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公开(公告)号：CN114540274B
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202210151336.2
申请日：2022-02-17
申请人： 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明提供一种无血清培养基及其制备方法和用其培养2BS细胞的方法。该无血清培养基包含水以及氨基酸、维生素、盐类、脂类、微量元素和其他添加成分。采用该无血清培养基培养2BS细胞，能突破2BS细胞传代极限、增加2BS细胞传代的代次。并且，发明人还发现，所得2BS细胞形态更好、生长密度更高、活率高。同时，本发明提供的无血清培养基配方成分明确，配方简单，低成本，低蛋白，易于配制，利于2BS细胞后续生产病毒的下游纯化，提高产品品质。本发明提供的无血清培养基，适用范围广，不仅适用于细胞工厂、微载体工艺上的无血清传代、扩增和放大，还可支持传统培养基中10％血清用量的2BS细胞在低血清或无血清条件下生产疫苗。
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公开(公告)号：CN114540274A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210151336.2
申请日：2022-02-17
申请人： 上海健士拜生物科技有限公司 , 澳斯康生物(南通)股份有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司 , 健顺生物科技(南通)有限公司
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明提供一种无血清培养基及其制备方法和用其培养2BS细胞的方法。该无血清培养基包含水以及氨基酸、维生素、盐类、脂类、微量元素和其他添加成分。采用该无血清培养基培养2BS细胞，能突破2BS细胞传代极限、增加2BS细胞传代的代次。并且，发明人还发现，所得2BS细胞形态更好、生长密度更高、活率高。同时，本发明提供的无血清培养基配方成分明确，配方简单，低成本，低蛋白，易于配制，利于2BS细胞后续生产病毒的下游纯化，提高产品品质。本发明提供的无血清培养基，适用范围广，不仅适用于细胞工厂、微载体工艺上的无血清传代、扩增和放大，还可支持传统培养基中10％血清用量的2BS细胞在低血清或无血清条件下生产疫苗。
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公开(公告)号：CN108635574A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810461794.X
申请日：2018-05-15
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC分类号： A61K39/145 , A61P31/16 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12N7/00
CPC分类号： A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12N7/00 , C12N2760/16134 , C12N2760/16151 , C12N2770/24034 , C12N2770/24051 , A61K2300/00
摘要： 本发明公开一种生产鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗的方法及其产品，该方法包括以下步骤：用EB66传代细胞分别接种鸭坦布苏、禽流感病毒株；在病毒ELD50或EID50效价达到最高时分别收获鸭坦布苏、禽流感病毒并保存；分别灭活鸭坦布苏、禽流感病毒；将灭活后的鸭坦布苏和禽流感病毒在吐温-80中完全混合，得到病毒混合液，在病毒混合液中加入已灭菌的油相佐剂，混合乳化，配制成鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗。本发明通过采用EB66传代细胞系分别进行鸭坦布苏和禽流感病毒的培养，然后制备成的鸭坦布苏、禽流感二联疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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公开(公告)号：CN108239625A
公开(公告)日：2018-07-03
申请号：CN201611209382.4
申请日：2016-12-23
申请人： 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC分类号： C12N7/00
CPC分类号： C12N7/00 , C12N2710/24134 , C12N2710/24151
摘要： 本发明涉及悬浮BHK21细胞相关疫苗生产的二阶培养工艺技术，本发明以悬浮BHK21细胞为宿主细胞，采用二阶培养接毒方式生产能在BHK21悬浮细胞上病变的病毒，即，在细胞密度生长到2X106/mL-20X106/mL时，用生产培养基稀释1-5倍，稀释后细胞密度在1X106/mL-10X106/mL之间，然后接毒，或在稀释之前接毒。本发明的生产工艺简单；不浪费培养基；不换液；生产培养基和生长培养基为相同或不同培养基，二者按比例混合，即可以达到细胞生长和病毒生产的作用。
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公开(公告)号：CN108570454A
公开(公告)日：2018-09-25
申请号：CN201711098901.9
申请日：2017-11-09
申请人： 甘肃健顺生物科技有限公司
CPC分类号： C12N7/00 , A61K39/12 , C12N2710/16034 , C12N2710/16051 , C12N2770/24334 , C12N2770/24351
