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公开(公告)号：CN118726214A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202310339140.0
申请日：2023-03-31
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一种紫丁香苷生物合成工程菌和应用，该工程菌包括宿主菌和在宿主菌中共表达的HpaBC、COMT和UGT72E2；该工程菌联合对香豆醇发酵培养可生物合成紫丁香苷。本发明还提供一种紫丁香苷生物生物合成工程菌和应用，该工程菌包括对香豆醇生物合成工程菌和在该对香豆醇生物合成工程菌中共表达的HpaBC、COMT和UGT72E2；其中，所述对香豆醇生物合成工程菌包括宿主菌和在该宿主菌中共表达的TAL、4CL1、CCR和ADH6，所述宿主菌中还共表达AroGfbr和TyrAfbr；该紫丁香苷生物生物合成工程菌能够实现以简单碳源为源头，高效率生物合成的紫丁香苷。
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公开(公告)号：CN117802017A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202311512890.X
申请日：2023-11-14
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一株产L‑2,3‑二氨基丙酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用，所述重组大肠杆菌在出发菌基因组中采用Ptrc启动子异源多拷贝过表达合成L‑2,3‑二氨基丙酸的基因簇sbnAB。所述重组大肠杆菌还通过敲除磷酸丝氨酸磷酸化酶编码基因serB阻断磷酸丝氨酸向丝氨酸方向合成。所述重组大肠杆菌还再次通过Ptrc启动子过表达3‑磷酸甘油酸脱氢酶编码基因serA和磷酸丝氨酸转氨酶编码基因serC增加磷酸丝氨酸的供应。本发明还提供一种通过上述改造策略构建L‑2,3‑二氨基丙酸重组大肠杆菌的方法，以及上述重组大肠杆菌在发酵生产L‑2,3‑二氨基丙酸中的应用。其中，上述重组大肠杆菌发酵生产L‑2,3‑二氨基丙酸的摇瓶产量达2.4 g/L，发酵罐放大培养产量达12.1 g/L，转化率达0.41 g/g。
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公开(公告)号：CN114107354B
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202111387603.8
申请日：2021-11-22
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了构建稳定遗传的β‑熊果苷高效生物合成的基因工程菌株的方法及其应用。首先，在宿主内整合编码酪氨酸分解酶、香豆酸辅酶A连接酶、β‑肉桂酰羟基化酶、β‑肉桂酰氧化酶、β‑肉桂酰脱酰酶(phdC)的基因，构建能够高产对羟基苯甲酸的宿主菌株。其次，在该宿主内整合编码4‑羟基苯甲酸羟化酶和葡萄糖基转移酶的基因，构建能够生产β‑熊果苷的菌株。最后将编码核心途径的基因莽草酸途径基因整合到上述工程菌的基因组上，同时敲除竞争途径基因构建了稳定遗传的β‑熊果苷高效生物合成的基因工程菌株，摆脱了应用质粒对工程菌生产造成不稳定的影响，对β‑熊果苷的工业化生产极具有应用前景。
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公开(公告)号：CN112375723A
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN202011111992.7
申请日：2020-10-16
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 生产马来酸的工程菌及其构建方法和应用涉及生物工程技术领域。本发明提供了一种生产马来酸的工程菌，包括在宿主内共表达编码异分支酸合成酶、异分支酸丙酮酸裂解酶、水杨酸‑5‑羟化酶、马来酰丙酮酸异构酶和马来酰丙酮酸裂解酶的基因。上述工程菌还包括在所述宿主内过表达编码莽草酸激酶、DAHP合成酶、PEP合成酶、转酮酶A的基因来实现马来酸的增产。本发明还提供一种上述生产马来酸的工程菌的构建方法和应用。利用上述生产马来酸的工程菌，以葡萄糖和/或甘油等碳源来生产马来酸，实现了马来酸的从头合成。
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公开(公告)号：CN118726213A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202310338274.0
申请日：2023-03-31
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/56 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12P7/42 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种宿主重组细胞，包括宿主菌和导入所述宿主菌的表达SAM的再生酶基因，所述SAM的再生酶为S‑腺苷高半胱氨酸核酸酶和S‑核苷高半胱氨酸裂解酶。本发明还提供一种阿魏酸生物合成工程菌，包括上述宿主重组细胞和导入该宿主重组细胞中的表达阿魏酸合成的相关酶基因。进一步，上述宿主重组细胞中还导入所述大肠杆菌的中共表达的关键羟基供体FADH2的再生酶基因。本发明还提供一种上述工程菌的应用，利用上述工程菌发酵培养阿魏酸。上述工程菌中的宿主细胞中导入甲基供体和羟基供体，提高了阿魏酸生物合成产量，有利于工业化生产阿魏酸。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118562841A
