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公开(公告)号：CN103882027B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201410085411.5
申请日：2014-03-10
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种在胰腺组织中特异性表达hDAP基因和DDIT3基因的载体及其应用。本发明提供的DNA分子包括启动子、hDAP基因和DDIT3基因，由所述启动子启动所述hDAP基因和所述DDIT3基因的表达；所述启动子如序列表的序列5自5’末端第21-1505位核苷酸所示；所述hDAP基因编码序列表的序列7所示的蛋白质；所述DDIT3基因编码序列表的序列9所示的蛋白质。本发明通过胰腺特异启动子启动hDAP基因和DDIT3基因的表达且使其与胰岛素表达的时空特异性保持一致，引起小鼠胰岛β细胞启动凋亡应激相关通路，进而使胰岛β细胞数量减少，导致胰岛素分泌绝对不足、糖耐量低减，最终很可能出现小鼠空腹血糖持续走高，发生糖尿病，达到建模目的。
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公开(公告)号：CN104059877A
公开(公告)日：2014-09-24
申请号：CN201410300756.8
申请日：2014-06-27
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC分类号： C12N5/073 , C12N15/85 , C12N15/877 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种“仿比利时蓝牛”MSTN基因型的基因编辑猪的制备方法。本发明提供的方法，为对目的猪基因组的MSTN基因外显子3中的靶点区域进行基因组编辑，使外显子3提前形成终止密码子而终止表达，得到“仿比利时蓝牛”MSTN基因型的基因编辑猪。本发明的方法制备的“仿比利时蓝牛”MSTN基因型的基因编辑猪相对于其它突变类型(不形成移码突变或不形成提前终止密码子)的基因编辑而言，可以提前形成终止密码子，对于MSTN基因的修饰更为有效。
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公开(公告)号：CN104498481B
公开(公告)日：2017-06-06
申请号：CN201410697384.7
申请日：2014-11-27
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
摘要： 本发明提供了猪H11位点的DNA片段及其应用。上述的猪H11位点的DNA片段的序列如序列表中的序列1所示，该位点可用于构建猪定点突变库。在该位点插入基因安全性高，无基因沉默效应，具有广谱的细胞表达活性。在猪的基因组中定位H11这样安全有效的基因修饰位点，通过在细胞或个体水平上对猪H11基因进行敲除或修饰，以构建猪H11基因突变库,可为培育优良品系的猪提供前期技术支持。
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公开(公告)号：CN106222176A
公开(公告)日：2016-12-14
申请号：CN201610645568.8
申请日：2016-08-08
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/85 , C07K14/47 , A01K67/027
CPC分类号： C07K14/47 , A01K67/0275 , A01K2227/105 , A01K2267/03 , C12N15/85
摘要： 本发明公开了一种DNA分子及其在制备糖尿病鼠模型中的应用。本发明公开的DNA分子，包括表达盒甲和表达盒乙，表达盒甲用于表达猪11βHSD1基因，表达盒乙用于表达GIPRdn基因和hIAPP基因；猪11βHSD1基因编码序列表的序列2所示的蛋白质；GIPRdn基因编码序列表的序列3所示的蛋白质；hIAPP基因编码序列表的序列4所示的蛋白质。本发明通过向受体动物中导入本发明的DNA分子，进而得到了糖尿病动物模型，可利用糖尿病动物模型进行糖尿病机理的研究和药物的开发，具有广大的应用前景。
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公开(公告)号：CN104560995A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410699674.5
申请日：2014-11-27
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/11 , C40B40/08
摘要： 本发明提供了一对特异识别猪H11位点的sgRNA及其编码DNA和应用，该sgRNA对由sgRNA-F和sgRNA-R组成，sgRNA-L的核苷酸序列如下1)或2)：1)序列表中的序列1所示的核苷酸序列；2)将所述1)的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加且具有与1)中的核苷酸序列具有同样功能的核苷酸序列；sgRNA-R的核苷酸序列如下3)或4)：3)序列表中的序列2所示的核苷酸序列；4)将所述3)的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加且具有与3)中的核苷酸序列具有同样功能的核苷酸序列。本发明能大大增加外源基因定点插入的效率，为转基因猪的制备提供了稳定的平台。
