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公开(公告)号：CN101381748A
公开(公告)日：2009-03-11
申请号：CN200810155132.6
申请日：2008-10-23
申请人： 江南大学
摘要： 通过两步法供氧策略提高发酵生产L－精氨酸产量的方法，属于发酵工程技术领域。本发明在钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)SYPW发酵生产L－精氨酸过程中，0～24h控制转速600r/min，24－30h控制转速550r/min，30－36h控制转速500r/min，36－42h控制转速450r/min，42h后控制转速400r/min，并维持到发酵结束。本发明提出了一种新的两步法供氧策略(NOS)0～24h，控制转速600r/min，然后每6h转速下降50r/min直至转速达到400r/min，并维持到发酵结束。运用新的供氧策略后，L－精氨酸的产量比高供氧(HOS)和中供氧(MOS)分别增加了16％和51％，而且，葡萄糖的消耗速率明显增加，发酵周期仅为81h，比HOS条件下提前了6h。
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公开(公告)号：CN114369561B
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202210026910.1
申请日：2022-01-11
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种调控CapBCA单体表达水平的菌株及在聚谷氨酸生产中的应用，本发明将天然生产菌地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶的基因簇capBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，利用不同数量的lacO调控合成酶基因簇各基因的表达水平，获得的重组菌株所生产的γ‑PGA产量为3.63～5.84g/L，产率为0.15～0.27g/L/OD600。还发现单独提高CapB和CapC的表达强度，及适度表达CapA均有利于γ‑PGA的合成，而且CapC对于γ‑PGA的合成发挥着至关重要的作用，其表达水平对γ‑PGA产量的影响贡献度可达68.24％。结果有助于深入了解γ‑PGA合成酶单体的功能，以及对γ‑PGA合成的影响规律。
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公开(公告)号：CN117209573B
公开(公告)日：2024-06-28
申请号：CN202311145074.X
申请日：2023-09-06
申请人： 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 , 江南大学
摘要： 本发明公开了一种转录因子NCgl0581突变体及其在L‑丝氨酸检测中的应用，属于生物检测技术领域。本发明通过分子对接，获得转录因子NCgl0581与L‑丝氨酸的关键结合位点，进一步进行模型分析及虚拟筛选，获得L‑丝氨酸生物传感器突变体NCgl0581E136P。经实验验证，基于突变体NCgl0581E136P构建的生物传感器可响应25mM丝氨酸，比突变前的响应浓度降低1倍。本发明通过突变降低了生物传感器的检测下限，为低浓度L‑丝氨酸的检测奠定基础，具有很好的应用价值和前景。
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公开(公告)号：CN114350629B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202210101216.1
申请日：2022-01-27
申请人： 江南大学
摘要： 本发明涉及一种维生素D3 C‑25位P450羟化酶及其基因、表达载体、菌株及应用，属于酶工程技术和基因工程技术领域。维生素D3 C‑25位P450羟化酶CYP109E1‑H的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，并将基因cyp109E1‑H插入pMA5质粒中，以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主构建菌株，实现了维生素D3 C‑25位P450羟化酶CYP109E1‑H的异源表达，且成功实现了对维生素D3的高效转化，同时专一性高，减少反应副产物，降低了生产成本，为其进一步的工业化应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN116042545A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202310035864.6
申请日：2023-01-10
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12N9/00 , C12N15/70 , C12N15/52 , C12N1/21 , C07K5/093 , C12P21/02 , A61K38/06 , A61P39/02 , A61P39/06 , A61K8/64 , A61Q19/08 , A61Q19/00 , A23L33/18 , C12R1/19
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种大肠杆菌谷胱甘肽双功能合成酶蛋白突变体、基因工程菌及应用。本发明首先对来源于嗜热链球菌的谷胱甘肽双功能合成酶进行异源表达，构建了重组大肠杆菌，对谷胱甘肽双功能合成酶蛋白进行改造，对其进行定点突变，提高了酶活。本发明成功在大肠杆菌中表达了谷胱甘肽双功能合成酶，并进一步提高了酶活，酶活提高了48.93％，有利于进一步提高谷胱甘肽的产量。通过全细胞催化，突变体S722A的谷胱甘肽产量达到20.10mmol/L，产量和转化率都有了进一步提高。
