大竹蛏丝氨酸蛋白酶抑制剂SgKunitz基因及其重组蛋白和应用

    公开(公告)号:CN102703458A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210204184.4

    申请日:2012-06-20

    摘要: 本发明是大竹蛏Kunitz型蛋白酶抑制剂基因SgKunitz的克隆和体外重组表达技术,本发明利用构建的大竹蛏cDNA文库,克隆得到了大竹蛏Kunitz型蛋白酶抑制剂基因SgKunitz的cDNA全长序列,该基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;利用原核重组表达技术表达了其编码蛋白,该重组蛋白对于胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性具有较强的抑制作用。该基因及其重组蛋白的研究对于进一步了解Kunitz型蛋白酶抑制剂基因在先天性免疫中发挥的功能,研制新的人类疾病防治药物和动物饲料添加剂具有重要的意义。

    一种在酵母中制备重组胱抑素C的方法

    公开(公告)号:CN102643824A

    公开(公告)日:2012-08-22

    申请号:CN201210104241.1

    申请日:2012-04-11

    IPC分类号: C12N15/15 C12N15/81 C07K14/81

    摘要: 本发明涉及一种在毕赤酵母中制备重组胱抑素C(CysC)的方法,包括以下步骤:1).提供编码胱抑素C的核苷酸序列;2).将上述核苷酸序列克隆到酵母表达载体中;3).将上述载体转化至同一酵母宿主;4).诱导上述酵母宿主表达C端带有组氨酸标签的胱抑素C;5).纯化上述胱抑素C该方法表达量高,表达产物无需经过变性和复性,即可得到有活性的胱抑素C,并且后续的纯化步骤也简单方便。制备的重组胱抑素C可用于检测肾功能的胱抑素C试剂盒。