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公开(公告)号：CN113817698B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202111098375.2
申请日：2021-09-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种朝鲜淫羊藿来源的黄酮8‑异戊烯基转移酶及其应用，属于基因和代谢工程领域。本发明筛选获得了朝鲜淫羊藿来源的EkF8DT3，并构建了表达该酶的重组酿酒酵母。该重组酿酒酵母具有催化山奈酚合成8‑异戊烯基山奈酚的能力，在250mL摇瓶进行发酵，外源添加200mg/L的山奈酚，可以获得118.3mg/L的8‑异戊烯基山奈酚，较已报道的EsPT2增产356.8％，对于推动高产淫羊藿素在工业中的应用具有重要意义。
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公开(公告)号：CN114107362B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202111371287.5
申请日：2021-11-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了染色质调控因子Ahc1p在减少酿酒酵母尿素积累中的应用，属于微生物遗传和分子生物学技术领域。本发明将酿酒酵母中的染色质调控因子Ahc1p基因序列连接到高拷贝质粒上，并转化到酿酒酵母中游离表达，使过量表达Ahclp基因的酿酒酵母在以天冬酰胺、精氨酸或脯氨酸为唯一氮源的培养基中的尿素积累量分别降低了51.55％、54.50％和37.21％。还增加了多种非偏好氮源的利用率，不仅有助于减少有害氮代谢物的积累，还有望大大提高原料中的非偏好氮源的利用率，减少原料的浪费。
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公开(公告)号：CN116396878A
公开(公告)日：2023-07-07
申请号：CN202310413556.2
申请日：2023-04-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了合成麦角硫因的解脂亚洛酵母菌株及其应用，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明通过在解脂亚洛酵母中表达Trichoderma parareesei来源的TrEGT1和TrEGT2，实现了麦角硫因的异源合成。通过筛选不同的启动子驱动TrEGT1和TrEGT2，获得了最佳的麦角硫因合成基因组合。进一步将基因组合多拷贝整合，并通过前体组氨酸的合成强化，提高了解脂亚洛酵母合成麦角硫因的能力，使摇瓶发酵产量达到1200±12.3mg/L，5L发酵罐上发酵产量达到8.6g/L。本发明将异源代谢途径整合到解脂亚洛酵母实现了麦角硫因的高效率生产，有助于实现低成本规模化生产麦角硫因及其产品。
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公开(公告)号：CN116376796A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310335902.X
申请日：2023-03-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产绿原酸的重组大肠杆菌及应用，属于基因工程及生物工程技术领域。本发明在大肠杆菌中表达来源于约氏黄杆菌的酪氨酸解氨酶FjTAL，大肠杆菌内源的hpaBC，3‑脱氧‑D‑阿拉伯庚酮糖酸‑7‑磷酸合成酶突变体aroGfbr，运动发酵单胞菌来源的分支酸变位酶tyrC，大肠杆菌来源的奎宁酸/莽草酸‑5‑脱氢酶ydiB，烟草来源的羟基肉桂酰辅酶A奎宁酸转移酶NtHQT和拟南芥来源的4‑香豆酸:辅酶A连接酶At4CL1，实现了绿原酸的合成。然后过表达大肠杆菌来源的aroB、gldA,并敲除内源基因menI，进一步提高绿原酸产量。本发明构建的重组菌发酵生产绿原酸的产量在摇瓶水平可达638.2mg/L，在5L发酵罐上达到2.8g/L，为工业化生产绿原酸提供了一种新的方法。
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公开(公告)号：CN112852857B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202110165340.X
申请日：2021-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌中多基因敲除的方法，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明构建了基于sacB的氧化葡萄糖酸杆菌的基因编辑工具，将多种抗性的敲除质粒转化至同一氧化葡萄糖酸杆菌中，可实现多基因的敲除，并能够促进用以提高其性能的代谢工程修饰。将本发明的基因编辑工具应用于氧化葡萄糖酸杆菌山梨糖还原酶、酮还原酶和磷酸葡萄糖酸脱水酶的敲除验证，表明该方法有多基因敲除的作用，对于合成生物学的发展具有潜在的价值和意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113913314B
