公开(公告)号：CN113549704B

公开(公告)日：2022-08-12

申请号：CN202110558610.3

申请日：2021-05-21

申请人： 云南省烟草质量监督检测站 ,  云南省烟草农业科学研究院

发明人： 童治军 ,  张轲 ,  肖炳光 ,  方敦煌 ,  张晓伟 ,  隋学艺 ,  陈学军 ,  孙浩巍 ,  龙杰 ,  张冀武 ,  陈丹 ,  李海燕 ,  王春琼 ,  蔡洁云 ,  顾健龙 ,  魏佳 ,  彭丽娟 ,  王潞 ,  韩小渊

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12N15/11

摘要： 本发明属于分子生物技术领域，更具体而言，涉及一种鉴别烟与非烟的烟草属特异性分子标记及其应用，所述的烟草属特异性分子标记编号为Ntsp027和Ntsp151，其PCR扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。所述的应用为利用上述烟草属特异性分子标记对涉案制烟原料基因组DNA进行PCR扩增，检测是否存在特异性的PCR扩增产物核苷酸序列，据此，精确判断该涉案制烟原料中是否有烟草材料存在。本发明所述的一种烟草属特异性分子标记实现了烟与非烟的快速、有效鉴别检测，提高了涉案制烟原料鉴别检测工作的科学性、准确性和权威性，降低了司法风险，为烟草行业专卖工作中的打假缉私提供强有力的司法证据。

公开(公告)号：CN113549704A

公开(公告)日：2021-10-26

申请号：CN202110558610.3

申请日：2021-05-21

申请人： 云南省烟草质量监督检测站 ,  云南省烟草农业科学研究院

发明人： 童治军 ,  张轲 ,  肖炳光 ,  方敦煌 ,  张晓伟 ,  隋学艺 ,  陈学军 ,  孙浩巍 ,  龙杰 ,  张冀武 ,  陈丹 ,  李海燕 ,  王春琼 ,  蔡洁云 ,  顾健龙 ,  魏佳 ,  彭丽娟 ,  王潞 ,  韩小渊

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12N15/11

摘要： 本发明属于分子生物技术领域，更具体而言，涉及一种鉴别烟与非烟的烟草属特异性分子标记及其应用，所述的烟草属特异性分子标记编号为Ntsp027和Ntsp151，其PCR扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。所述的应用为利用上述烟草属特异性分子标记对涉案制烟原料基因组DNA进行PCR扩增，检测是否存在特异性的PCR扩增产物核苷酸序列，据此，精确判断该涉案制烟原料中是否有烟草材料存在。本发明所述的一种烟草属特异性分子标记实现了烟与非烟的快速、有效鉴别检测，提高了涉案制烟原料鉴别检测工作的科学性、准确性和权威性，降低了司法风险，为烟草行业专卖工作中的打假缉私提供强有力的司法证据。

公开(公告)号：CN118460772A

公开(公告)日：2024-08-09

申请号：CN202410633229.2

申请日：2024-05-21

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 童治军 ,  肖炳光 ,  方敦煌 ,  隋学艺

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12N15/11

摘要： 本发明提供了与烟草主流烟气中焦油释放量基因qTAR紧密连锁的共显性SSR标记及应用方法。所述的与烟草主流烟气中焦油释放量基因qTAR紧密连锁的共显性SSR标记的编号为TMy81049和TMy85286，其PCR扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示。所述的应用为所述的与焦油释放量基因qTAR紧密连锁的共显性SSR标记在检测烟草基因组DNA中是否存在焦油释放量基因qTAR中的应用。与现有技术方法相比，本发明所述的共显性SSR标记具有精准、高效、稳定、便捷、低成本且无检测时机限制的特点，因此该分子标记可以作为低危害烟草育种中焦油释放量基因qTAR分子标记辅助选择的应用。

