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公开(公告)号：CN112851765B
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN202110186446.8
申请日：2021-02-09
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
摘要： 本发明提供了一种蛋白或肽与核酸共价连接的方法，涉及生物交联的技术领域。上述蛋白或肽与核酸共价连接的方法，包括以下步骤：(1)目标蛋白或肽与Trwc酶形成融合蛋白；(2)融合蛋白中Trwc酶催化目标蛋白或肽与目标核酸共价连接。本发明利用Trwc酶能够识别、剪切和连接特定的目标核酸序列且能与目标核酸共价连接的性质，实现了稳定、高效、定点、定向共价连接目标蛋白或肽与目标核酸的目的，反应条件温和，反应步骤简单，耗时短，无需引入任何化学试剂，只需加入金属离子，适合产业化推广。
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公开(公告)号：CN112851771A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110186703.8
申请日：2021-02-09
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C07K14/315 , C07K14/435 , C12N9/90 , C12N9/02 , C12N9/10 , A61K47/42 , A61K47/54
摘要： 本发明提供了一种连接核酸与蛋白或肽的方法，涉及生物交联的技术领域。上述连接核酸与蛋白或肽的方法，包括以下步骤：(1)目标蛋白或肽与DNA拓扑异构酶形成融合蛋白；(2)融合蛋白中的DNA拓扑异构酶催化共价连接目标核酸。本发明利用DNA拓扑异构酶能够识别、剪切和连接特定的目标核酸序列的性质，实现了稳定、高效、定点、定向共价连接目标核酸与目标蛋白或肽，而且不影响蛋白及核酸的结构或性能。
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公开(公告)号：CN112778426B
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202110010916.5
申请日：2021-01-06
申请人： 深圳伯生生物传感技术有限公司 , 中国科学院武汉病毒研究所
摘要： 本发明公开了一种精准抗体核酸定向连接方法，包括以下步骤：(1)HUH类核酸内切酶与Protein G通过柔性Linker分子连接，获得融合蛋白；(2)合成单链DNA，其含有能被HUH类核酸内切酶识别的位点；(3)融合蛋白与单链DNA混合反应得蛋白核酸复合物；(4)蛋白核酸复合物与目标抗体混合，光照催化条件下反应实现目标抗体与单链DNA的定向连接；步骤(1)和(2)可互换；Protein G基因特定位点插入光诱导位点特异性交联的非天然氨基酸的密码子。该方法无需对抗体与核酸进行任何化学或功能修饰，不影响抗体识别抗原的能力以及核酸分子的性质与功能；且获得的抗体核酸复合物一个抗体上仅连有一个核酸分子。
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公开(公告)号：CN112851784A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110186447.2
申请日：2021-02-09
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C07K14/435 , C07K19/00 , C12N9/16 , C12P21/06
摘要： 本发明提供了一种或多种目标蛋白或肽的纯化方法，涉及生物技术领域。本发明的纯化方法利用可与DNA共价结合的HUH酶作为标签来纯化蛋白，纯化效率高，获得的纯化蛋白纯度高；而且通过不同的HUH酶标签，可以实现同时纯化多种蛋白，实现多目标蛋白纯化，纯化方法简单，条件温和。
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公开(公告)号：CN112778426A
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN202110010916.5
申请日：2021-01-06
申请人： 深圳伯生生物传感技术有限公司 , 中国科学院武汉病毒研究所
摘要： 本发明公开了一种精准抗体核酸定向连接方法，包括以下步骤：(1)HUH类核酸内切酶与Protein G通过柔性Linker分子连接，获得融合蛋白；(2)合成单链DNA，其含有能被HUH类核酸内切酶识别的位点；(3)融合蛋白与单链DNA混合反应得蛋白核酸复合物；(4)蛋白核酸复合物与目标抗体混合，光照催化条件下反应实现目标抗体与单链DNA的定向连接；步骤(1)和(2)可互换；Protein G基因特定位点插入光诱导位点特异性交联的非天然氨基酸的密码子。该方法无需对抗体与核酸进行任何化学或功能修饰，不影响抗体识别抗原的能力以及核酸分子的性质与功能；且获得的抗体核酸复合物一个抗体上仅连有一个核酸分子。
