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公开(公告)号：CN105237613A
公开(公告)日：2016-01-13
申请号：CN201510773280.4
申请日：2015-11-13
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C07K1/14
Abstract: 本发明涉及植物蛋白提取，具体是一种非变性植物全蛋白提取液及其制备方法，其特征在于：该提取液是包含有以下成分的水溶液：磷酸缓冲液、EDTA、甘油、聚乙烯吡咯烷酮PVP及蛋白酶抑制剂。本发明的特点在于使用该蛋白提取液提取的植物全蛋白适用于蛋白酶活性的分析及BCA等方法对蛋白浓度的测定。该提取液的特点在于不对蛋白进行变性，不添加影响BCA等测定的还原剂，提取后的蛋白可冷冻保存数月，复融后基本无沉淀，且保存前后蛋白活性基本不受影响，提取的蛋白量较高，还可直接用于进一步分离纯化，因此该提取液在植物生理生化研究方面具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN105130775A
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201510401248.3
申请日：2015-07-10
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 一种开环西松烷二萜类化合物及其分离制备方法和应用，特征是：该化合物是由烟草中分离纯化而得到，具有如下结构： 命名为Nicotiaditerpene A，是从烟叶中分离的开环西松烷二萜类化合物，经多种现代色谱光谱分析，特别是应用二维核磁共振谱对化合物的结构进行综合解析，确定了该化合物的化学结构及立体构型。经文献检索，该化合物为一新化合物。本发明还发现该化合物对多种肿瘤细胞均有抑制作用。本发明充分利用烟草资源优势，深入研究开发，分离出具有独特化学结构的西松烷二萜类化合物，为开展西松烷二萜类成分相关研究及应用奠定坚实基础，并为研制新的抗肿瘤药物提供新的思路。
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公开(公告)号：CN105018351A
公开(公告)日：2015-11-04
申请号：CN201510401246.4
申请日：2015-07-10
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 一种快速分离、鉴定烟草内生真菌的方法，其特征在于：包括烟叶表面消毒、切片培养、菌丝的分离纯化、菌丝DNA的提取、PCR扩增真菌的ITS-rDNA基因、PCR目的片段的测序、序列的比对鉴定等步骤。本发明的特点和意义在于：建立并完善烟草内生真菌的分离、培养与鉴定体系，有助于提供烟草内生真菌与烟草之间相互作用关系及其生物功能的新信息，为系统剖析烟草内生菌的多样性与功能性提供理论依据。本发明的提出对于烟草内生真菌的研究及开发、阐明烟草内生真菌的种类、分布特点，提高烟叶品质具有重要意义。
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公开(公告)号：CN104458682A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410613314.9
申请日：2014-11-05
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: G01N21/64
Abstract: 一种多功能寡聚核苷酸链用于多种物质的荧光检测方法，被测物质包括寡聚核苷酸链的互补链、凝血酶、Hg2+和L-半胱氨酸四种不同物质，包括以下步骤：⑴配制溶液：a.Tris-HNO3缓冲溶液；b.氧化石墨烯分散液；⑵将荧光探针预热并缓慢冷却到室温；⑶将不同浓度的标准被测物质与荧光探针溶液混合，室温下孵育；⑷加入氧化石墨烯分散液和缓冲溶液，测量荧光发射光谱，根据检测到的荧光信号强度，建立被测物质的标准曲线；⑸将样品溶液代替被测物质进行反应，根据检测的荧光信号强度和对应的标准曲线，得到样品溶液中被测物质含量。本发明优点为：灵敏度高干扰小，选择性好，可达到快速检测互补链、凝血酶、Hg2+和L-半胱氨酸四种不同物质的目的。
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公开(公告)号：CN104297410A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410613361.3
申请日：2014-11-05
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本发明提供一种液相色谱-串联质谱法LC-MS/MS检测新鲜烟叶中脱落酸和茉莉酸的分析方法，包括以下步骤：1）配制提取溶剂；2）新鲜烟叶液氮速冻，冷冻干燥并粉碎；3）粉碎好的样品加入提取溶剂，低温超声提取；4）冷冻离心，取上清液并过滤；5）LC-MS/MS进行检测。其优点在于：前处理方法简单，只需超声并过滤，无需固相萃取柱纯化处理，与现有的方法相比，本发明中所采用的LC-MS/MS法，灵敏度高，精密度好，加标回收率高，100个样品前处理耗时小于2小时，而现有文献中所述方法前处理繁琐费时，100个样品处理约需3天。因此，本发明方法能有效地提高分析效率，适合复杂基质中低含量目标物的分析。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102816852B
