泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶的表达纯化方法

    公开(公告)号:CN110205313A

    公开(公告)日:2019-09-06

    申请号:CN201910479903.5

    申请日:2019-06-04

    摘要: 本发明公开了泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶的表达纯化方法。本发明提供了一种生产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的方法,包括将泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶编码基因导入受体酵母;将重组酵母于BSM培养基培养,待甘油消耗完全进行甘油补料发酵阶段、甲醇补料诱导表达阶段和混合补料诱导表达阶段。本发明工程菌经高密度发酵,发酵液酶活可达159500U/mL(蛋白含量31.7mg/mL)。所产β-1,3-1,4-葡聚糖酶最适pH5.0,在pH 2.0-9.0保持稳定;最适温度55℃,在60℃以下保持高酶活力;底物特异性专一。本发明在食品、饲料等行业具有应用价值。

    泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶的表达纯化方法

    公开(公告)号:CN110205313B

    公开(公告)日:2021-10-15

    申请号:CN201910479903.5

    申请日:2019-06-04

    摘要: 本发明公开了泡盛曲霉β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶的表达纯化方法。本发明提供了一种生产β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶的方法,包括将泡盛曲霉β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶编码基因导入受体酵母;将重组酵母于BSM培养基培养,待甘油消耗完全进行甘油补料发酵阶段、甲醇补料诱导表达阶段和混合补料诱导表达阶段。本发明工程菌经高密度发酵,发酵液酶活可达159500U/mL(蛋白含量31.7mg/mL)。所产β‑1,3‑1,4‑葡聚糖酶最适pH5.0,在pH 2.0‑9.0保持稳定;最适温度55℃,在60℃以下保持高酶活力;底物特异性专一。本发明在食品、饲料等行业具有应用价值。

    一种β-甘露聚糖酶mRmMan5A及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN105821020A

    公开(公告)日:2016-08-03

    申请号:CN201610324502.9

    申请日:2016-05-17

    摘要: 本发明涉及一种β?甘露聚糖酶mRmMan5A及其编码基因与应用。本发明所述的β?甘露聚糖酶mRmMan5A,与原始β?甘露聚糖酶RmMan5A相比具有以下优点:最适pH低,为4.5,最适温度高,为65℃。与以前所报道的β?甘露聚糖酶相比,在食品、饲料等行业中具有更大的应用价值。将该蛋白的编码基因导入毕赤酵母中构成的工程菌发酵液的β?甘露聚糖酶的酶活力可达72626U/mL(蛋白含量为9.1mg/mL),实现了高效表达。将该β?甘露聚糖酶用于水解汽爆处理后的棕榈粕,水解液中主要为聚合度为2?4之间的甘露寡糖,甘露寡糖得率为19.6%,甘露聚糖转化率约为60%。

    一种β-甘露聚糖酶mRmMan5A及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN105821020B

    公开(公告)日:2019-08-27

    申请号:CN201610324502.9

    申请日:2016-05-17

    摘要: 本发明涉及一种β‑甘露聚糖酶mRmMan5A及其编码基因与应用。本发明所述的β‑甘露聚糖酶mRmMan5A,与原始β‑甘露聚糖酶RmMan5A相比具有以下优点:最适pH低,为4.5,最适温度高,为65℃。与以前所报道的β‑甘露聚糖酶相比,在食品、饲料等行业中具有更大的应用价值。将该蛋白的编码基因导入毕赤酵母中构成的工程菌发酵液的β‑甘露聚糖酶的酶活力可达72626U/mL(蛋白含量为9.1mg/mL),实现了高效表达。将该β‑甘露聚糖酶用于水解汽爆处理后的棕榈粕,水解液中主要为聚合度为2‑4之间的甘露寡糖,甘露寡糖得率为19.6%,甘露聚糖转化率约为60%。