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公开(公告)号：CN117264026A
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202311025635.2
申请日：2023-08-15
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K14/09 , C12N15/42 , A61K39/135 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒VP1蛋白T细胞表位多肽及其应用，为以下任一或多个表位多肽，所述表位多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑3的所示；或将SEQ ID NO.1‑3的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加由SEQ ID NO.1‑3衍生的且保持SEQ ID NO.1‑3所示的蛋白功能的氨基酸序列。本发明通过设计O型口蹄疫病毒的重叠肽段，利用酶联免疫斑点技术检测，筛选出功能性T细胞抗原表位多肽，利用IFN‑γ胞内细胞因子染色，进一步筛选确认能够有效诱导T淋巴细胞分泌IFN‑γ的肽段，可用于制备O型口蹄疫病毒多表位疫苗。
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公开(公告)号：CN118755721A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202410809804.X
申请日：2024-06-21
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12R1/91
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，特别是涉及一种敲除人源Profilin基因的sgRNA、重组表达载体和构建方法。所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明可用于Profilin基因的定向敲除，具有简便、高效、快速、低成本等特点，对于Profilin基因功能和相关通路的研究具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117264026B
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202311025635.2
申请日：2023-08-15
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K14/09 , C12N15/42 , A61K39/135 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒VP1蛋白T细胞表位多肽及其应用，为以下任一或多个表位多肽，所述表位多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑3的所示；或将SEQ ID NO.1‑3的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加由SEQ ID NO.1‑3衍生的且保持SEQ ID NO.1‑3所示的蛋白功能的氨基酸序列。本发明通过设计O型口蹄疫病毒的重叠肽段，利用酶联免疫斑点技术检测，筛选出功能性T细胞抗原表位多肽，利用IFN‑γ胞内细胞因子染色，进一步筛选确认能够有效诱导T淋巴细胞分泌IFN‑γ的肽段，可用于制备O型口蹄疫病毒多表位疫苗。
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公开(公告)号：CN117304271A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311262920.6
申请日：2023-09-27
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K7/08 , C12N15/12 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒VP2蛋白T细胞表位多肽及其应用，为以下任一或多个表位多肽，所述表位多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑2的所示；或将SEQ ID NO.1‑2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加由SEQ ID NO.1‑2衍生的且保持SEQ ID NO.1‑2所示的蛋白功能的氨基酸序列。本发明通过设计O型口蹄疫病毒VP2蛋白的重叠肽段，利用酶联免疫斑点技术检测，筛选出功能性T细胞抗原表位多肽，并利用磁珠分选手段，分别纯化CD4+与CD8+T细胞，进一步检测筛选出的功能性T细胞抗原表位多肽所激活的T细胞类型，可用于制备O型口蹄疫病毒多表位疫苗。
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公开(公告)号：CN116439195A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310224922.X
申请日：2023-03-09
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： A01K67/02
摘要： 本发明公开了一种口蹄疫病毒小鼠感染模型的构建方法及其应用，本模型通过对I型干扰素受体缺失的C57/BL6小鼠腹部进行皮下注射的方式感染口蹄疫病毒；采用本发明方法建立的FMDV感染小鼠模型，攻毒后实验小鼠临床症状明显、典型、可重复性高，可用于FMDV致病机制和免疫机理研究，以及抗病毒药物和疫苗的研发，完善FMDV防控体系。
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公开(公告)号：CN118652890A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202410768857.1
申请日：2024-06-14
IPC分类号： C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/85 , C12N5/071 , C12R1/91
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，涉及一种敲除猪ARP2基因的sgRNA和ARP2基因敲除细胞系的构建方法。合成针对ARP2基因的带有酶切位点的向导RNA及其互补序列，利用碱基互补配对原则将sgRNA及其互补序列连接为双链片段，通过分子克隆重组技术构建重组CRISPR/Cas9质粒，转染到猪肺上皮细胞(Porcine pulmonary epithelial cell)中，验证sgRNA活性，再通过嘌呤霉素药物筛选阳性单细胞克隆株，提取单细胞克隆株的DNA和蛋白质，进行ARP2基因测序及蛋白表达检测，最后获得ARP2基因敲除的PPE细胞系。具有简便、高效、快速、低成本等特点。
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公开(公告)号：CN118620897A
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410886376.0
申请日：2024-07-03
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，特别是涉及一种敲除猪Cofilin基因的sgRNA及其应用。所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明可用于Cofilin基因的定向敲除，具有简便、高效、快速、低成本等特点，对于Cofilin基因功能和相关通路的研究具有重要意义。
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公开(公告)号：CN118581151A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410675517.4
申请日：2024-05-29
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N5/10
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种猪BECN1基因敲除细胞的构建方法及其应用。首先设计合成针对BECN1基因的带有酶切位点的向导RNA及其互补序列，利用碱基互补配对原则将sgRNA及其互补序列连接为双链sgRNA片段，通过分子克隆重组技术构建重组CRISPR/Cas9质粒，将重组质粒转染到猪肺上皮细胞中，设计sgRNA验证引物验证sgRNA活性，再通过嘌呤霉素药物筛选阳性单克隆细胞株，提取单克隆细胞株的DNA和蛋白质，进行BECN1基因测序及蛋白表达检测，最后获得BECN1基因敲除的PPE细胞。本方法简便高效，构建的敲除细胞系可广泛应用于BECN1基因功能和相关通路研究。
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公开(公告)号：CN117304271B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202311262920.6
申请日：2023-09-27
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K7/08 , C12N15/12 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒VP2蛋白T细胞表位多肽及其应用，为以下任一或多个表位多肽，所述表位多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑2的所示；或将SEQ ID NO.1‑2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加由SEQ ID NO.1‑2衍生的且保持SEQ ID NO.1‑2所示的蛋白功能的氨基酸序列。本发明通过设计O型口蹄疫病毒VP2蛋白的重叠肽段，利用酶联免疫斑点技术检测，筛选出功能性T细胞抗原表位多肽，并利用磁珠分选手段，分别纯化CD4+与CD8+T细胞，进一步检测筛选出的功能性T细胞抗原表位多肽所激活的T细胞类型，可用于制备O型口蹄疫病毒多表位疫苗。
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公开(公告)号：CN117304277B
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311248353.9
申请日：2023-09-26
申请人： 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC分类号： C07K14/09 , C12N15/42 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569
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