公开(公告)号：CN112684029A

公开(公告)日：2021-04-20

申请号：CN202011404578.5

申请日：2020-12-05

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 邹聪明 ,  蔺忠龙 ,  陈颐 ,  何鲜 ,  顾开元 ,  张志敏 ,  苏家恩 ,  袁坤 ,  杨学书 ,  杨雪彪 ,  隋学艺 ,  刘芮 ,  王涛 ,  郑东方

IPC分类号： G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/72 ,  G01N21/3563

摘要： 本发明公开了一种基于烟叶差异代谢物含量快速检测烟叶成熟度的方法及装置，该方法利用LC‑MS对烟叶代谢物进行非靶向代谢物检测分析，并通过XCMS在线平台进行数据预处理和统计分析，筛选出烟叶差异代谢物，构建其分子结构式库，并结合MS‑FINDER软件中质谱预测方法，对筛选出的差异代谢物进行定性，筛选出一种或多种判断烟叶成熟度的差异代谢物。通过检测判断烟叶成熟度的差异代谢物离子流强度，判断烟叶成熟度。该装置是以光谱数据采集单元获取待测烟叶样品的红外光吸收值，通过预测模型预测用于判断烟叶成熟度的差异代谢物的离子流强度大小，最后根据判断模型判断待测烟叶的成熟度。本发明实现了烟叶成熟度的快速、准确判断，为后续烟叶烘烤提供了保障。

公开(公告)号：CN111172294A

公开(公告)日：2020-05-19

申请号：CN202010116491.1

申请日：2020-02-25

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 童治军 ,  隋学艺 ,  肖炳光 ,  王丙武 ,  方敦煌 ,  宋中邦 ,  高玉龙 ,  李文正 ,  赵璐 ,  谢贺 ,  白戈 ,  李梅云 ,  李永平 ,  焦芳婵 ,  吴兴富 ,  袁诚 ,  黄昌军 ,  孔光辉 ,  师君丽

IPC分类号： C12Q1/6888 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了一种与烟草尼古丁合成主效调控基因nic1紧密连锁的共显性SSR标记及其应用，所述的与烟草尼古丁合成主效调控基因nic1紧密连锁的共显性SSR标记的编号为TM22038、TM23004和TM22041，其PCR扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。所述的应用为所述的与烟草尼古丁合成主效调控基因nic1紧密连锁的共显性SSR标记在检测烟草基因组DNA中是否存在纯合基因型nic1而具有低尼古丁含量烟草品种中的应用。本发明所述的共显性SSR标记具有稳定、可靠、简便、快捷和低成本的特点，因此该分子标记可以作为烟草品质育种中低尼古丁含量基因nic1分子标记辅助选择的应用。

公开(公告)号：CN110839367A

公开(公告)日：2020-02-28

申请号：CN201911140582.2

申请日：2019-11-20

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 邹聪明 ,  宗吉建 ,  隋学艺 ,  李勇 ,  胡彬彬 ,  赵高坤 ,  陈颐 ,  宋中邦 ,  何鲜 ,  姜永雷 ,  顾华国

IPC分类号： A01C1/00 ,  C12Q1/6895 ,  G01N30/02

摘要： 本发明公开一种基于烟碱定量转化率和基因表达筛选朱砂烟种子的方法，包括从朱砂烟种子库中选种育苗；出苗到生长30～40d且长至30～40cm高后选底部第2至第4片状态良好烟叶取样；将取样置于乙烯利+脱落酸混合溶液中浸润后打孔，将打孔后剩余烟叶干燥至表面无水分；将无水分烟叶烘干至恒重；用化学分析烟叶的烟碱和降烟碱含量，计算烟碱转化率；检测打孔烟叶CYP82E4基因表达；根据烟碱转化率和CYP82E4基因表达，筛选出符合烟碱定量转化率的烟株培植，同时去掉转化率不符烟株；将筛选出的烟株套袋至成熟留种，即得到烟碱定量转化率的朱砂烟种子。本发明具有稳定可靠、筛选速度快、准确率高、种子烟碱转化率可控等特点。

