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公开(公告)号：CN107164566B
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN201710590225.0
申请日：2017-07-19
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 一种检测百合斑驳病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，根据Genbank中查找到LMoV的CP序列进行引物设计，该LAMP引物组包括内引物FIP和BIP，外引物F3和B3，该LAMP引物组特异性强，与常见侵染百合的7种病毒无交叉，灵敏度高，可在模板纯度只有101拷贝数下进行扩增，建立的百合斑驳病毒的LAMP诊断方法，具有反应条件简单、操作简便快速、结果判定方便、准确等优点，可用于环介导逆转录等温扩增，直接检验百合样品总RNA，减少实验假阴性或假阳性实验结果发生，在保证实验结果准确性的同时，更加经济节约，高效，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN107723346A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201711210493.1
申请日：2017-11-28
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/686 , C12Q1/6895 , C12N15/11
CPC分类号： C12Q1/686 , C12Q1/6895 , C12Q2537/143 , C12Q2563/159 , C12Q2565/125
摘要： 一种用于转基因玉米多重检测的微滴PCR偶联DGGE分析方法，首先，针对待测样品分别设计PCR特异性引物对，进行微滴PCR扩增，扩增产物经纯化后进行DGGE电泳，并进行SYBRGreen染色，在紫外光下显影观察，来检测转基因玉米基因组的多重DNA分子。该方法可以实现高通量分析多个DNA目标核酸分子，且灵敏度高，内标基因的稳定性也很好。因此，本发明利用微滴PCR偶联DGGE技术实现了生物基因定性、高通量检测。
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公开(公告)号：CN106011314A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610613054.4
申请日：2016-07-29
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2545/113 , C12Q2563/107
摘要： 一种用于检测猪细小病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，该LAMP引物组序列分别为引物F3：5’‑ACGGAGGTAAAATTGGACA‑3’；引物B3：5’‑TCCCTTTAGCTTTTTTTTTAGC‑3’；FIP：5’‑GAGATGTAGTTGGTGAGTCTGTTTTTTTTTCTTCAGAGCAAAGCGTG‑3’；引物BIP：5’‑CAACCAGAGGTAAGAAGATCGCTTTTAAAAATATGTCTTGGAGCAGGT‑3’。本发明还提供了含有上述引物组的检测试剂盒及检测方法，通过向LAMP反应产物中加入荧光染料后的颜色变化来判断被测样品是否含有PPV，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN106011314B
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201610613054.4
申请日：2016-07-29
申请人： 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
摘要： 一种用于检测猪细小病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，该LAMP引物组序列分别为引物F3：5’‑ACGGAGGTAAAATTGGACA‑3’；引物B3：5’‑TCCCTTTAGCTTTTTTTTTAGC‑3’；FIP：5’‑GAGATGTAGTTGGTGAGTCTGTTTTTTTTTCTTCAGAGCAAAGCGTG‑3’；引物BIP：5’‑CAACCAGAGGTAAGAAGATCGCTTTTAAAAATATGTCTTGGAGCAGGT‑3’。本发明还提供了含有上述引物组的检测试剂盒及检测方法，通过向LAMP反应产物中加入荧光染料后的颜色变化来判断被测样品是否含有PPV，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN107304454A
公开(公告)日：2017-10-31
申请号：CN201610259975.5
申请日：2016-04-25
申请人： 上海市农业科学院 , 上海佳牧生物制品有限公司
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
摘要： 本发明公开了一种猪圆环病毒2型的LAMP可视化快速检测试剂盒，还公开了用于检测猪圆环病毒2型的LAMP引物及其检测方法，根据猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列，设计合成3对引物，通过对LAMP条件的优化建立了PCV2的LAMP诊断方法，为猪圆环病毒2型的现场快速诊断提供了一种简便快速的方法，并依据该方法研制成PCV2的LAMP可视化快速检测试剂盒，该试剂盒的操作简单，并直接通过颜色变化进行结果判定，实现了可视化，反应结果易判定，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN107177700A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201710590061.1
