公开(公告)号：CN108315493A

公开(公告)日：2018-07-24

申请号：CN201810365523.4

申请日：2018-04-23

Applicant: 上海市农业科学院

Inventor： 陈志伟 ,  赵凯 ,  毛水花 ,  陆瑞菊 ,  刘成洪 ,  黄剑华 ,  宗迎杰 ,  张述伟 ,  杜亚楠 ,  范小瑞 ,  姜琪 ,  张琪 ,  张晓霞 ,  张皖静 ,  吴文静

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 一种用于检测大麦黄花叶病毒的LAMP引物组及检测方法，根据Genbank中查找到的BaYMV基因的CP序列进行引物设计，获得LAMP引物组，其包括外引物F3和B3，内引物FIP和BIP，该LAMP引物组特异性强，减少了非靶标序列的影响，可以识别目的序列上6个不同的区域，具有高度的选择性，灵敏度高，检测方法具有反应条件简单、操作简便快速、结果判定方便、准确等优点，可用于环介导逆转录等温扩增，通过添加显色剂用肉眼来直接观察检测结果，在保证实验结果准确性的同时，更加经济节约，高效，易于推广。

公开(公告)号：CN108359717A

公开(公告)日：2018-08-03

申请号：CN201810447842.X

申请日：2018-05-11

Applicant: 上海市农业科学院

Inventor： 赵凯 ,  范小瑞 ,  赵笑 ,  杜亚楠 ,  张琪 ,  张晓霞 ,  吴文静 ,  张皖静 ,  赵庆 ,  史斌 ,  赵桓震 ,  赵斌安 ,  潘磊

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/14 ,  C12N15/11

Abstract: 一种直扩RPA现场可视化检测方法，包括如下步骤：1)粗提待测样品基因组DNA；2)针对目的基因设计RPA特异性引物；3)将RPA特异性引物加入到RPA反应体系中进行RPA扩增反应，所述RPA反应体系中成分的终浓度为：外引物F 0.12-0.48μM，内引物R 0.12-0.48μM，dNTPs1.4-1.8mM，MgOAc 8.4-14mM，模板DNA 1～2μL；反应程序：32-42℃，5-10min；4)鉴定扩增结果：向扩增产物中加入SYBR Green I染料，直接在日光灯或者阳光下观察颜色变化：显色为绿色的样品为阳性；显色为橘色的样品为阴性。本发明可应用于来源于动物、植物、微生物的所有基因进行RPA检测，对RPA扩增产物实现了快速、简便、可视化鉴定。