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202410782988.5
申请日：2024-06-18
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12Q1/6897 , C02F3/34 , C12R1/19 , C02F101/30
Abstract: 构建强度范围广泄露表达低的无机磷响应元件库的方法及其应用涉及基因工程技术领域。本发明通过对结构最简单的无机磷启动子PphoA进行结构功能分析，改变上游元件的长度和与结合位点的距离，偶联RBS序列改造，理性设计了32个强度范围在4286‑95740之间梯度分布且泄露表达较低的无机磷响应元件。将本发明的元件应用到高磷条件下藻毒素的降解中，在24小时内实现了87.1％的降解；在低磷条件下，24小时内实现了大肠杆菌细胞90.7％的裂解，确保了改造系统的生物安全性。
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公开(公告)号：CN114517174B
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202011297837.9
申请日：2020-11-19
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一种合成三七素的工程菌，包括宿主菌和转入所述宿主菌的质粒载体，所述质粒载体中同时导入了编码合成草酰辅酶A的酶和2,3‑二氨基丙酸N‑草酰基转移酶BAHD的基因。所述合成草酰辅酶A的酶的三种方式：酰化乙醛酸脱氢酶panE、乙醛酸脱氢酶Gloxdh和草酰辅酶A连接酶AAE、草酰乙酸水解酶Oah和草酰辅酶A连接酶AAE。所述质粒载体中还导入了编码合成2,3‑二氨基丙酸生物合成酶的基因。上述工程菌通过增强上游途径和抑制竞争等方式进行优化以提高三七素的生产能力。因此，利用上述工程菌生产三七素具有方法简单、成本低廉、转化率高等优点，有利于工业化生产，降低成本。
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公开(公告)号：CN115478082A
公开(公告)日：2022-12-16
申请号：CN202211140012.5
申请日：2022-09-20
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明公开了一种生物合成乙酸苄酯的方法，合成途径中包含5个酶，分别为分支酸变位酶(pheA)，4‑羟基扁桃酸合酶(hmaS)，S‑扁桃酸脱氢酶(mdlB)，苯甲酰甲酸脱羧酶(mdlC)，乙醇氧乙酰转移酶(ATF2)。将ATF2所编码的基因在宿主中表达，结果得到可以利用苯甲醇生产乙酸苄酯的生产宿主。将上述基因导入苯甲醇的高产宿主中实现了乙酸苄酯的从头合成。同时本发明还公开了一种提高乙酸苄酯产量的方法，是通过利用辅助扩散系统取代天然的葡萄糖转运系统(PTS)，延迟了细胞的生长，提供了更多的乙酰CoA，使得乙酸苄酯的产量跟高。本发明方法对乙酸苄酯的工业化具有应用前景。
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公开(公告)号：CN114480232A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202011154682.3
申请日：2020-10-26
Applicant: 北京化工大学
Abstract: 本发明提供了一种生产丙二酸的工程菌，包括宿主菌和转入所述宿主菌的质粒载体，其中，所述质粒载体中导入了编码木糖脱氢酶、木糖酸脱水酶、醛缩酶、丙二酸单酰辅酶A还原酶和醛脱氢酶的基因。上述工程菌还包括过表达来自大肠杆菌的乙酰辅酶A羧化酶，敲除大肠杆菌体内木糖本身的代谢途径以及副产物途径中的醛还原酶基因来实现丙二酸的增产。本发明还提供一种上述生产丙二酸的工程菌的构建方法和应用。利用上述生产丙二酸的工程菌，以木糖为碳源来生产丙二酸，实现了丙二酸的从头合成，扩大了木糖的工业化应用。
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公开(公告)号：CN113265412A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110550828.4
申请日：2021-05-20
Applicant: 北京化工大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/90 , C12N9/88 , C12N9/10 , C12N9/02 , C12P7/42 , C12P13/02 , C12P19/44
Abstract: 本发明提供了一种多酶偶联定位体系，包括dCas蛋白‑linker‑目标酶融合质粒、引导RNA质粒和DNA支架质粒；所述dCas蛋白‑linker‑目标酶融合质粒在所述引导RNA质粒的引导下锚定在所述DNA支架质粒上。所述dCas蛋白‑linker‑目标酶融合质粒中的目标酶通过linker与dCas蛋白连接。所述目标酶是目标产物生物合成途径中所需的酶。所述DNA支架质粒包含多个dCas结合位点。本发明还提供一种上述多酶偶联定位体系的构建方法和应用。本发明通过采用上述多酶偶联定位体系可以实现多个酶进行空间定位并顺序催化，提高目标产物的产量。
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