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公开(公告)号：CN104711271B
公开(公告)日：2018-05-25
申请号：CN201310674140.2
申请日：2013-12-11
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种人工合成的脂肪酸去饱和酶编码基因及其应用。本发明所提供的基因具体为如下a）‑d）中任一：a）编码序列为序列1的第932‑2131位所示的核酸分子；b）序列1的第932‑2131位所示的核酸分子；c）在严格条件下与a）或b）限定的核酸分子杂交，且与序列1的第932‑2131位所示核酸分子编码具有相同氨基酸序列的蛋白质的核酸分子；d）与a）或b）或c）限定的核酸分子具有90%以上同源性，且与序列1的第932‑2131位所示核酸分子编码具有相同氨基酸序列的蛋白质的核酸分子。实验证明，在猪胎儿成纤维细胞中，本发明的优化的线虫FAT‑1脂肪酸去饱和酶基因与野生型的线虫FAT‑1脂肪酸去饱和酶基因相比，具有更强的将omega‑6脂肪酸转化为omega‑3脂肪酸的能力，可显著降低ω‑6/ω‑3比值。
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公开(公告)号：CN104628828A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510046539.5
申请日：2015-01-29
摘要： 本发明提供了一对特异识别IκBα基因的多肽及其编码基因和应用。上述多肽对由多肽甲和多肽乙组成；所述多肽甲由18个TAL核酸识别单元组成，每个TAL核酸识别单元中具有两个双连氨基酸；所述多肽乙由18个TAL核酸识别单元组成，每个TAL核酸识别单元中具有两个双连氨基酸；所述多肽甲如序列表的序列2所示；所述多肽乙如序列表的序列4所示。本发明提供的多肽对可以特异识别IκBα基因，通过在猪上对IκBα基因进行敲除或改造对研究猪的延缓性排斥反应有着重要的意义。
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公开(公告)号：CN104497110A
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201410697370.5
申请日：2014-11-27
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC分类号： C07K14/195 , C12N15/31 , C12N15/85
CPC分类号： C07K14/195 , C12N15/85
摘要： 本发明提供了六对特异识别猪H11位点的多肽及其编码基因和应用。本发明提供的六对多肽均由多肽甲和多肽乙组成，所述多肽甲和多肽乙均由18个TAL核酸识别单元组成，每个TAL核酸识别单元中具有两个重复序列可变的双氨基酸残基；本发明提供的多肽对能在细胞或个体水平上对猪H11基因进行敲除或修饰，以解析猪H11基因的功能、构建猪H11基因突变库,为培育优良品系的猪提供前期技术支持，为转基因猪的制备提供了稳定的平台。
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公开(公告)号：CN102965385B
公开(公告)日：2013-12-18
申请号：CN201210509946.1
申请日：2012-12-03
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
摘要： 本发明公开了一种具有双荧光基团的质粒及其作为标准品的应用。本发明提供的质粒，包括表达盒甲和表达盒乙；表达盒甲包括启动子、特异DNA片段甲和终止子；表达盒乙包括启动子、特异DNA片段乙和终止子；特异DNA片段乙为编码序列表的序列3所示的hFluc蛋白的DNA分子；特异DNA片段甲自上游至下游依次包括hRluc1片段、hRluc2片段、特异DNA片段丙、所述hRluc2片段和hRlu3片段；hRluc1片段、hRluc2片段和hRlu3片段顺次连接后编码序列表的序列4所示的hRluc蛋白；特异DNA片段丙中具有终止所述特异DNA片段甲连续编码的终止密码子和多克隆位点。本发明提供的质粒可作为标准品鉴定TALENs的敲除效率，结果更准确可靠。
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公开(公告)号：CN104560995B
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201410699674.5
申请日：2014-11-27
申请人： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/11 , C40B40/08
摘要： 本发明提供了一对特异识别猪H11位点的sgRNA及其编码DNA和应用，该sgRNA对由sgRNA‑F和sgRNA‑R组成，sgRNA‑L的核苷酸序列如下1)或2)：1)序列表中的序列1所示的核苷酸序列；2)将所述1)的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加且具有与1)中的核苷酸序列具有同样功能的核苷酸序列；sgRNA‑R的核苷酸序列如下3)或4)：3)序列表中的序列2所示的核苷酸序列；4)将所述3)的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加且具有与3)中的核苷酸序列具有同样功能的核苷酸序列。本发明能大大增加外源基因定点插入的效率，为转基因猪的制备提供了稳定的平台。
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