公开(公告)号：CN118207240A

公开(公告)日：2024-06-18

申请号：CN202410341721.2

申请日：2024-03-25

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 王丙武 ,  隋学艺 ,  高玉龙 ,  宋中邦 ,  赵璐 ,  孔光辉 ,  焦芳婵 ,  张洪博 ,  吴兴富 ,  李永平

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  A01H6/82 ,  A01H5/12

摘要： 本发明属于遗传工程技术领域，具体涉及一种烟草钙依赖蛋白激酶基因的应用。所述烟草钙依赖蛋白激酶基因用于调控烟草烟碱含量的转基因烟草植株中；所述烟草钙依赖蛋白激酶基因包括烟草钙依赖蛋白激酶基因NtCDPK9‑1和烟草钙依赖蛋白激酶基因NtCDPK9‑2，所述NtCDPK9‑1的核苷酸序列如SEQ ID:NO.1所示，所述NtCDPK9‑2的核苷酸序列如SEQ ID:NO.2所示；利用CRISPR/CAS9编辑技术对烟草钙依赖蛋白激酶基因NtCDPK9‑1和NtCDPK9‑2进行功能验证，结果表明烟草钙依赖蛋白激酶基因NtCDPK9‑1和NtCDPK9‑2具有调控烟碱在烟叶中累积的功能，为调控烟草烟碱含量提供了靶标基因，解决目前通过调控钙依赖蛋白激酶基因的表达来调控烟叶中烟碱含量未见报道的问题。

公开(公告)号：CN117352060A

公开(公告)日：2024-01-05

申请号：CN202311530873.9

申请日：2023-11-16

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 肖炳光 ,  童治军 ,  方敦煌 ,  黄昌军 ,  曾建敏 ,  刘勇 ,  隋学艺

IPC分类号： G16B30/20 ,  G16B30/10

摘要： 本发明公开了一种异源四倍体烟草染色体级别基因组组装的方法，所述的方法包括以下步骤：步骤1)选择Falcon、Verkko和HiFiasm三种软件对烟草基因组进行Contig初始组装，并选择最优结果作为初步组装结果Contig_asm；步骤2)利用Pilon、Racon和Merfin软件，结合二代、三代测序数据对初步组装结果Contig_asm进行打磨、矫正；步骤3)利用3D‑DNA和ALLHiC软件并结合HiC测序数据对打磨、矫正后的初步组装结果Contig_asm进行染色体挂载；步骤4)获得异源四倍体烟草的基因组数据。本发明所述的基因组组装方法具有科学、精准和异源四倍体烟草特异性的特点，因此该方法既填补了目前针对异源四倍体烟草基因组组装方法空白，也可在具有高重复、高复杂度的烟草属内所有烟草种类染色体级别基因组组装中的应用。

公开(公告)号：CN116555324A

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202310328753.4

申请日：2023-03-30

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 袁诚 ,  黄昌军 ,  刘勇 ,  隋学艺 ,  曾建敏 ,  童治军 ,  于海芹 ,  方敦煌

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

摘要： 一种烟草中长基因片段无缝插入或替换的编辑方法。用烟草叶片制备烟草原生质体；利用CRISPR/Cas9以及供体DNA对烟草原生质体进行基因编辑，进行外源片段的插入与替换；将经过基因编辑的烟草原生质体再生为植株。本发明利用上述方法进行了烟草中抗性基因N’的改造：找到来自野生烟草的N’alata基因负责TMV抗性的核心区段，替换掉烟草N’基因的对应区域，获得了具有TMV抗性性状的栽培烟草材料。

公开(公告)号：CN113584210B

公开(公告)日：2023-07-04

申请号：CN202110908424.8

申请日：2021-08-09

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 宋中邦 ,  隋学艺 ,  张谊寒 ,  王亚辉

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/29

摘要： 本发明涉及一种基于NtPIF1基因表达水平筛选硃砂烟植株的方法，所述的基因为NtPIF1基因；序列为SEQ ID NO.1；所述的方法包括以下步骤：单株挂牌编号、叶片取样、RNA提取及cDNA合成、基因表达水平检测、套袋自交收种。本发明首次公开利用NtPIF1基因表达水平筛选硃砂烟植株，且烟草叶片不需进行任何处理直接取样检测，筛选出的植株烤后叶片呈现显著硃砂特征。