公开(公告)号：CN110643616A

公开(公告)日：2020-01-03

申请号：CN201911005068.8

申请日：2019-10-22

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 隋学艺 ,  王丙武 ,  宋中邦 ,  高玉龙 ,  李文正 ,  李梅云 ,  赵璐 ,  袁诚 ,  张洪博 ,  师君丽 ,  李永平 ,  孔光辉 ,  曾建敏 ,  邹聪明 ,  刘勇 ,  黄昌军 ,  吴兴富

IPC分类号： C12N15/29 ,  C12N15/10 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

摘要： 本发明公开了烟草降烟碱合成调控基因NtERF91及其克隆方法与应用，降烟碱合成调控基因NtERF91核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID：No.2所示。本发明还公开了降烟碱合成调控基因NtERF91的克隆方法，具体步骤包括：A、确定NtERF91基因序列；B、提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；C、根据NtERF91基因序列设计合成特异性引物，以cDNA作为模板，进行PCR扩增；D、回收和纯化PCR产物；E、构建了含NtERF91基因的过表达载体。将过表达载体通过农杆菌介导的转化在烟草中过表达，制备转基因植株。结果显示，转基因植株的上部、中部、下部烟叶中降烟碱含量分别相比对照增加了2.4倍、1.6倍和1.8倍，说明烟草NtERF91基因在培育高降烟碱含量的烟草方面具有较大的应用前景。

公开(公告)号：CN108374014A

公开(公告)日：2018-08-07

申请号：CN201810126177.4

申请日：2018-02-08

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 高玉龙 ,  宋中邦 ,  李文正 ,  王丙武 ,  焦芳婵 ,  吴兴富 ,  李梅云 ,  隋学艺 ,  赵璐 ,  李永平

IPC分类号： C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

摘要： 本发明公开了一种提高烟草叶片钾含量的基因NtTPKa及其克隆方法与应用。提高烟草叶片钾含量的基因NtTPKa核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示。本发明还公开了提高烟草叶片钾含量的基因NtTPKa的克隆方法，具体步骤包括：A、确定NtTPKa基因序列；B、提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；C、根据NtTPKa基因序列设计合成特异性引物，以cDNA作为模板，进行PCR扩增；D、回收和纯化PCR产物并与pTOPO载体连接；构建了含NtTPKa基因的RNAi表达载体。将RNAi载体通过农杆菌介导法转化烟草，制备转基因植株。获得的转基因植株钾含量比对照提高20%以上。说明烟草NtTPKa基因在培育高钾含量的烟草方面具有重大的应用前景。

公开(公告)号：CN115992282B

公开(公告)日：2024-10-11

申请号：CN202211020009.X

申请日：2022-08-24

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 黄昌军 ,  曾建敏 ,  袁诚 ,  刘勇 ,  于海芹 ,  童治军 ,  吴兴富 ,  张光海 ,  方敦煌 ,  肖炳光 ,  隋学艺 ,  李勇 ,  师君丽

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

摘要： 本发明属于烟草育种领域，涉及用于抗斑萎病烟草7号染色体背景筛选的引物组及其应用。提供用于抗斑萎病烟草育种背景筛选的PCR引物组合，包括第一PCR引物组和/或第二PCR引物组；所述第一PCR引物组由核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑3所示的三条引物组成；所述第二PCR引物组由核苷酸序列如SEQ ID NO:4‑6所示的三条引物组成；所述抗斑萎病烟草为供体亲本Polalta烟草和受体亲本K326烟草的杂交及回交后代。本发明的引物组可用于早世代筛选具有K326背景的抗斑萎病烟草，极大地缩短K326抗斑萎病定向改良的育种周期，提高育种效率。

公开(公告)号：CN118600076A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410716861.3

申请日：2024-06-04

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 黄昌军 ,  刘勇 ,  袁诚 ,  曾建敏 ,  于海芹 ,  冯智宇 ,  童治军 ,  隋学艺

