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公开(公告)号:CN117625551A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202311591386.3
申请日:2023-11-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程学和免疫学技术领域,具体涉及一种能够表达口蹄疫病毒颗粒样的细胞池构建与应用。本发明通过构建含有口蹄疫病毒的重组质粒,并进一步转染至宿主细胞之后筛选得到了一种稳健表达口蹄疫病毒样颗粒的重组多克隆细胞池,为进一步防范口蹄疫病毒,以及制备口蹄疫病毒疫苗提供新策略。本发明获得的重组中国卵巢细胞池不仅稳健表达口蹄疫病毒样颗粒,而且通过该重组中国卵巢细胞池制备的口蹄疫病毒样颗粒具有良好的免疫原性。
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公开(公告)号:CN117186192A
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202311180688.1
申请日:2023-09-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K16/10 , C12N15/42 , C12N15/13 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于兽医生物制品领域,具体的涉及动物疾病预防,更具体涉及口蹄疫病毒保守免疫抗原优势表位的筛选。本发明公开了一种口蹄疫病毒的T细胞抗原表位多肽。本发明筛选出的口蹄疫病毒两种保守的非结构蛋白2C、2B的T的抗原表位多肽,能激活很强的细胞免疫应答,且免疫效果良好,产生了更好的中和性抗体以及产生了完全的保护。
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公开(公告)号:CN116769831A
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202310453994.1
申请日:2023-04-25
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/42 , C07K14/09 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及生物医学领域,具体涉及一种针对口蹄疫病毒样颗粒的转座‑诱导表达系统,所述系统包括编码转座酶、反向反式激活因子、诱导剂、口蹄疫病毒样颗粒的核酸,所述转座酶可以是编码PiggyBac(PB)的转座酶及其变体,所述反向反式激活因子为可以是反向反式激活因子本身及其变体,所述诱导剂为四环素及其衍生物,所述口蹄疫病毒样颗粒的核酸为优化后的序列P12A3Copti,如SEQ ID NO:3所示。本发明经过构建PB转座‑四环素诱导表达系统,并将优化后的P12A3Copti在该系统表达,提高了P12A和3C基因稳定整合至细胞基因组的成功率,同时FMDV衣壳蛋白的表达量增加了15‑30倍。
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公开(公告)号:CN119552821A
公开(公告)日:2025-03-04
申请号:CN202411690015.5
申请日:2024-11-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C07K14/09 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫假病毒细胞培养系统及其应用。本发明属于生物技术领域。本发明提供的一种细胞培养系统,可用于生产具有转录和复制能力的口蹄疫假病毒(FMDV‑trVLPs),但其不具有活病毒的感染性。该系统由Nluc替换了FMDV衣壳蛋白基因(P1)的亚基因组复制子(FMDV‑Nluc)和稳定整合FMDV P12A3C基因的BHK‑21细胞系(BHK‑P1)组成。当FMDV‑Nluc复制子转染进BHK‑P1细胞后,可生产出口蹄疫假病毒FMDV‑trVLPs,并能在BHK‑P1细胞内增殖和传代,有效实现生物安全降级,在降低生物安全风险、模拟FMDV活病毒研究方面具有巨大潜力与实用价值。
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公开(公告)号:CN118130791A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202311781532.9
申请日:2023-12-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/531 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种A型口蹄疫疫苗抗原定量检测ELISA试剂盒、检测方法及其应用。所述的试剂盒中含有A型口蹄疫病毒的特异性抗体Ab3,其氨基酸序列为SEQ ID No.1所示。所述的抗原包括A型口蹄疫病毒146S抗原以及口蹄疫病毒样颗粒。此外,本发明还建立了一种定量检测A型口蹄疫疫苗中抗原含量的方法,该方法是以A型口蹄疫病毒的特异性抗体Ab3为包被抗体,生物素化标记的Ab3抗体为检测抗体,HRP标记的链霉亲和素作为酶标二抗,同时使用A型口蹄疫病毒灭活146S抗原标准品制作标准曲线,建立的双抗体夹心ELISA方法,该方法具有较高的特异性和重复性,且相比较传统蔗糖密度梯度离心法,操作更简易,不需要大型仪器设备,更适合临床推广。
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公开(公告)号:CN117990904A
公开(公告)日:2024-05-07
申请号:CN202410166120.2
申请日:2024-02-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/536 , G01N33/532 , C07K16/10
