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公开(公告)号：CN114480237A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210167872.1
申请日：2022-02-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高葡萄糖酸杆菌中2‑KLG产量的两阶段发酵方法，属于生物工程技术领域。本发明结合葡萄糖酸杆菌最适生长条件与限速酶SDH适宜的催化条件，开发了两阶段发酵策略，本发明通过控制发酵过程的前48h pH为5.8～6.2、温度为28～32℃，第49‑168hpH为6.8～7.2、温度为33～35℃，使得2‑KLG产量相比于单阶段发酵提升了34.2％，达到52.2g/L。
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公开(公告)号：CN112852857B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202110165340.X
申请日：2021-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌中多基因敲除的方法，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明构建了基于sacB的氧化葡萄糖酸杆菌的基因编辑工具，将多种抗性的敲除质粒转化至同一氧化葡萄糖酸杆菌中，可实现多基因的敲除，并能够促进用以提高其性能的代谢工程修饰。将本发明的基因编辑工具应用于氧化葡萄糖酸杆菌山梨糖还原酶、酮还原酶和磷酸葡萄糖酸脱水酶的敲除验证，表明该方法有多基因敲除的作用，对于合成生物学的发展具有潜在的价值和意义。
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公开(公告)号：CN112094843B
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN202010978371.2
申请日：2020-09-17
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌中基因抑制的方法，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明将相应靶基因crRNA在氧化葡萄糖酸杆菌中进行表达。通过验证对质粒上mCherry荧光表达的抑制作用，表明重组氧化葡萄糖酸杆菌有基因抑制的作用，并且通过对氧化葡萄糖酸杆菌基因组中的其他基因进行抑制，也达到了类似的抑制效果，进一步证明了此系统对基因组上基因的抑制功能。为在氧化葡萄糖酸杆菌中抑制目的基因提供了一种新方法，能够快速、有效抑制目的基因的表达，提高了对氧化葡萄糖酸杆菌的基因编辑效率。
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公开(公告)号：CN112852857A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110165340.X
申请日：2021-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌中多基因敲除的方法，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明构建了基于sacB的氧化葡萄糖酸杆菌的基因编辑工具，将多种抗性的敲除质粒转化至同一氧化葡萄糖酸杆菌中，可实现多基因的敲除，并能够促进用以提高其性能的代谢工程修饰。将本发明的基因编辑工具应用于氧化葡萄糖酸杆菌山梨糖还原酶、酮还原酶和磷酸葡萄糖酸脱水酶的敲除验证，表明该方法有多基因敲除的作用，对于合成生物学的发展具有潜在的价值和意义。
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公开(公告)号：CN114480236B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202210167094.6
申请日：2022-02-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产2‑KLG的葡萄糖酸杆菌一步菌底盘细胞库的构建方法，属于基因工程及生物工程技术领域。本发明通过对含有SNDHSDH的G.cerinus CGMCC 1.110与G.oxydans WSH‑004进行蛋白组分析，并对葡萄糖酸杆菌WSH‑003、CGMCC 1.49、CGMCC 1.110中SNDHSDH的功能验证，鉴定了SNDHSDH表达量低是多数葡萄糖酸杆菌不产2‑KLG的关键因素，进而通过过表达葡萄糖酸杆菌内源SNDHSDH构建了丰富的一步合成2‑KLG的底盘细胞库，为后续构建高产2‑KLG的葡萄糖酸杆菌提供了可选择的底盘细胞。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114480236A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210167094.6
申请日：2022-02-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产2‑KLG的葡萄糖酸杆菌一步菌底盘细胞库的构建方法，属于基因工程及生物工程技术领域。本发明通过对含有SNDHSDH的G.cerinus CGMCC 1.110与G.oxydans WSH‑004进行蛋白组分析，并对葡萄糖酸杆菌WSH‑003、CGMCC 1.49、CGMCC 1.110中SNDHSDH的功能验证，鉴定了SNDHSDH表达量低是多数葡萄糖酸杆菌不产2‑KLG的关键因素，进而通过过表达葡萄糖酸杆菌内源SNDHSDH构建了丰富的一步合成2‑KLG的底盘细胞库，为后续构建高产2‑KLG的葡萄糖酸杆菌提供了可选择的底盘细胞。
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公开(公告)号：CN112111505A
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN202010978779.X
申请日：2020-09-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌中基因敲除的方法，属于基因工程及生物工程技术领域。本发明将相应靶基因crRNA及活性Cas3在氧化葡萄糖酸杆菌中进行表达。通过验证对氧化葡萄糖酸杆菌中目的基因的敲除作用，表明本发明的这种敲除方法能够有效敲除氧化葡萄糖酸杆菌中目的基因，与现有的在氧化葡萄糖酸杆菌中敲除基因的方法相比，操作更加简便、快捷、高效。
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公开(公告)号：CN114480237B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202210167872.1
申请日：2022-02-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高葡萄糖酸杆菌中2‑KLG产量的两阶段发酵方法，属于生物工程技术领域。本发明结合葡萄糖酸杆菌最适生长条件与限速酶SDH适宜的催化条件，开发了两阶段发酵策略，本发明通过控制发酵过程的前48h pH为5.8～6.2、温度为28～32℃，第49‑168hpH为6.8～7.2、温度为33～35℃，使得2‑KLG产量相比于单阶段发酵提升了34.2％，达到52.2g/L。
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公开(公告)号：CN112899211B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202110308849.5
申请日：2021-03-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌中提高2‑KLG产量的方法，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明利用基于sacB的基因组编辑系统，在氧化葡萄糖酸杆菌的末端氧化酶bo3翻译起始位点上游插入强启动子P114增强了末端氧化酶bo3表达量，促进了酶催化过程中的辅因子再生及电子传递，减少了活性氧的产生，过量表达山梨糖/酮脱氢酶SNDHSDH后得到的2‑KLG产量是野生型氧化葡萄糖酸杆菌WSH‑003过量表达SNDHSDH得到的2‑KLG产量的2.44倍。
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公开(公告)号：CN112111505B
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202010978779.X
申请日：2020-09-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌中基因敲除的方法，属于基因工程及生物工程技术领域。本发明将相应靶基因crRNA及活性Cas3在氧化葡萄糖酸杆菌中进行表达。通过验证对氧化葡萄糖酸杆菌中目的基因的敲除作用，表明本发明的这种敲除方法能够有效敲除氧化葡萄糖酸杆菌中目的基因，与现有的在氧化葡萄糖酸杆菌中敲除基因的方法相比，操作更加简便、快捷、高效。
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