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12N15/11

摘要： 本发明属于分子生物学技术领域，涉及用于检测短RTSW导入片段的分子标记、引物组及方法。提供选育含有短RTSW导入片段的抗斑萎病烟草的方法，其包括：a)以抗斑萎病烟草Polalta为父本、栽培烟草为母本进行杂交，并以所述栽培烟草为轮回亲本进行回交，得到子代植株；b)从所述子代植株中筛选具有抗斑萎病性状并且不含有核苷酸序列如SEQ ID No.13～18所示的分子标记中的一种或几种的植株，即得到含有短RTSW导入片段的抗斑萎病烟草。所述方法能够筛选出含有更短RTSW导入片段、遗传背景更接近主栽烟草品种的抗斑萎病烟草，在烟草分子育种中具有重要的应用前景。

公开(公告)号：CN117524314A

公开(公告)日：2024-02-06

申请号：CN202311532517.0

申请日：2023-11-16

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 肖炳光 ,  童治军 ,  方敦煌 ,  黄昌军 ,  刘勇 ,  曾建敏 ,  隋学艺 ,  冯智宇

IPC分类号： G16B30/20 ,  G16B40/00

摘要： 本申请公开了一种基于Poretools、Nextdenovo软件的烟草基因组缺口填补方法、装置、设备及介质，包含以下步骤：步骤S1：采用默认参数设置下的Poretools软件对待处理数据进行修剪和滤除，得到处理后数据；步骤S2：按照表1所示的核心参数设置Nextdenovo软件，获得初始组装结果；步骤S3：对初始组装结果的基因组缺口进行识别重叠区域，得到填补后烟草基因组数据。采用该方法对烟草基因组缺口进行填补，极大提升了基因组质量而获得无缺口或少缺口的完整烟草基因组数据，所得完整烟草基因组数据用于后续研究将有利于提高所得研究结果的准确性。

公开(公告)号：CN115992282A

公开(公告)日：2023-04-21

申请号：CN202211020009.X

申请日：2022-08-24

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 黄昌军 ,  曾建敏 ,  袁诚 ,  刘勇 ,  于海芹 ,  童治军 ,  吴兴富 ,  张光海 ,  方敦煌 ,  肖炳光 ,  隋学艺 ,  李勇 ,  师君丽

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

摘要： 本发明属于烟草育种领域，涉及用于抗斑萎病烟草7号染色体背景筛选的引物组及其应用。提供用于抗斑萎病烟草育种背景筛选的PCR引物组合，包括第一PCR引物组和/或第二PCR引物组；所述第一PCR引物组由核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑3所示的三条引物组成；所述第二PCR引物组由核苷酸序列如SEQ ID NO:4‑6所示的三条引物组成；所述抗斑萎病烟草为供体亲本Polalta烟草和受体亲本K326烟草的杂交及回交后代。本发明的引物组可用于早世代筛选具有K326背景的抗斑萎病烟草，极大地缩短K326抗斑萎病定向改良的育种周期，提高育种效率。

公开(公告)号：CN112143738B

公开(公告)日：2023-04-11

申请号：CN202011054281.0

申请日：2020-09-30

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 王丙武 ,  隋学艺 ,  高玉龙 ,  宋中邦 ,  赵璐 ,  李梅云 ,  孔光辉 ,  焦芳婵 ,  吴兴富 ,  李永平

IPC分类号： C12N15/29 ,  C12N15/10 ,  C12N15/82 ,  A01H5/12 ,  A01H6/82

摘要： 本发明公开了一种烟草受体蛋白基因及其克隆方法与应用。所述的烟草受体蛋白基因包括NtCOI1‑1和NtCOI1‑2，其核苷酸序列如SEQ ID:NO.1和SEQ ID:NO.2所示。克隆方法包括烟草根cDNA合成：提取烟草根总RNA，反转录得到第一链cDNA；NtCOI1‑1、2基因的PCR扩增：以烟草根cDNA为模板，根据NtCOI1‑1、2基因序列设计引物，进行PCR扩增，回收和纯化PCR扩增产物，并测序。应用为所述的烟草受体蛋白基因NtCOI1‑1、2在调控烟草烟碱含量的转基因烟草植株中的应用。本发明利用CRISPR/CAS9技术对克隆的NtCOI1‑1、2基因进行了功能鉴定。烟草NtCOI1‑1、2基因的克隆鉴定为调控烟草烟碱含量提供了新的靶标基因。