申请日：2017-07-19
申请人： 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
摘要： 一种检测黄瓜花叶病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，根据Genbank中查找到CMV的CP序列进行引物设计，该LAMP引物组包括外引物F3和B3，内引物FIP和BIP，该LAMP引物组特异性强，与常见侵染百合的7种病毒无交叉，灵敏度高，可在模板纯度只有101拷贝数下进行扩增，建立的黄瓜花叶病毒的LAMP诊断方法，具有反应条件简单、操作简便快速、结果判定方便、准确等优点，可用于环介导逆转录等温扩增，直接检验百合样品总RNA，减少实验假阴性或假阳性实验结果发生，在保证实验结果准确性的同时，更加经济节约，高效，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN107164566A
公开(公告)日：2017-09-15
申请号：CN201710590225.0
申请日：2017-07-19
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 一种检测百合斑驳病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，根据Genbank中查找到LMoV的CP序列进行引物设计，该LAMP引物组包括内引物FIP和BIP，外引物F3和B3，该LAMP引物组特异性强，与常见侵染百合的7种病毒无交叉，灵敏度高，可在模板纯度只有101拷贝数下进行扩增，建立的百合斑驳病毒的LAMP诊断方法，具有反应条件简单、操作简便快速、结果判定方便、准确等优点，可用于环介导逆转录等温扩增，直接检验百合样品总RNA，减少实验假阴性或假阳性实验结果发生，在保证实验结果准确性的同时，更加经济节约，高效，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN108359717A
公开(公告)日：2018-08-03
申请号：CN201810447842.X
申请日：2018-05-11
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/6844 , C12Q1/6895 , C12Q1/689 , C12Q1/14 , C12N15/11
摘要： 一种直扩RPA现场可视化检测方法，包括如下步骤：1)粗提待测样品基因组DNA；2)针对目的基因设计RPA特异性引物；3)将RPA特异性引物加入到RPA反应体系中进行RPA扩增反应，所述RPA反应体系中成分的终浓度为：外引物F 0.12-0.48μM，内引物R 0.12-0.48μM，dNTPs1.4-1.8mM，MgOAc 8.4-14mM，模板DNA 1～2μL；反应程序：32-42℃，5-10min；4)鉴定扩增结果：向扩增产物中加入SYBR Green I染料，直接在日光灯或者阳光下观察颜色变化：显色为绿色的样品为阳性；显色为橘色的样品为阴性。本发明可应用于来源于动物、植物、微生物的所有基因进行RPA检测，对RPA扩增产物实现了快速、简便、可视化鉴定。
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公开(公告)号：CN107236826A
公开(公告)日：2017-10-10
申请号：CN201710590207.2
申请日：2017-07-19
申请人： 上海市农业科学院
CPC分类号： C12Q1/701
摘要： 一种检测百合无症病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法，根据Genbank中查找到LSV的CP序列进行引物设计，该LAMP引物组包括外引物F3和B3，内引物FIP和BIP，该LAMP引物组特异性强，与常见侵染百合的7种病毒无交叉，灵敏度高，可在模板纯度只有101拷贝数下进行扩增，建立的百合无症病毒的LAMP诊断方法，具有反应条件简单、操作简便快速、结果判定方便、准确等优点，可用于环介导逆转录等温扩增，直接检验百合样品总RNA，减少实验假阴性或假阳性实验结果发生，在保证实验结果准确性的同时，更加经济节约，高效，非常易于临床推广。
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公开(公告)号：CN103966333A
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201410215717.8
申请日：2014-05-20
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/686 , C12Q2537/143 , C12Q2563/159 , C12Q2565/125
摘要： 本发明公开了一种多重微滴聚合酶链式反应的生物基因高通量定性检测方法，建立了一种改进的微滴PCR高通量的扩增技术，对该技术在实验仪器、实验方法和试剂方面进行了改进，优化了实验步骤，减少了一些实验环节，对试验中需要的仪器进行了国产化，使该方法更容易进行，大大减少了人力、物力和财力的需求，使得微滴PCR技术可为一般实验技术人员掌握，可在国内大多数生物实验室开展。实验结果清晰可靠，本发明方法可实现对大量目标DNA分子同时进行高通量的扩增来达到高通量定性检测的目的。
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