一种利用多酶分子机器制备γ-氨基丁酸的方法

    公开(公告)号:CN118879799A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202411056064.3

    申请日:2024-08-02

    申请人: 南开大学

    摘要: 本发明涉及一种利用多酶分子机器制备γ‑氨基丁酸的方法,首先将甲酸脱氢酶和谷氨酸脱氢酶进行耦合,甲酸脱氢酶裂解甲酸催化NAD+转化为NADH,而NADH推动谷氨酸脱氢酶将α‑酮戊二酸转化为谷氨酸,再由谷氨酸脱羧酶将中间物谷氨酸转化为目标产物γ‑氨基丁酸;通过甲酸脱氢酶(FDH),谷氨酸脱氢酶(GluDH)和谷氨酸脱羧酶(GAD)三类酶的级联形成多酶分子机器,借助合成材料协调适配谷氨酸脱羧酶所需催化微环境,实现一锅法从α‑酮戊二酸合成γ‑氨基丁酸。将多酶分子机器用于该反应中,反应体系稳定,成本低廉,能够减少反应物的扩散路径和催化中间体的损失,从而提高反应速率和产率。

    一种β-氨基酸酯酰基转移酶突变体、应用于L-肌肽及制备方法

    公开(公告)号:CN118879657A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202410962601.4

    申请日:2024-07-17

    摘要: 本发明公开了一种β‑氨基酸酯酰基转移酶突变体、应用于L‑肌肽及制备方法,β‑氨基酸酯酰基转移酶突变体是将来源于霉菌属的氨基酸序列的第179位和341位进行单突变和/或双突变获得的。单突变包括第179位色氨酸突变为甘氨酸或第341位亮氨酸突变为赖氨酸中的任意一种;双突变为第179位色氨酸突变为甘氨酸和第341位亮氨酸突变为赖氨酸。本发明β‑氨基酸酯酰基转移酶突变体可催化200mM L‑组氨酸转化为L‑肌肽,转化率大于70%,L‑肌肽含量达到140mM。相比较于野生型,转化率提高了1.3倍。

    一种用于催化胆固醇硫酸酯合成的工程微生物及其应用

    公开(公告)号:CN118853719A

    公开(公告)日:2024-10-29

    申请号:CN202410839248.0

    申请日:2024-06-26

    摘要: 本发明涉及一种用于人体肠道中转化冗余胆固醇生成益生小分子胆固醇硫酸酯的工程微生物及其应用,所述工程微生物包括磺基转移酶、PAPS合成途径、无机焦磷酸酶、多聚磷酸激酶和胆固醇转运蛋白簇的组合,上述蛋白的氨基酸序列包括SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.23所示序列中的任意一种或至少两种的组合。本发明通过筛选获得了能够高效催化胆固醇生成胆固醇硫酸酯的磺基转移酶,引入PAPS合成途径、PAPS强化途径和胆固醇转运蛋白簇,并通过实验室定向进化获得了工程菌株,应用于降解机体内过剩的胆固醇的同时生成对机体有益的小分子。