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公开(公告)号：CN113046472B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN201911377673.8
申请日：2019-12-27
申请人： 北京市农林科学院
摘要： 本发明提供了用于检测猪圆环病毒1型、2型和3型的三重PCR引物试剂盒。利用本发明提供的三重PCR检测试剂盒可在2小时内对三种病原同时进行检测，所使用的材料价格便宜，所使用的仪器在大多数畜牧场均有配备，并且该方法特异性强，敏感性高，非常适用于临床对猪圆环三种病原的诊断、流行病学调查以及实验室对该三种病原的初步筛查。
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公开(公告)号：CN112725529A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN202110016804.0
申请日：2021-01-07
申请人： 北京市农林科学院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q1/6804 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明提供了用于检测禽偏肺病毒的引物，其通过特异性扩增C型禽偏肺病毒的N基因进行禽偏肺病毒的核酸检测。本发明还提供了禽偏肺病毒检测试剂盒，其通过RT‑PCR扩增、纳米金示踪，双重放大信号，并实现检测结果的可视化，用于禽偏肺病毒检测能够大幅降低检测下限，同时有效提高病毒检测的特异性、灵敏性、准确性和可重复性。使用本发明试剂盒检测病毒，样品的前处理过程简单，耗时少，能同时检测大量的样品。
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公开(公告)号：CN105296440B
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201510702409.2
申请日：2015-10-26
申请人： 北京市农林科学院
IPC分类号： C12N7/00 , A61K39/155 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明提供一种鸡C型禽偏肺病毒毒株aMPV/C‑JCZ及其应用，所述病毒毒株的保藏号为CGMCC No.10889。该病毒是一种鸡来源禽偏肺病毒C亚型野生型毒株。野外分离的该病毒在SPF鸡上进行回鸡实验，引发严重呼吸道感染临床症状，造成气管和肺部病理损伤，经过M基因序列测序证实该病毒是禽偏肺病毒C亚型。病毒稀释后在SPF鸡胚上测定病毒滴度，试验结果显示EID50为10‑4.6/0.2ml。这是国内首次分离到鸡C型禽偏肺病毒，与禽偏肺病毒A和B亚型在基因型和抗原上存在较大的差异。为进一步研究aMPV的致病机制以及开展有效防控该病的疫苗研究提供直接支持。
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公开(公告)号：CN103360472B
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201310325109.8
申请日：2013-07-30
申请人： 北京市农林科学院
IPC分类号： C07K14/115 , C12N15/45 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
摘要： 本发明提供了一种禽偏肺病毒抗体ELISA检测试剂盒，该试剂盒是基于A亚群禽偏肺病毒F蛋白的单体蛋白为包被抗原建立的检测禽偏肺病毒抗体的ELISA试剂盒。本发明还提供了用于制备上述试剂盒的包被抗原即F蛋白的单体蛋白的制备方法，通过本发明提供的方法制备的F蛋白具有良好的反应原性，且本发明所建立的ELISA检测试剂盒为禽偏肺病毒感染的早期诊断和检测提供了有效的方法，为该疾病的预防研究起到了显著促进作用。
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公开(公告)号：CN103739679A
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201410018287.0
申请日：2014-01-15
申请人： 北京市农林科学院
IPC分类号： C07K7/08 , C07K19/00 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
摘要： 本发明提供了一种F蛋白多肽及其应用。该抗原多肽是根据F蛋白基因序列，进行生物信息学分析比较得到的，该抗原多肽的氨基酸序列是CTNAGSTAYYPNKDD。该抗原多肽保守性高、抗原性强，利用该多肽能产生针对禽偏肺病毒F蛋白的单克隆抗体。
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公开(公告)号：CN111748515A
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201910248819.2
申请日：2019-03-29
申请人： 北京市农林科学院