公开(公告)号：CN116064896A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202211021291.3

申请日：2022-08-24

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 黄昌军 ,  曾建敏 ,  刘勇 ,  袁诚 ,  于海芹 ,  童治军 ,  师君丽 ,  李勇 ,  方敦煌 ,  冯智宇 ,  肖炳光 ,  隋学艺 ,  白戈 ,  赵璐 ,  王丙武

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

摘要： 本发明属于烟草育种领域，涉及用于抗斑萎病烟草8号染色体背景筛选的引物组及其应用。提供用于抗斑萎病烟草育种背景筛选的PCR引物组合，包括第一PCR引物组和/或第二PCR引物组；所述第一PCR引物组由核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑3所示的三条引物组成；所述第二PCR引物组由核苷酸序列如SEQ ID NO:4‑6所示的三条引物组成；所述抗斑萎病烟草为供体亲本Polalta烟草和受体亲本K326烟草的杂交及回交后代。本发明的引物组可用于早世代筛选具有K326烟草背景的抗斑萎病烟草，极大地缩短K326抗斑萎病定向改良的育种周期，提高育种效率。

公开(公告)号：CN115927716A

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202211020040.3

申请日：2022-08-24

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 黄昌军 ,  刘勇 ,  曾建敏 ,  袁诚 ,  于海芹 ,  冯智宇 ,  师君丽 ,  李勇 ,  童治军 ,  方敦煌 ,  肖炳光 ,  隋学艺 ,  高玉龙 ,  吴兴富 ,  王丙武

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

摘要： 本发明属于烟草育种领域，涉及用于抗斑萎病烟草1号染色体背景筛选的引物组及其应用。提供用于抗斑萎病烟草育种背景筛选的PCR引物组合，包括第一PCR引物组、第二PCR引物组、第三PCR引物组、第四PCR引物组和/或第五PCR引物组；第一PCR引物组由SEQ ID NO:1‑3所示的三条引物组成；第二PCR引物组由SEQ ID NO:4‑6所示的三条引物组成；第三PCR引物组由SEQ ID NO:7‑9所示的三条引物组成；第四PCR引物组由SEQ ID NO:10‑12所示的三条引物组成；第五PCR引物组由SEQ ID NO:13‑15所示的三条引物组成；所述抗斑萎病烟草为供体亲本Polalta烟草和受体亲本K326烟草的杂交及回交后代。本发明的引物组合可用于早世代筛选具有K326背景的抗斑萎病烟草，极大地缩短K326抗斑萎病定向改良的育种周期，提高育种效率。

公开(公告)号：CN113831397B

公开(公告)日：2022-11-25

申请号：CN202110953514.9

申请日：2021-08-19

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 赵璐 ,  宋中邦 ,  王丙武 ,  高玉龙 ,  隋学艺 ,  师君丽 ,  张谊寒 ,  李永平

IPC分类号： C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  C12N1/21 ,  A01H5/00 ,  A01H5/02 ,  A01H6/82

摘要： 本发明“一种原花青素物质调控因子NtMYB330及其表达载体、转化体、试剂盒与方法”属于遗传工程技术领域。所述一种原花青素物质调控因子NtMYB330的氨基酸序列中包含：R2重复序列、R3重复序列、[D/E]Lx2[R/K]x3Lx6Lx3R结构域、VI[R/P]TKAx1RC[S/T]结构域。所述一种原花青素物质调控因子NtMYB330的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。基于过表达原花青素物质调控因子NtMYB330获得的转基因植株花中的儿茶酸含量平均提高431.5％；表儿茶酸含量平均提高406.5％。说明烟草NtMYB330基因在提高烟草花中原花青素含量方面具有较大的应用前景。