V12CBD蛋白及其编码基因的一种新用途

    公开(公告)号:CN107670023B

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN201710935099.8

    申请日:2017-10-10

    发明人: 危宏平 杨航

    IPC分类号: A61K38/16 A61P31/04

    摘要: 本发明涉及生物制剂领域,公开了一种能结合金黄色葡萄球菌的V12CBD蛋白及其编码基因的一种新用途。本发明提供的新用途是V12CBD蛋白及其编码基因在制备治疗与预防葡萄球菌感染的药物中的应用,V12CBD蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,V12CBD蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。实验表明,V12CBD与金黄色葡萄球菌结合后能抑制细菌在上皮细胞的粘附和入侵,增强金黄色葡萄球菌对巨噬细胞的敏感性;V12CBD能活化巨噬细胞,增强机体的免疫功能;预防性注射V12CBD以及包含有V12CBD的融合蛋白质能显著提高金黄色葡萄球菌感染小鼠的存活率。因此,V12CBD能单独或者作为添加剂与不同形式的试剂和溶液配伍,用于葡萄球菌的治疗与预防性治疗,具有广泛的应用前景。

    微量液体定量装置与取样加样方法及在核酸检测中的应用

    公开(公告)号:CN111394237A

    公开(公告)日:2020-07-10

    申请号:CN202010193224.4

    申请日:2020-03-18

    IPC分类号: C12M1/34 C12M1/26 C12Q1/24

    摘要: 本发明公开了微量液体定量装置与取样加样方法及在核酸检测中的应用,包括一细棒组成,该细棒的一端作为取样端,所述微量液体定量装置是采用一次性使用的细棒进行蘸取样本和加样,本发明涉及微量液体定量取样技术领域。该微量液体定量装置与取样加样方法及在核酸检测中的应用,本发明基于液体在物体表面吸附原理设计取样加样,实现快速简便地定量取样加样,解决了微量液体定量取样加样的难题,使得核酸检测的取加模板操作非常容易,本发明的取加样方法尤其适用于诸如核酸检测微量样本模板的加样,本发明通过靠物体表面吸附液体来实现取样和加样,不仅结构简单,而且操作非常简便,非常适合非专业人员在现场使用。

    制备慢病毒颗粒包装EBOVRNA作为EBOV核酸检测阳性参考品的方法

    公开(公告)号:CN110669793A

    公开(公告)日:2020-01-10

    申请号:CN201910978070.7

    申请日:2019-10-15

    摘要: 本发明公开了制备慢病毒颗粒包装EBOV RNA作为EBOV核酸检测阳性参考品的方法,制备方法将EBOV的三个基因NP、GP和L基因的部分片段串联后整合到慢病毒的表达载体中,将构建的慢病毒表达质粒与包装质粒分别在工程大肠杆菌菌株中扩增,得到大量的质粒,再将构建的表达质粒和包装质粒共同转染至HEK293T细胞中,经细胞表达后得到大量的包装了EBOV的RNA基因的慢病毒颗粒。本发明涉及基因工程技术领域。该制备慢病毒颗粒包装EBOV RNA作为EBOV核酸检测阳性参考品的方法,得到的颗粒作为EBOV核酸检测的阳性参考品,具有很好模拟实际样本中从病毒核酸提取到核酸检测的整个过程的优点,将EBOV的假病毒颗粒通过冻干保护剂进行冻干后得到的冻干粉,非常稳定。

    一种葡萄球菌裂解酶及其保存方法和应用

    公开(公告)号:CN110117587A

    公开(公告)日:2019-08-13

    申请号:CN201910393897.1

    申请日:2019-05-13

    摘要: 本发明涉及一种能杀灭葡萄球菌,特别是能杀灭金黄色葡萄球菌、松鼠葡萄球菌、马胃葡萄球菌、溶血葡萄球菌和腐生葡萄球菌等葡萄球菌属的裂解酶及其保存方法和应用。该葡萄球菌裂解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码该葡萄球菌裂解酶的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该酶发挥作用的pH范围宽,在pH 6-10都保持有裂解葡萄球菌的活力,采用编码基因构建的重组蛋白酶能在大肠杆菌BL21(DE3)中可溶表达。该酶能用作治疗体内、体外葡萄球菌感染的抗生素,也能快速裂解葡萄球菌的细胞壁并释放胞内的物质,从而用来核酸提取、制备葡萄球菌检测和鉴定的药剂。试验证实,将该葡萄球菌裂解酶冻干后,其蛋白杀菌活性没有降低,因此,可以制成冻干粉保存。

    一种血清中鲍曼不动杆菌的快速鉴定方法及其应用

    公开(公告)号:CN108842006A

    公开(公告)日:2018-11-20

    申请号:CN201810903200.6

    申请日:2018-08-09

    摘要: 本发明涉及一种血清中鲍曼不动杆菌的快速鉴定方法及其应用,该方法不依赖血清样本的核酸提取,通过qPCR检测噬菌体侵染病原菌后产生子代噬菌体的核酸拷贝数的变化,实现病原菌鲍曼不动杆菌的快速鉴定。该方法使用的特异性引物和探针,是通过分析噬菌体和鲍曼不动杆菌的序列并找出噬菌体的特异序列,针对该特异序列设计的,所述引物包括正向引物和反向引物,所述引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,所述探针序列如SEQ ID NO.3所示。该引物和探针应用于本发明的快速鉴定方法,噬菌体检测方法的特异性强。本发明的血清中鲍曼不动杆菌的鉴定方法以噬菌体核酸序列为靶标,能在4h内实现对鲍曼不动杆菌低至102CFU/mL的检测,检测方法简单易操作,检测灵敏度高。

    一种基于免疫磁珠富集的甲型流感病毒检测试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN102230938B

    公开(公告)日:2013-10-30

    申请号:CN201110168589.2

    申请日:2011-06-22

    IPC分类号: C12Q1/70

    摘要: 本发明公开了一种基于免疫磁珠富集的甲型流感病毒检测试剂盒及方法,试剂盒包括A、免疫富集反应体系组分;B、环介导的等温核酸扩增体系组分;C、抗体的制备;D、免疫磁珠的制备;E、设计甲型H1N1流感病毒的特异性引物,用于环介导的等温65ºC扩增反应。检测方法是:a、免疫富集;b、热裂解上述产物、经磁力架分离,将含有病毒核酸的上清作为环介导等温扩增反应的模板;c、环介导等温扩增反应;d、结果判定。该试剂盒具有操作简单、快速、特异性好、灵敏度高、对硬件要求低等优势,可广泛应用于各级疾病预防控制机构,流感监测网络实验室,哨点医院等对发热病人鼻咽拭子等标本的甲型H1N1流感病毒的检测和监测。