摘要： 本发明涉及MDBK细胞驯化悬浮方法和二阶病毒生产工艺。具体而言，本发明涉及驯化贴壁MDBK细胞使其适应无血清悬浮培养，并以其作为宿主细胞，采用二阶培养接毒方式生产能在悬浮MDBK细胞上病变或有敏感性的病毒，即，细胞长至2.0～20.0×106细胞/mL时，用生产培养基稀释1～5倍，使密度在1.0～10.0×106细胞/mL之间，然后接毒，或在稀释之前接毒。本发明的悬浮MDBK细胞适应在无血清和化学成分确定的培养基中悬浮生长，其二阶病毒生产工艺简单，易放大；不换液，培养基利用效率高；生产和生长培养基可相同或不同，二者按照比例混合，即可使细胞二次生长并促进病毒表达。
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公开(公告)号：CN108570445A
公开(公告)日：2018-09-25
申请号：CN201711098900.4
申请日：2017-11-09
申请人： 甘肃健顺生物科技有限公司
CPC分类号： C12N5/0686 , C12N7/00
摘要： 本发明涉及PK15细胞驯化悬浮方法和二阶病毒生产工艺。具体而言，本发明涉及驯化PK15细胞使其适应无血清悬浮培养，并以其为宿主细胞，采用二阶培养接毒方式生产能在悬浮PK15细胞上病变或有敏感性的病毒，即，细胞长至2.0～20.0×106细胞/mL时，用生产培养基稀释1～5倍，使密度在1.0～10.0×106细胞/mL间，然后接毒，或在稀释前接毒。本发明的悬浮PK15细胞适应在无血清和化学成分确定的培养基中悬浮生长，其二阶病毒生产工艺简单，易放大，不换液，培养基利用率高；生产和生长培养基可相同或不同，二者按照比例混合，即可使细胞二次生长并促进病毒表达。
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公开(公告)号：CN108300704A
公开(公告)日：2018-07-20
申请号：CN201810129825.1
申请日：2018-02-08
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要： 本发明提供了一种用传代细胞系悬浮培养传染性支气管炎病毒的方法，包括：步骤1：取EB66细胞进行复苏与传代培养；步骤2：对步骤1所得EB66细胞进行鸡传染性支气管炎病毒的接种培养；步骤3：接毒后的EB66细胞每隔6-12h进行取样，测定病毒的EID50，在病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸡传染性支气管炎病毒。本发明采用EB66细胞作为鸡传染性支气管炎病毒的培养基质，利用提供用全悬浮传代细胞系EB66细胞进行高效的病毒生产，有效提高支气管炎病毒的培育滴度，从而为实现鸡传染性支气管炎病毒疫苗的大规模培养，降低病毒的培育成本。
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公开(公告)号：CN108239619A
公开(公告)日：2018-07-03
申请号：CN201611207062.5
申请日：2016-12-23
申请人： 甘肃健顺生物科技有限公司
CPC分类号： C12N5/0686 , C12N7/00 , C12N2710/10051 , C12N2720/12251 , C12N2750/14051 , C12N2760/16151
摘要： 本发明涉及悬浮MDCK细胞相关疫苗生产的二阶培养工艺技术。本发明以悬浮MDCK细胞作为宿主细胞，采用二阶培养接毒方式生产能在MDCK悬浮细胞上病变的病毒，即，在细胞密度生长到2×106/mL-20×106/mL时，用生产培养基稀释1-5倍，稀释后细胞密度在1×106/mL-10×106/mL之间，然后接毒，或在稀释之前接毒。本发明的生产工艺简单；不浪费培养基；不换液；生产培养基和生长培养基为相同或不同培养基，二者按比例混合，即可以达到细胞生长和病毒生长的作用。
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公开(公告)号：CN108220227A
公开(公告)日：2018-06-29
申请号：CN201711439182.2
申请日：2017-12-27
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要： 一种通过全悬浮传代细胞系悬浮培养新城疫病毒的方法，所述方法如下：取生长密度为8×106细胞/mL‑16×106细胞/mL的全悬浮EB66细胞系通过二阶培养法进行新城疫病毒的接种，接毒后继续培养，并每隔12h取样，以测定病毒的EID50，在病毒的滴度最高时收获病毒并保存，完成新城疫病毒的培养。本发明通过采用鸭胚胎干细胞EB66传代细胞系进行鸡新城疫病毒培养，有效提高所得到病毒的滴度及纯度，进而使生产出的疫苗具有较高品质，并降低生产成本。
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公开(公告)号：CN108300704B
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN201810129825.1
申请日：2018-02-08
申请人： 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
摘要： 本发明提供了一种用传代细胞系悬浮培养传染性支气管炎病毒的方法，包括：步骤1：取EB66细胞进行复苏与传代培养；步骤2：对步骤1所得EB66细胞进行鸡传染性支气管炎病毒的接种培养；步骤3：接毒后的EB66细胞每隔6‑12h进行取样，测定病毒的EID50，在病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸡传染性支气管炎病毒。本发明采用EB66细胞作为鸡传染性支气管炎病毒的培养基质，利用提供用全悬浮传代细胞系EB66细胞进行高效的病毒生产，有效提高支气管炎病毒的培育滴度，从而为实现鸡传染性支气管炎病毒疫苗的大规模培养，降低病毒的培育成本。
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