新型乳酸菌抗菌肽及高效表达及抗菌抗癌活性的应用

    公开(公告)号:CN110105433A

    公开(公告)日:2019-08-09

    申请号:CN201811548163.8

    申请日:2018-12-18

    摘要: 本发明涉及一种新型乳酸菌抗菌肽及高效表达及抗菌抗癌活性的应用,通过分析干酪乳杆菌(L.casei HZ1)的基因图谱,得到抗菌肽LHH1的基因序列,如序列1所示,模拟其二级结构,确定该肽的主要理化性质。依照乳酸菌密码子偏爱性优化并全合成LHH1基因,将该基因片段克隆到乳酸菌表达载体pE-SUMO中,构建得到pE-SUMO-EA-LHH1重组质粒。将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)pLysS中,对其进行诱导表达并分离纯化。本方法所获得的抗菌肽LHH1热稳定性强,有良好的抗菌、抗癌效果,可作为优良的防腐添加剂及发酵剂用于食品、药品、饲料等行业中。

    一种离体状态的模拟皮肤模型

    公开(公告)号:CN106568911A

    公开(公告)日:2017-04-19

    申请号:CN201610943395.8

    申请日:2016-10-26

    IPC分类号: G01N33/15

    CPC分类号: G01N33/15

    摘要: 本发明为设计一种离体状态的模拟皮肤模型,利用细胞培养小室与孔板作为离体皮肤模型“骨架”,将永生化表皮细胞细胞培养小室中,成纤维细胞接种于下室孔板中,进行共培养。本发明方法可有效模拟人体皮肤基本构造,并有效的用于化妆品及药用化合物透皮吸收及促进成纤维细胞增殖、迁移功能的评价,可以很好的取代传统动物实验及离体皮肤组织实验,不仅可有效降低实验成本、提高实验通量及效率,而且可以很好的满足日益重视的科研伦理要求。

    高抗氧化及降血压活性乳酸菌发酵乳制品的生产方法

    公开(公告)号:CN102265924B

    公开(公告)日:2013-05-22

    申请号:CN201110140908.9

    申请日:2011-05-30

    IPC分类号: A23C9/123

    摘要: 本发明涉及一种利用基因工程技术在乳酸菌中生产超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)及S型褶皱臂尾轮虫血管紧张素转化酶抑制(Angiotensin-ConvertingEnzymeInhibitor,ACEI)肽,进而制备具有高效抗氧化、降血压功效的发酵乳制品的新方法。具体内容包括:通过PCR方法扩增获得大肠杆菌Fe-SOD编码基因,进一步采用重叠延伸(splicingbyoverlapextension,SOE)PCR法,构建Usp45信号肽-SOD-(G4S)3-ACEI肽融合蛋白基因,连接到乳酸菌表达质粒pMG36e后,转入乳酸菌中,培养并发酵纯牛乳。本发明所获得的基因工程菌可以高效表达SOD及ACEI肽,同时其培养液及牛乳发酵产品均具有明显的SOD与ACEI活性。

    长柱金丝桃药材HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱和应用

    公开(公告)号:CN103091439A

    公开(公告)日:2013-05-08

    申请号:CN201310004433.X

    申请日:2013-01-07

    IPC分类号: G01N30/88

    摘要: 本发明涉及长柱金丝桃药材HPLC指纹图谱的建立方法,包括供试品溶液的制备、色谱条件的选择,通过对10批次长柱金丝桃药材HPLC指纹图谱的对比,确定其共有指纹特征峰,得到长柱金丝桃药材的标准指纹图谱。本发明长柱金丝桃药材标准指纹图谱将长柱金丝桃药材作为一个整体对待,通过比较其共有特征峰可以找出不同药材之间的细微差异,因此适于对长柱金丝桃药材的真伪的鉴别和质量控制,保证了长柱金丝桃药材质量的稳定、均一和可控。

    利用双质粒系统在大肠杆菌中表达瑞替普酶的方法

    公开(公告)号:CN102250933A

    公开(公告)日:2011-11-23

    申请号:CN201110140907.4

    申请日:2011-05-30

    摘要: 本发明涉及一种利用双质粒系统在大肠杆菌中表达溶栓药物瑞替普酶(Reteplase,rPA)的方法。通过PCR扩增得到rPA的基因片断,将该基因片断克隆到载体pET22b中,构建获得重组质粒pET22b-rPA。利用pET22b-rPA和pET40b二者不同的抗性,将其共转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在氨苄青霉素(Amp)和卡那霉素(Kan)的双抗选择压力下,筛选获得工程菌。该工程菌经IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达后,可生产获得可溶性的rPA目的蛋白,经纤维蛋白平板法检测,证明本方法所获得的rPA蛋白不需进行复性,即可具有显著的溶栓活性。