公开(公告)日：2023-02-24
申请号：CN202111428903.6
申请日：2021-11-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降低黄酒中尿素和氨基甲酸乙酯积累的菌株及其应用，属于酿酒及食品安全领域。本发明提供了一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2，已于2021年11月02日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20211359；该酿酒酵母可降解尿素，和同时可产氨基甲酸乙酯水解酶的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)d6，同时添加到黄酒发酵中，在经过前酵和后酵阶段，最终检测发酵结束后的黄酒中的尿素和氨基甲酸乙酯含量均比对照组有明显的降低，降低量分别为70.06和68.73％。
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公开(公告)号：CN113862290B
公开(公告)日：2022-12-27
申请号：CN202111098860.X
申请日：2021-09-18
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/54 , C12N15/81 , C12N15/70 , C12N9/10 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12P17/06 , A61K31/352 , A61P3/10 , A61P3/04 , A23L33/105 , A23L29/00
Abstract: 本发明公开了一种来源于甘草的异黄酮4′‑O‑甲基转移酶及其应用，属于基因和代谢工程领域。本发明提供了SEQ ID NO.3所示的异黄酮4′‑O‑甲基转移酶的新用途，可用于催化柚皮素合成异樱花素。本发明将该酶在酿酒酵母中表达，构建获得了可利用柚皮素合成异樱花素的菌株，实现了微生物法合成异樱花素。本发明构建的重组酿酒酵母可在72h内催化300mg/L的柚皮素生成53.3mg/L的异樱花素，摩尔转化率达16.9％。
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公开(公告)号：CN112391360B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202011213591.2
申请日：2020-11-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了黄酮3β‑羟化酶还原酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过对黄酮3β‑羟化酶还原酶进行突变，获得了能够提高催化和生产性能的黄酮3β‑羟化酶还原酶突变体，将得到的突变体在酿酒酵母中，协助黄酮3β‑羟化酶进行转化，能够使得圣草酚含量较亲本的805.6mg/L提高至980.9mg/L～1052.1mg/L，提高了21.8％～30.6％。因而本发明获得的黄酮3β‑羟化酶还原酶突变体具备广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114752543A
公开(公告)日：2022-07-15
申请号：CN202210514258.8
申请日：2022-05-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种以葡萄糖为底物一步发酵合成2‑酮基‑L‑古龙酸的氧化葡萄糖酸杆菌及应用，属于基因工程及生物工程技术领域。本发明通过在氧化葡萄糖酸杆菌ATCC9937中敲除醛酮还原酶bdhAB，异源表达2,5‑DKG转运蛋白KgtpA、2,5‑DKG还原酶dkgA，获得能够通过葡萄糖直接合成2‑KLG的重组氧化葡萄糖酸杆菌ZL01‑ΔbdhAB‑dkgA‑KgtpA，该菌株能够以葡萄糖为底物一步发酵合成2‑KLG，对于在化妆品、纺织品、食品等领域实现2‑酮基‑L‑古龙酸或维生素C的工业化生产具有重要意义。
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公开(公告)号：CN114606256A
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202210436848.3
申请日：2022-04-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一组用于酿酒酵母多拷贝整合的质粒工具包，属于基因工程和代谢工程领域。通过将筛选基因KlLEU2的起始密码子替换为GUG，从而构建得到了一组能够实现高拷贝整合的表达框，将表达框整合至酿酒酵母中，可实现外源基因的高效、稳定表达。可使目的荧光蛋白表达强度显著提升至改造前的10倍左右，并使转化子数量也降低至20～40个，更有利于简化筛选流程、提升筛选效率。本发明的多拷贝整合质粒将有利于在微生物中过表达目的蛋白。
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