从植物甾醇水相发酵液中提取4-雄烯二酮的方法和工艺

    公开(公告)号:CN103773832B

    公开(公告)日:2016-07-06

    申请号:CN201310754003.X

    申请日:2013-12-31

    IPC分类号: C12P33/02 C07J1/00

    摘要: 本发明提供了一种从植物甾醇水相发酵液中提取4-雄烯二酮的方法和工艺。所述方法包括:采用植物甾醇为原料进行微生物发酵生成4-雄烯二酮;将发酵结束后的发酵液通过离心机进行液固分离,提取湿固体物料;在所述湿固体物料中加入丙酮-纯水的混合溶剂,在升温至40-60℃的条件下持续搅拌60-90分钟后,在40℃以上的温度条件下进行固液分离;对固液分离后得到的溶液进行结晶处理;对结晶后的物料进行离心得到4-雄烯二酮的粗品,对所述粗品进行精制得到4-雄烯二酮成品。本发明可以减少4-雄烯二酮产品中的杂质,简化提取精制的过程。

    一种重组酿酒酵母及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN105385614A

    公开(公告)日:2016-03-09

    申请号:CN201510961778.3

    申请日:2015-12-17

    申请人: 浙江大学

    摘要: 本发明公开了一种重组酿酒酵母及其构建方法与应用,所述重组酿酒酵母命名为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)W303-1b,保藏编号为CCTCC NO:M 2015662,保藏日期为:2015年11月5日。本发明还公开了利用所述重组酿酒酵母制备微粒体蛋白的方法,包括以下步骤:(1)接种;(2)培养,收集菌体细胞;(3)将菌体细胞破碎;(4)第一次离心,获得上清液;(5)将沉淀剂加入上清液,第二次离心获得沉淀,即为所述的微粒体蛋白。本发明又公开了所述微粒体蛋白转化白桦脂醇生成白桦脂酸中的应用。本发明利用重组酿酒酵母培养制备的微粒体蛋白,可以转化白桦脂醇生成白桦脂酸,该方法周期短,后期处理方便,白桦脂酸得率最高可达27.5%。

    一种优化雄烯二酮发酵工艺的方法

    公开(公告)号:CN105177101A

    公开(公告)日:2015-12-23

    申请号:CN201410245060.X

    申请日:2014-06-05

    IPC分类号: C12P33/02

    摘要: 本发明公开了一种优化雄烯二酮发酵工艺的方法,其特征在于:发酵配方为(g/L):葡萄糖25,黄豆饼粉27,尿素1.0,柠檬酸4,磷酸氢二钾3,硫酸镁0.5,硫酸亚铁0.05,碳酸钙6,植物甾醇30,吐温7,豆油15,泡敌2,pH值8.0。本发明有效的增加甾醇溶解度,提高了甾醇利用率,减少了发酵过程中产生的泡沫,提高了产量,降低了发酵染菌率,降低了生产成本。

    一株高产雄甾-4-烯-3,17-二酮的植物甾醇转化菌株的选育

    公开(公告)号:CN104403974A

    公开(公告)日:2015-03-11

    申请号:CN201410746848.9

    申请日:2014-12-09

    申请人: 江南大学

    CPC分类号: C12R1/07 C12N15/01 C12P33/02

    摘要: 一株高产雄甾-4-烯-3,17-二酮的植物甾醇转化菌株的选育,属于生物工程中发酵技术领域。本发明以实验室保藏的一株能有效转化植物甾醇为AD和ADD的菌株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloiquefaciens)ST 06为出发菌株;经常压室温等离子体(ARTP)诱变后,经过一系列的初筛和复筛,从500株变异菌株中筛选得到一株高产雄甾-4-烯-3,17-二酮AD的菌株ST12-96,对其进行发酵优化显示在温度30℃、pH 7.0、160rpm的条件下培养48h达到对数生长期,将对数生长期的菌体以10%(V/V)的接种量接入发酵培养基,在30℃、pH 7.0、160rpm的条件下培养7d,对发酵产物进行定量检测,植物甾醇转化为AD的转化率达到了75.95%,产物AD含量达到8.41g/L,AD占到AD与ADD总和的95.02%。本发明首次将解淀粉芽孢杆菌用于AD的生物合成。

    胆固醇氧化酶基因和工程菌及应用

    公开(公告)号:CN102168098B

    公开(公告)日:2013-03-20

    申请号:CN201110024406.X

    申请日:2011-01-21

    摘要: 本发明提供了胆固醇氧化酶基因及其编码的胆固醇氧化酶,提供了含有其基因序列的表达载体和含有该表达载体的基因工程重组菌株,提供了制备该胆固醇氧化酶的方法。本发明提供的胆固醇氧化酶重组菌株可用于对3-羟基类甾体化合物进行3位羟基脱氢或甾醇代谢,还可用于降解甾醇的应用,从而解决了甾体医药工业中分枝杆菌和红球菌降解甾醇利用率低的问题。

    一种高产AD/ADD的菌株及高效生产AD/ADD的方法

    公开(公告)号:CN102586139A

    公开(公告)日:2012-07-18

    申请号:CN201210019481.1

    申请日:2012-01-20

    IPC分类号: C12N1/20 C12P33/02 C12R1/01

    摘要: 本发明属于微生物发酵领域,具体涉及一种利用高产菌株发酵生产AD和/或ADD的方法。本发明公开了一种能够高效转化甾醇类物质生产AD和/或ADD的分歧杆菌菌株,其分类命名为Mycobacterium.sp-BK-1,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号是CGMCC No.5707。本发明还公开了利用所述菌株转化甾醇生产AD和/或ADD的方法。本发明所述的菌株依靠现有微生物转化甾醇类物质生产AD和/或ADD的工艺可以将发酵培养基中浓度高达3.5%的甾醇类完全转化为AD和/或ADD,且转化率接近70-80%左右,从而在保证了单次转化率的基础上,加大了单次生产的数量。