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公开(公告)号:CN106011314B
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201610613054.4
申请日:2016-07-29
Applicant: 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 一种用于检测猪细小病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法,该LAMP引物组序列分别为引物F3:5’‑ACGGAGGTAAAATTGGACA‑3’;引物B3:5’‑TCCCTTTAGCTTTTTTTTTAGC‑3’;FIP:5’‑GAGATGTAGTTGGTGAGTCTGTTTTTTTTTCTTCAGAGCAAAGCGTG‑3’;引物BIP:5’‑CAACCAGAGGTAAGAAGATCGCTTTTAAAAATATGTCTTGGAGCAGGT‑3’。本发明还提供了含有上述引物组的检测试剂盒及检测方法,通过向LAMP反应产物中加入荧光染料后的颜色变化来判断被测样品是否含有PPV,实现了可视化,反应结果易判定,非常易于临床推广。
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公开(公告)号:CN107304454A
公开(公告)日:2017-10-31
申请号:CN201610259975.5
申请日:2016-04-25
Applicant: 上海市农业科学院 , 上海佳牧生物制品有限公司
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型的LAMP可视化快速检测试剂盒,还公开了用于检测猪圆环病毒2型的LAMP引物及其检测方法,根据猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因序列,设计合成3对引物,通过对LAMP条件的优化建立了PCV2的LAMP诊断方法,为猪圆环病毒2型的现场快速诊断提供了一种简便快速的方法,并依据该方法研制成PCV2的LAMP可视化快速检测试剂盒,该试剂盒的操作简单,并直接通过颜色变化进行结果判定,实现了可视化,反应结果易判定,非常易于临床推广。
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公开(公告)号:CN107177700A
公开(公告)日:2017-09-19
申请号:CN201710590061.1
申请日:2017-07-19
Applicant: 上海市农业科学院
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 一种检测黄瓜花叶病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法,根据Genbank中查找到CMV的CP序列进行引物设计,该LAMP引物组包括外引物F3和B3,内引物FIP和BIP,该LAMP引物组特异性强,与常见侵染百合的7种病毒无交叉,灵敏度高,可在模板纯度只有101拷贝数下进行扩增,建立的黄瓜花叶病毒的LAMP诊断方法,具有反应条件简单、操作简便快速、结果判定方便、准确等优点,可用于环介导逆转录等温扩增,直接检验百合样品总RNA,减少实验假阴性或假阳性实验结果发生,在保证实验结果准确性的同时,更加经济节约,高效,非常易于临床推广。
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公开(公告)号:CN107164566A
公开(公告)日:2017-09-15
申请号:CN201710590225.0
申请日:2017-07-19
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 一种检测百合斑驳病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法,根据Genbank中查找到LMoV的CP序列进行引物设计,该LAMP引物组包括内引物FIP和BIP,外引物F3和B3,该LAMP引物组特异性强,与常见侵染百合的7种病毒无交叉,灵敏度高,可在模板纯度只有101拷贝数下进行扩增,建立的百合斑驳病毒的LAMP诊断方法,具有反应条件简单、操作简便快速、结果判定方便、准确等优点,可用于环介导逆转录等温扩增,直接检验百合样品总RNA,减少实验假阴性或假阳性实验结果发生,在保证实验结果准确性的同时,更加经济节约,高效,非常易于临床推广。
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公开(公告)号:CN107164566B
公开(公告)日:2020-09-29
申请号:CN201710590225.0
申请日:2017-07-19
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 一种检测百合斑驳病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法,根据Genbank中查找到LMoV的CP序列进行引物设计,该LAMP引物组包括内引物FIP和BIP,外引物F3和B3,该LAMP引物组特异性强,与常见侵染百合的7种病毒无交叉,灵敏度高,可在模板纯度只有101拷贝数下进行扩增,建立的百合斑驳病毒的LAMP诊断方法,具有反应条件简单、操作简便快速、结果判定方便、准确等优点,可用于环介导逆转录等温扩增,直接检验百合样品总RNA,减少实验假阴性或假阳性实验结果发生,在保证实验结果准确性的同时,更加经济节约,高效,非常易于临床推广。
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公开(公告)号:CN107723346A