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公开(公告)号：CN116375808A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202211743551.8
申请日：2022-12-30
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C07K14/00 , C07K1/04 , C07K19/00 , G01N33/532 , G01N33/68 , C12Q1/6806
摘要： 本申请涉及生物分子固定技术领域，具体涉及一种HUH固相结合蛋白及其介导的蛋白或核酸的固相结合方法。本申请HUH固相结合蛋白包括HUH蛋白和固相材料，HUH蛋白与固相材料之间的结合作用力为生物亲和作用力；HUH蛋白选自A*蛋白、TC1蛋白、HI0217蛋白中的至少一种。相较于仅能实现蛋白固定或者核酸固定的方法，利用本发明的固相结合肽可以在一种路线下进行两种分子的固定，且反应简单迅速，条件温和，无需任何额外化学修饰，常温一步孵育实现蛋白固定，两步孵育实现核酸固定。同时，蛋白、核酸等固定目标仍然可以在载体表面维持很好的活性。
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公开(公告)号：CN110452303B
公开(公告)日：2022-03-04
申请号：CN201910730507.5
申请日：2019-08-08
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C07K19/00 , C07K1/107 , C07K14/315 , C12N9/20
摘要： 本发明涉及基于TYLCV‑C1蛋白的蛋白与核酸的共价连接，其利用TYLCV‑C1蛋白的催化作用，将目标蛋白与目标核酸共价连接形成蛋白核酸复合物，其反应条件温和，反应耗时短，效率高达93％，25℃反应10min即可，且TYLCV‑C1蛋白对目标蛋白及目标核酸的功能及性质无负面影响。
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公开(公告)号：CN110452303A
公开(公告)日：2019-11-15
申请号：CN201910730507.5
申请日：2019-08-08
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C07K19/00 , C07K1/107 , C07K14/315 , C12N9/20
摘要： 本发明涉及基于TYLCV-C1蛋白的蛋白与核酸的共价连接，其利用TYLCV-C1蛋白的催化作用，将目标蛋白与目标核酸共价连接形成蛋白核酸复合物，其反应条件温和，反应耗时短，效率高达93％，25℃反应10min即可，且TYLCV-C1蛋白对目标蛋白及目标核酸的功能及性质无负面影响。
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公开(公告)号：CN112851784B
公开(公告)日：2022-12-30
申请号：CN202110186447.2
申请日：2021-02-09
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C07K14/435 , C07K19/00 , C12N9/16 , C12P21/06
摘要： 本发明提供了一种或多种目标蛋白或肽的纯化方法，涉及生物技术领域。本发明的纯化方法利用可与DNA共价结合的HUH酶作为标签来纯化蛋白，纯化效率高，获得的纯化蛋白纯度高；而且通过不同的HUH酶标签，可以实现同时纯化多种蛋白，实现多目标蛋白纯化，纯化方法简单，条件温和。
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公开(公告)号：CN112851765A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110186446.8
申请日：2021-02-09
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
摘要： 本发明提供了一种蛋白或肽与核酸共价连接的方法，涉及生物交联的技术领域。上述蛋白或肽与核酸共价连接的方法，包括以下步骤：(1)目标蛋白或肽与Trwc酶形成融合蛋白；(2)融合蛋白中Trwc酶催化目标蛋白或肽与目标核酸共价连接。本发明利用Trwc酶能够识别、剪切和连接特定的目标核酸序列且能与目标核酸共价连接的性质，实现了稳定、高效、定点、定向共价连接目标蛋白或肽与目标核酸的目的，反应条件温和，反应步骤简单，耗时短，无需引入任何化学试剂，只需加入金属离子，适合产业化推广。
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