抗菌肽Protegrin-1在防治猪蓝耳病中的应用

    公开(公告)号:CN103623391A

    公开(公告)日:2014-03-12

    申请号:CN201310469273.6

    申请日:2013-10-10

    申请人: 中山大学

    CPC分类号: Y02A50/473

    摘要: 本发明属于医药技术领域,具体公开了抗菌肽Protegrin-1在制备抗猪蓝耳病药物中的应用。本发明首先根据已报道的Protegrin-1的氨基酸序列,化学合成抗菌肽Protegrin-1,然后通过抗大肠杆菌DH5α实验验证其抗菌活性,并利用Marc-145细胞,通过qRT-PCR、Western-Blot、细胞上清TCID50检测及IFA等方法研究其对HP-PRRSV的抗病毒作用,进一步在病毒吸附和进入细胞两个过程阐述其抗病毒机制。结果发现Protegrin-1对HP-PRRSV有很好的抗病毒效果,有望成为一种新型的防治猪蓝耳病的药物。

    一种用于猪背膘厚标记辅助选择的分子标记的方法

    公开(公告)号:CN102719523A

    公开(公告)日:2012-10-10

    申请号:CN201110448950.7

    申请日:2011-12-28

    申请人: 中山大学

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种可用于猪背膘厚标记辅助选择的分子标记的方法,通过测定SEQ ID NO:1的5′端第650位核苷酸,以及SEQ ID NO:2的5′端第95位核苷酸,确定猪在该位点的基因型,来判断同品种或同类型猪背膘厚的大小。本发明可用于检测第6、7肋间活体背膘厚、最后肋骨处活体背膘厚、平均活体背膘厚、平均胴体背膘厚等反映猪背膘厚大小的性状,从而为通过标记辅助选择减少背膘厚提高猪的瘦肉率提供新的重要分子标记,并将在猪的育种中发挥重要作用。

    一种评价猪的脂肪沉积性能的方法

    公开(公告)号:CN102559890B

    公开(公告)日:2013-12-25

    申请号:CN201110451463.6

    申请日:2011-12-28

    申请人: 中山大学

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种利用CART基因单核苷酸多态性来预测猪脂肪沉积性能的方法,通过测定SEQ ID NO:1的5′端第425位核苷酸,以及SEQ ID NO:2的5′端第311位核苷酸,确定猪的基因型,来判断猪的脂肪沉积性能。本发明可用于检测猪的活体背膘厚、胴体背膘厚、板油重、眼肌面积、瘦肉率等反映猪脂肪沉积性能的性状,从而为通过标记辅助选择或分子育种减少背膘厚、板油重,增加眼肌面积从而提高猪的瘦肉率提供新的重要遗传标记,并将在猪的育种中发挥重要作用。

    免药物筛选快速获得小鼠Rosa26基因定点整合外源基因的方法

    公开(公告)号:CN107365803B

    公开(公告)日:2020-12-04

    申请号:CN201710590903.3

    申请日:2017-07-19

    申请人: 中山大学

    IPC分类号: C12N15/90 C12N9/22 C12N15/113

    摘要: 本发明提供了一种免药物筛选快速获得小鼠Rosa26基因定点整合外源基因的方法,其包括以下步骤:1)选择小鼠Rosa26基因打靶位点;2)设计靶向Rosa26的gRNA;3)构建CRISPR/Cas9表达质粒pX458‑Rosa26;4)构建无启动子的带红色荧光报告基因的同源重组供体载体;5)细胞转染:将所述CRISPR/Cas9质粒pX458‑Rosa26与供体载体共转染进入小鼠ES细胞;5)用流式细胞技术先通过绿色荧光分选出成功转染质粒的细胞进行培养7天后,通过红色荧光进行单细胞分选,经培养获得定点整合外源基因的ES单克隆细胞系。本发明的方法精确快速、简便高效。

    一种新型药物蛋白DRACO及其在防治猪蓝耳病中的应用

    公开(公告)号:CN103571863B

    公开(公告)日:2015-03-04

    申请号:CN201310469225.7

    申请日:2013-10-10

    申请人: 中山大学

    摘要: 本发明公开了一种新型药物蛋白DRACO及其在防治猪蓝耳病中的应用。本发明利用NCBI上猪相关序列,设计出既有活性又能够进入细胞的DRACO蛋白编码基因,然后在原核表达系统中表达并纯化出DRACO蛋白,在Marc-145细胞水平上通过qRT-PCR、Western-Blot、细胞上清TCID50检测及IFA等方法研究其对HP-PRRSV的抗病毒作用,并进一步阐述DRACO在病毒吸附和进入细胞两个过程中的抗病毒机制。本发明所述方法制得的DRACO对HP-PRRSV有很好的抗病毒效果,有望成为一种新型的防治猪蓝耳病的药物。

    一种木聚糖酶基因xynB及其表达载体和应用

    公开(公告)号:CN102876693A

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN201210399926.3

    申请日:2012-10-19

    申请人: 中山大学

    IPC分类号: C12N15/56 C12N15/63 C12N5/10

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种木聚糖酶基因xynB及其表达载体和应用,要解决的是现有技术中xynB基因表达量低的问题。本发明提供一种木聚糖酶基因xynB,其核苷酸序列如SEQIDNO:1或SEQIDNO:2所示。一种木聚糖酶表达载体,其含有上述木聚糖酶基因xynB。一种提高xynB基因表达量的方法,将上述木聚糖酶表达载体转入HEK293A细胞中。本发明用含有稀有密码子的表达载体转染HEK293A细胞,使xynB基因的表达量得到显著提高,为提高外源基因在转基因动物中的表达量提供了有效的解决手段。