Abstract: 本发明公开了一种用于A型口蹄疫病毒中和抗体检测的液相阻断ELISA试剂盒及其应用。所述的液相阻断ELISA试剂盒中包含A型口蹄疫病毒中和抗体Ab1、A型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)抗原以及生物素标记的Ab1抗体,其中,所述的A型口蹄疫病毒中和抗体Ab1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明基于自主研发制备的A型口蹄疫病毒中和抗体Ab1抗体和A型口蹄疫病毒VLPs,研发出一种敏感性和特异性均较好,可以检测A型口蹄疫病毒中和抗体,且价格低廉的国产A型口蹄疫病毒中和抗体检测试剂盒,能够方便的用于评价疫苗诱导的抗体是否具有保护作用,其检测结果与传统VNT方法检测结果具有很高的符合率(95.3%)。
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公开(公告)号:CN117388491A
公开(公告)日:2024-01-12
申请号:CN202311263433.1
申请日:2023-09-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , C07K16/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及兽用诊断技术领域,具体的公开了一种猪塞内卡病毒中和抗体液相阻断ELISA试剂盒,所述试剂盒含猪塞内卡病毒单域抗体以及配套的检测试剂,所述猪塞内卡病毒单域抗体还可以是单域抗体的抗原结合片段,所述单域抗体选自52组中的一组或多组,所述每组单域抗体或抗原结合片段的重链可变区包含CDR‑1、CDR‑2和CDR‑3,所述52组单域抗体或抗原结合片段的重链可变区CDR‑1(VH‑CDR‑1)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.52所示,重链可变区CDR‑2(VH‑CDR‑2)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.53~SEQ ID NO.104所示,重链可变区CDR‑3(VH‑CDR‑3)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.105~SEQ ID NO.156所示。本发明的试剂盒可对血清中的SVA中和抗体水平进行快速检测,其敏感性高、特异性好、结果稳定,可更好地应用于SVA疫苗效力评价。
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公开(公告)号:CN117964778A
公开(公告)日:2024-05-03
申请号:CN202410066560.0
申请日:2024-01-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N9/88 , C12N15/81 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , A61K39/12 , A61K39/385 , A61P31/20 , C07K16/08 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)P14.5蛋白纳米颗粒及其制备方法和应用。所述蛋白纳米颗粒由蛋白质单体自组装形成,所述蛋白质单体由非洲猪瘟病毒P14.5蛋白和骨架蛋白通过连接肽连接后得到。所述骨架蛋白为mi3,其编码核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示,所述P14.5蛋白的编码核苷酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明利用蛋白骨架的自组装特性以及N端的可修饰性,将ASFV P14.5结构蛋白展示在蛋白骨架的外表面,获得了具有较高免疫效力及较高稳定性的非洲猪瘟纳米颗粒抗原,可用于制备抗ASFV特异性抗体或预防或治疗由ASFV感染引起的疾病的药物。本发明的提出为非洲猪瘟病毒的防控提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN117815376A
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202311817155.X
申请日:2023-12-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/135 , C12N5/0784 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫DC疫苗、制备方法及其应用。本发明通过在体外使用FMDV灭活抗原刺激源自猪血液PBMC制备的DC,并在不同激动剂和细胞因子诱导下得到成熟DC,制备出具有增强交叉递呈作用的DC疫苗,回输给猪后刺激适应性免疫应答激活,可以产生细胞毒性T细胞并增强中和抗体的产生。攻毒保护试验发现,该DC疫苗可以产生完全的保护性应答,而且没有病毒血症的产生。因此,本发明为猪口蹄疫的预防提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN115057941A
公开(公告)日:2022-09-16
申请号:CN202210501097.9
申请日:2022-05-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C07K14/09 , C07K14/00 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61K39/295 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒的制备方法及应用。本发明的AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒由A型及O型口蹄疫病毒的表位串联两种骨架蛋白组成。本发明通过选择A型及O型口蹄疫病毒结构蛋白及非机构蛋白的T细胞表位及B细胞表位,串联至骨架蛋白A上,再选择具有免疫增强效果的多个肽段串联至骨架蛋白B上,之后将优化后的两个蛋白的基因序列插入到原核载体中,通过原核系统表达、纯化、自组装后得到所述的AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒。本发明的AO双价口蹄疫病毒表位嵌合纳米颗粒可用于制备预防A型及O型口蹄疫病毒引起的疾病的疫苗。此外,本发明中的纳米颗粒骨架还可用于串联其他病毒的表位制备相关疫苗。
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