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公开(公告)号：CN112266923B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202011185254.7
申请日：2020-10-30
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12N15/54 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/10 , A61K38/45 , A61P1/16 , A61P19/08 , A61P19/02 , A61P25/00 , C12R1/125
摘要： 本发明公开了一种表达腺苷蛋氨酸合酶的枯草芽孢杆菌及应用，属于基因工程技术领域。本发明在枯草芽孢杆菌异源表达酿酒酵母来源的腺苷蛋氨酸合酶，并通过启动子适配性改造，构建了一株高水平表达腺苷蛋氨酸合酶的枯草芽孢杆菌。进一步通过对其进行发酵条件优化，提高其腺苷蛋氨酸合酶表达水平，使重组菌的酶活高达0.925U·mL‑1，较出发菌株提高了180％，也是首次SAM合酶以枯草芽孢杆菌作为宿主的表达。
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公开(公告)号：CN115992057A
公开(公告)日：2023-04-21
申请号：CN202211341558.7
申请日：2022-10-28
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种降解对甲基苯酚的重组酿酒酵母菌株的构建及应用，对甲基苯酚是浓香型白酒产生泥臭味的主要化合物，本发明以酿酒酵母CEN.PK2‑1C为宿主，异源表达谷氨酸棒杆菌13032中降解对甲基苯酚的关键酶4‑甲基苯基磷酸酯合成酶，该酶由两个基因creI和creH编码，重组酿酒酵母能够有效地降解培养基中添加的对甲基苯酚，通过增强creIH基因的表达水平，成功提高了重组酿酒酵母降解对甲基苯酚的效率，本研究为如何消减对甲基苯酚提供了理论支持，对解决对甲基苯酚引起的异嗅味问题、提升白酒品质具有重要意义。
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公开(公告)号：CN112921011B
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202110376599.9
申请日：2021-04-07
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体和工程菌及应用，属于酶工程技术领域。本发明的分枝杆菌(Mycobacterium)LY‑1的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体是将3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶的320位天冬氨酸突变成了酪氨酸，得到3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体KstD1；以pET32a为表达质粒，以大肠杆菌BL21为表达宿主，实现分枝杆菌LY‑1中3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体的异源表达，重组菌大肠杆菌BL21‑pET32a‑KstD1能够在短时间内转化高浓度的C1,2‑位脱氢甾体化合物，且转化率达到98％，降低了生产成本，具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN114075556A
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN202111395664.9
申请日：2021-11-18
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种可羟基化维生素D3C‑1和C‑25的P450酶及其基因、表达载体、重组菌与应用，本发明的P450维生素D3羟化酶CYP109A2‑H和重组菌及应用，与现有技术相比，本发明的P450维生素D3羟化酶CYP109A2‑H，经与已报道来源于DSM319的CYP109A2氨基酸序列比对，同源性为95.53％；本发明的P450酶能够在枯草芽孢杆菌中高效表达，且重组菌能够在37℃转化维生素D3为25(OH)VD3和1α，25(OH)2VD3，转化率达87.64％，25(OH)VD3和1α，25(OH)2VD3产量分别为7.78mg/L和10.62mg/L，产物中1α，25(OH)2VD3产量高于25(OH)VD3，产物的生物活性高，对于活性羟基维生素D3的生产具有重要作用。
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公开(公告)号：CN113402593A
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110646232.4
申请日：2021-06-09
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种L‑苏氨酸转运蛋白及其编码基因与应用，属于生物工程技术领域。本发明在研究氨基酸转运蛋白基础上，提供了谷氨酸棒杆菌中NCgl0580序列具有转运L‑苏氨酸功能。本发明提供一种新型L‑苏氨酸转运蛋白NCgl0580，它具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，全长903个核苷酸，编码300个氨基酸。通过基因工程手段，将NCgl0580在产L‑苏氨酸的谷氨酸棒杆菌33a实现过表达，能够将L‑苏氨酸的产量提高至2.3g/L。这为代谢工程改造菌株提高L‑苏氨酸产量提供了新思路。
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