一株能够产生细菌素的分散泛菌及其筛选方法和应用

    公开(公告)号:CN104531572B

    公开(公告)日:2017-10-13

    申请号:CN201410777726.6

    申请日:2014-12-15

    摘要: 本发明涉及生物技术与医药领域,具体而言,涉及一株能够产生细菌素的分散泛菌及其筛选方法和应用。该一株能够产生细菌素的分散泛菌,其特征在于,该菌为WH‑1,属于泛菌属,其在中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCC No:M2014508。本发明提供的这种能够产生细菌素的分散泛菌,其通过培养而产生的细菌素具有抑制结核病病原菌(结核分支杆菌和牛结核分支杆菌)的活性,可作为药物佐剂与一线抗结核药物联合应用,对结核病以及MDR‑TB、XDR‑TB、HIV共感染TB进行控制治疗。另外,通过实验证明,该菌产生的细菌素能够在两天内降低小鼠体内感染的结核分枝杆菌,从而使其具有良好的临床使用价值。

    临床样本中结核分枝杆菌及吡嗪酰胺耐药性联合检测方法

    公开(公告)号:CN102925554A

    公开(公告)日:2013-02-13

    申请号:CN201210345181.2

    申请日:2012-09-18

    摘要: 本发明涉及临床样本中结核分枝杆菌及其吡嗪酰胺耐药性的联合检测方法,步骤是:A、提取样本中的DNA;B、通过荧光定量PCR扩增含有全长吡嗪酰胺酶基因(pncA)的结核基因组片段来检测结核分枝杆菌;C、对结核分枝杆菌阳性样本,进行吡嗪酰胺耐药性的检测;吡嗪酰胺耐药性检测的步骤为:1.以荧光定量PCR产物为模板再进行一次PCR反应添加体外表达元件;2、将此PCR产物加入到无细胞表达系统中,表达吡嗪酰胺酶;3、通过该样本与标准菌株的吡嗪酰胺酶活性对比,给出吡嗪酰胺耐药性结果。本发明将荧光定量PCR扩增全长pncA基因结合体外表达的吡嗪酰胺酶酶活性,实现了样本中结核分枝杆菌及其吡嗪酰胺耐药性的联合检测,无需细菌培养和DNA测序仪。

    制备慢病毒颗粒包装EBOVRNA作为EBOV核酸检测阳性参考品的方法

    公开(公告)号:CN110669793A

    公开(公告)日:2020-01-10

    申请号:CN201910978070.7

    申请日:2019-10-15

    摘要: 本发明公开了制备慢病毒颗粒包装EBOV RNA作为EBOV核酸检测阳性参考品的方法,制备方法将EBOV的三个基因NP、GP和L基因的部分片段串联后整合到慢病毒的表达载体中,将构建的慢病毒表达质粒与包装质粒分别在工程大肠杆菌菌株中扩增,得到大量的质粒,再将构建的表达质粒和包装质粒共同转染至HEK293T细胞中,经细胞表达后得到大量的包装了EBOV的RNA基因的慢病毒颗粒。本发明涉及基因工程技术领域。该制备慢病毒颗粒包装EBOV RNA作为EBOV核酸检测阳性参考品的方法,得到的颗粒作为EBOV核酸检测的阳性参考品,具有很好模拟实际样本中从病毒核酸提取到核酸检测的整个过程的优点,将EBOV的假病毒颗粒通过冻干保护剂进行冻干后得到的冻干粉,非常稳定。

    一种血清中鲍曼不动杆菌的快速鉴定方法及其应用

    公开(公告)号:CN108842006A

    公开(公告)日:2018-11-20

    申请号:CN201810903200.6

    申请日:2018-08-09

    摘要: 本发明涉及一种血清中鲍曼不动杆菌的快速鉴定方法及其应用,该方法不依赖血清样本的核酸提取,通过qPCR检测噬菌体侵染病原菌后产生子代噬菌体的核酸拷贝数的变化,实现病原菌鲍曼不动杆菌的快速鉴定。该方法使用的特异性引物和探针,是通过分析噬菌体和鲍曼不动杆菌的序列并找出噬菌体的特异序列,针对该特异序列设计的,所述引物包括正向引物和反向引物,所述引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,所述探针序列如SEQ ID NO.3所示。该引物和探针应用于本发明的快速鉴定方法,噬菌体检测方法的特异性强。本发明的血清中鲍曼不动杆菌的鉴定方法以噬菌体核酸序列为靶标,能在4h内实现对鲍曼不动杆菌低至102CFU/mL的检测,检测方法简单易操作,检测灵敏度高。