摘要： 本发明提供了一株Vero克隆细胞株及其应用，用于高效生产猪流行性腹泻病毒。所述的细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CGMCC NO：16294，本发明采用有限稀释法进行Vero单细胞克隆，获得一株单克隆细胞株命名为2B8，该克隆细胞株比母本细胞生长速度快，能够很好繁殖猪流行性腹泻病毒，显著提高病毒在细胞上的复制水平，相比母本细胞，利用该细胞株能够获得高效价的病毒液，在疫苗生产中应用价值高。
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公开(公告)号：CN109251897A
公开(公告)日：2019-01-22
申请号：CN201811031496.3
申请日：2018-09-05
申请人： 北京市农林科学院
摘要： 本发明提供了一种猪圆环病毒3型毒株PCV3-LY及其应用。该病毒是国内外首次通过感染性克隆技术拯救出的猪圆环病毒3型,接种贴壁生长的单层猪肾细胞PK15细胞培养后，进行D-氨基葡萄糖处理而后继续培养，收获细胞培养物作为下一轮传代的接种物，依次连续传代获得一株细胞培养适应毒株。在适应过程中，传至15代后可以观察到明显的细胞病变。经过间接免疫荧光证实该细胞能够支持猪圆环病毒3型的有效复制。病毒的滴度lgTCID50＝106.53/mL。动物回归试验发现5头28日龄猪攻毒后可以致死两头，该病毒对仔猪致病力较强。这是国内外首次通过感染性克隆技术拯救出的猪圆环病毒3型，为进一步研究PCV3的致病机制以及开展有效防控该病的疫苗研究提供直接支持。
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公开(公告)号：CN103739717A
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201410018219.4
申请日：2014-01-15
申请人： 北京市农林科学院
摘要： 本发明提供了一种抗猪2型圆环病毒病的重组亚单位疫苗，该疫苗是具有较高免疫原性的鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白（flagellin）和猪2型圆环病毒Cap蛋白的融合蛋白。本发明通过将人工编码的Flagellin-ORF2、Flagellin-ΔORF2基因融合克隆进pFastBac表达载体，同ORF2、ΔORF2重组克隆（pFastBac载体）一起转染Sf9细胞，利用杆状病毒系统表达四个融合蛋白，并通过间接免疫荧光（IFA）和Western-blot进行鉴定。通过上述系统获得重组杆状病毒的周期短，且表达的flagellin+Cap融合蛋白具有较高的免疫保护力。
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公开(公告)号：CN107904326A
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201711318180.8
申请日：2017-12-12
申请人： 北京市农林科学院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/166 , C12Q2545/113 , C12Q2521/107
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体公开了一组用于RT-PCR快速分型检测禽偏肺病毒亚型的核酸，其特征在于，包括用于检测禽偏肺病毒A型的引物对1、用于检测禽偏肺病毒B型的引物对2、用于检测禽偏肺病毒C型的引物对3和用于检测禽偏肺病毒D型的引物对4；其中，所述引物对1的序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示，所述引物对2的序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示，所述引物对3的序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示，所述引物对4的序列如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示。上述核酸可用于分别检测禽偏肺病毒A、B、C、D四种亚型，其所用引物的特异性强，各引物对之间没有交叉反应，与其它病毒也没有交叉反应。
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公开(公告)号：CN105296439A
公开(公告)日：2016-02-03
申请号：CN201510700997.6
申请日：2015-10-26
申请人： 北京市农林科学院
IPC分类号： C12N7/00 , A61K39/155 , A61P31/14 , C12R1/93
摘要： 本发明提供一种鸡C型禽偏肺病毒毒株aMPV/C-JCX及其应用，所述病毒毒株的保藏号为CGMCC No.10900。该病毒是收集国内首次分离到的鸡C型禽偏肺病毒感染病鸡组织研磨液，接种贴壁生长的单层非洲绿猴肾细胞Vero，细胞培养物作为下一轮传代的接种物，依次连续传代获得一株细胞培养适应毒株。在适应过程中，早代次培养周期为7-9天，传至60代后缩短至3-5天可以观察到明显的细胞病变。经过透射电镜、间接免疫荧光和蛋白质印迹法证实该细胞能够有效的培养C型禽偏肺病毒。病毒的滴度lgTCID50＝10-4.2/0.1ml。经过SPF鸡证实该病毒毒力较弱，具有良好的免疫原性和保护性，该细胞适应毒是研究生产病毒疫苗的理想候选毒株。
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