用气单胞菌氨肽酶由多肽除去N末端丙氨酸残基的方法

    公开(公告)号:CN1353755A

    公开(公告)日:2002-06-12

    申请号:CN00808282.0

    申请日:2000-04-26

    摘要: 本发明描述了使用由海洋细菌解蛋白气单胞菌衍生的氨肽酶,由多肽(优选重组蛋白质)除去N末端丙氨酸残基的方法。因此,气单胞菌氨肽酶(AAP;E.C.3.4.11.10)可以用于(例如)由人生长激素(hST或hGH)、猪生长激素(pST)、和牛生长激素(bST)的衍生物除去N末端丙氨酰基残基,从而产生具有其天然氨基酸序列的蛋白质。可以在自由的溶液中进行酶反应,或者可以将AAP固定在固相支持物上,用于在体外进行反应。用于(例如)将Ala-hGH转变成hGH的有效方法包括:在大肠杆菌中表达Ala-hGH,回收包涵体,在去污剂中溶解并重新折叠,通过超滤除去去污剂,选择性沉淀,酶切割,然后进行两个柱层析步骤。

    牛生长激素的非变性效能的测定

    公开(公告)号:CN1119042A

    公开(公告)日:1996-03-20

    申请号:CN94191402.X

    申请日:1994-01-24

    发明人: J·P·张

    IPC分类号: G01N30/02

    摘要: 描述了一种测定牛生长激素效能的方法。通过以平均粒子直径约为5μm到约15μm的亲水性多孔聚合物凝胶作为固定相,以对牛生长激素试样非变性的pH值约为8到约12的缓冲水溶液作为流动相的粒度排阻HPLC测量牛生长激素试样中的生物活性牛生长激素蛋白的水平。根据所测生物活性牛生长激素蛋白的水平来测定牛生长激素试样的效能。该方法可便利、准确和精密地测量bST样品的效能。

    有生物活性的蛋白质与其生产的方法

    公开(公告)号:CN1021973C

    公开(公告)日:1993-09-01

    申请号:CN86101830

    申请日:1986-02-21

    申请人: 孟山都公司

    CPC分类号: C07K14/61 A23K20/168

    摘要: 在细菌中生产具N-端丙氨酸不具N-端蛋氨酸的多肽的方法。所表达的DNA顺序有丙氨酸密码子,直接紧靠的至少有一个蛋氨酸密码子,并供具有基本上与这类天然存在的真核生物蛋白质的各种牛和猪生长激素品种的氨基酸顺序的表达。在另一个重要的实施例中,本发明提供一类包含一定的含缬氨酸生长激素品种的成分,它在泌乳的哺乳动物中增加牛奶产量数比用其他相同的亮氨酸生长激素品种成分要大。