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201210314949.X
申请日：2012-08-30
Applicant: 浙江中烟工业有限责任公司 , 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种早期预判不同品种烟草成熟期叶片生物碱相对含量的方法，包括：(1)收集至少两个烟草品种的处于旺长期植株的叶片，分别提取各叶片的总RNA，并逆转录合成cDNA；(2)针对烟草中任一与生物碱合成相关的基因设计特异性引物，利用该特异性引物，以cDNA为模板，进行实时荧光定量PCR扩增，计算得到各烟草品种所述与生物碱合成相关的基因的相对表达量；(3)预判各烟草品种成熟期叶片的生物碱相对含量；本发明方法克服了现有检测方法只能在烟叶采收后才能对其定量分析的缺陷，避免了现有方法检测的条件限制，为及早判定烟叶生物碱含量开辟新的途径。
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公开(公告)号：CN103548447A
公开(公告)日：2014-02-05
申请号：CN201310583691.8
申请日：2013-11-20
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC: A01C1/06
Abstract: 一种含有生根剂和锰锌剂的本氏烟包衣种子的制备方法，其特征在于：在种衣剂中添加0.01％～0.03％的生根粉和0.1％～0.3％的锰锌剂，混合均匀，将本氏烟种子按包衣、成核、丸化、定型、抛光及干燥常规包衣加工工艺处理后，得到含有生根剂和锰锌剂的本氏烟包衣种子。本发明制备工艺简单，成本低。本氏烟包衣种子具有活力高、发芽时间短、苗壮和长势一致等优点。同时，本氏烟种子经包衣处理后，便于实验操作，为本氏烟种子提供了更稳定和适宜的生长微环境。
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公开(公告)号：CN102242224B
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201110198507.9
申请日：2011-07-15
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 三重一步法RT-PCR同时检测烟草上三种病毒的方法，其特征在于：是同时检测烟草普通花叶病毒、马铃薯Y病毒和黄瓜花叶病毒的方法，该方法包括甄别比对病毒基因组中保守区域，人工筛选合成适用于三种病毒病复合RT-PCR特异性引物；分析获得TMV、PVY、CMV侵染烟叶样本；整合反转录和PCR反应所需酶和缓冲液，通过反应条件优化，建立基于一步法RT-PCR复合检测烟叶感染TMV、PVY、CMV的方法。本发明所采用的三重一步法RT-PCR反应，具有操作简便、省时省力、结果可靠、成本低廉的优点，同时可有效减少操作过程中造成样品交叉污染的可能性，对于烟草农业生产中TMV、PVY、CMV的监测监控具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN102242224A
公开(公告)日：2011-11-16
申请号：CN201110198507.9
申请日：2011-07-15
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 三重一步法RT-PCR同时检测烟草上三种病毒的方法，其特征在于：是同时检测烟草普通花叶病毒、马铃薯Y病毒和黄瓜花叶病毒的方法，该方法包括甄别比对病毒基因组中保守区域，人工筛选合成适用于三种病毒病复合RT-PCR特异性引物；分析获得TMV、PVY、CMV侵染烟叶样本；整合反转录和PCR反应所需酶和缓冲液，通过反应条件优化，建立基于一步法RT-PCR复合检测烟叶感染TMV、PVY、CMV的方法。本发明所采用的三重一步法RT-PCR反应，具有操作简便、省时省力、结果可靠、成本低廉的优点，同时可有效减少操作过程中造成样品交叉污染的可能性，对于烟草农业生产中TMV、PVY、CMV的监测监控具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN205258476U
公开(公告)日：2016-05-25
申请号：CN201521046327.9
申请日：2015-12-16
Applicant: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
Abstract: 本实用新型涉及分子生物学领域使用器具，具体是一种随温度改变颜色的液体培养基用锥形瓶，包括锥形瓶瓶体，其特征在于：在锥形瓶瓶底嵌装两块由感温材料制成的感温条，其中一个感温条在温度高于50℃时呈现无色，低于50℃时呈现红色；另外一个感温条在温度高于40℃时呈现无色，低于40℃时呈现红色。利用该锥形瓶配置培养基时，高温灭菌后瓶底的温度指示条呈现无色，当温度冷却至50℃以下时，其中一个感温指示条会变成红色；当温度冷却至40℃以下时，另外一个感温条也会变成红色。根据颜色的变化可以很好的掌握添加抗生素的时间，既能保证抗生素的活性，又能避免培养基因温度过低而凝结。
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