 L1蛋白单克隆抗体的制备方法及其应用。公开该抗HPV16 L1蛋白单克隆抗体及其重链可变区和轻链可变区的DNA序列和氨基酸序列。设计了所述的抗HPV16 L1蛋白单克隆抗体的制备方法。将所述的抗HPV16 L1蛋白单克隆抗体在免疫学检测、抗原或抗体检测试剂盒中应用。该抗HPV16 L1蛋白的单克隆抗体能够特异性识别HPV16这一主要的流行亚型，与HPV16假病毒以及HPV16 L1蛋白都具有良好的反应性，与其他亚型的L1蛋白没有交叉反应。为进一步改造其抗体可变区序列制备不同组合形式的基因工程抗体和进行HPV不同亚型病原的临床检测研究奠定了良好的基础。

公开(公告)号：CN108752471B

公开(公告)日：2020-06-26

申请号：CN201810332092.1

申请日：2018-04-13

申请人： 河南中泽生物工程有限公司

发明人： 张改平 ,  王爱萍 ,  陈玉梅 ,  蒋敏 ,  刘东民 ,  刘运超 ,  周景明 ,  刘燕凯

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/06 ,  G01N33/577

摘要： 本发明公开了一种抗PCV2单克隆抗体的制备方法及其应用。公开该抗PCV2单克隆抗体及其重链可变区和轻链可变区的DNA序列和氨基酸序列。设计了所述的抗PCV2单克隆抗体的制备方法。将所述单克隆抗体在抗原/抗体检测试剂盒、抗原/抗体免疫层析试纸以及IFA、IPMA中和PCV2或PCV2 Cap的免疫亲和柱中应用。本发明的单克隆抗体能够同时识别PCV2a和PCV2b这两种主要的流行亚型，与PCV2全病毒以及PCV2 Cap蛋白都具有良好的反应原性，而与PCV1、PCV3亚型和猪源病毒均无交叉反应；为进行PCV2病原学和致病机理的研究及PCV2病原的临床检测研究奠定了基础。