公开(公告)日:2018-02-23
申请号:CN201711210493.1
申请日:2017-11-28
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C12Q1/686 , C12Q1/6895 , C12N15/11
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q1/6895 , C12Q2537/143 , C12Q2563/159 , C12Q2565/125
Abstract: 一种用于转基因玉米多重检测的微滴PCR偶联DGGE分析方法,首先,针对待测样品分别设计PCR特异性引物对,进行微滴PCR扩增,扩增产物经纯化后进行DGGE电泳,并进行SYBRGreen染色,在紫外光下显影观察,来检测转基因玉米基因组的多重DNA分子。该方法可以实现高通量分析多个DNA目标核酸分子,且灵敏度高,内标基因的稳定性也很好。因此,本发明利用微滴PCR偶联DGGE技术实现了生物基因定性、高通量检测。
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公开(公告)号:CN106011314A
公开(公告)日:2016-10-12
申请号:CN201610613054.4
申请日:2016-07-29
Applicant: 上海佳牧生物制品有限公司 , 上海市农业科学院
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2545/113 , C12Q2563/107
Abstract: 一种用于检测猪细小病毒的LAMP引物组、试剂盒及检测方法,该LAMP引物组序列分别为引物F3:5’‑ACGGAGGTAAAATTGGACA‑3’;引物B3:5’‑TCCCTTTAGCTTTTTTTTTAGC‑3’;FIP:5’‑GAGATGTAGTTGGTGAGTCTGTTTTTTTTTCTTCAGAGCAAAGCGTG‑3’;引物BIP:5’‑CAACCAGAGGTAAGAAGATCGCTTTTAAAAATATGTCTTGGAGCAGGT‑3’。本发明还提供了含有上述引物组的检测试剂盒及检测方法,通过向LAMP反应产物中加入荧光染料后的颜色变化来判断被测样品是否含有PPV,实现了可视化,反应结果易判定,非常易于临床推广。
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公开(公告)号:CN114015808A
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202111401011.7
申请日:2021-11-24
Applicant: 上海市农业科学院 , 上海佳牧生物制品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 一种猪圆环病毒2型的荧光定量PCR检测方法及试剂盒,对猪圆环病毒2型即PCV2的ORF2基因设计了相应的特异性引物和探针,与PCV1、CSFV、PRRSV、PRV不发生交叉反应,检测极限和定量极限分别为10和100拷贝数。本发明的试剂盒灵敏度高,特异性强,稳定性好,循环阈值(Ct)与标准DNA模板在102~106拷贝/μL浓度范围内具有极好的线性关系,相关系数为1;重复性好,批内实验中Ct值的变异系数在0.59%到1.05%之间,批间实验的Ct值变异系数为1.9%到4.2%,为猪圆环病毒Ⅱ型的检测和流行病学的调查提供了一种简便快速的诊断方法。
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公开(公告)号:CN103757115B
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201410022452.X
申请日:2014-01-17
Applicant: 上海市农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种基于多重微滴PCR偶联荧光分光光度法的生物基因定性、定量、高通量检测方法。首先,设计特异性引物并对其选择性地进行不同荧光基团标记,随后应用上述荧光标记的特异性引物进行微滴PCR扩增,扩增产物经纯化后,用荧光分光光度计或酶标仪来测量纯化后的PCR产物中各个发射波长和荧光值含量,达到自动检测的目的,可同时进行定性、定量和高通量检测。本发明方法可实现对大量目标DNA分子同时进行高通量的扩增和定性、定量和高通量检测。
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公开(公告)号:CN103966333A
公开(公告)日:2014-08-06
申请号:CN201410215717.8
申请日:2014-05-20
Applicant: 上海市农业科学院
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2537/143 , C12Q2563/159 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明公开了一种多重微滴聚合酶链式反应的生物基因高通量定性检测方法,建立了一种改进的微滴PCR高通量的扩增技术,对该技术在实验仪器、实验方法和试剂方面进行了改进,优化了实验步骤,减少了一些实验环节,对试验中需要的仪器进行了国产化,使该方法更容易进行,大大减少了人力、物力和财力的需求,使得微滴PCR技术可为一般实验技术人员掌握,可在国内大多数生物实验室开展。实验结果清晰可靠,本发明方法可实现对大量目标DNA分子同时进行高通量的扩增来达到高通量定性检测的目的。
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