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公开(公告)号：CN109554493B
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN201811504968.2
申请日：2018-12-10
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及一种梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记及其检测方法与应用。本发明提供一种梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记，其位于梅花第7号染色体第11182911bp处，多态性为A/C。本发明联合GWAS分析和群体选择方法开发了梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记，该SNP分子标记在梅花杂交后代分离群体的垂枝/直枝性状鉴定中重复性好、准确性高，实现了单分子标记鉴定垂枝/直枝性状的准确率达到96％以上。本发明提供的梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记及其检测方法可实现垂枝/直枝性状的幼苗期选择，极大缩短了育种周期，提高了育种效率，降低了育种成本，可以在实践中用于梅花分子辅助选择育种。
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公开(公告)号：CN107258141B
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN201710542726.1
申请日：2017-07-05
申请人： 北京林业大学
摘要： 本发明涉及一处梅花种子的萌发方法，包括如下步骤：1)将梅花种子去壳；2)用赤霉素对去壳后的梅花种子进行浸泡处理；3)用次氯酸钠对浸泡处理后的梅花种子进行消毒处理；4)将消毒处理后的梅花种子播种于消毒后的蛭石基质中，在4℃条件下冷藏45～60d。本发明的方法可提早打破梅花种子休眠、提高萌发率和出苗率、缩短育苗周期，有很强的生产实践价值。而且本方法具有出苗整齐、成本低的特点。在本发明基础上，可加快梅花新品种的繁育和生产，减少杂交种子在冷藏和播种过程死亡。
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公开(公告)号：CN107278891A
公开(公告)日：2017-10-24
申请号：CN201710482433.9
申请日：2017-06-22
申请人： 北京林业大学
摘要： 本发明涉及一种杏梅组织培养快速繁殖方法，包括：以当年生杏梅种子为外植体，经消毒、冷藏、启动培养后，将无菌苗子叶和/或嫩茎接种在分化培养基上，培养3-4周；获得不定芽后，将不定芽转移至抽茎培养基上，继续培养2-3周；待丛生苗长至3-4cm长时，将丛生苗转接入生根培养基上，培养2-3周；然后将生根苗移栽、罩炼苗后，正常培养。本发明不定芽诱导数量达10.6，丛生苗茎高达3.56cm，丛生苗增值系数达5.5，生根率达95％。本发明实现了杏梅组培快繁，为梅花遗传转化及分子育种提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN107258141A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710542726.1
申请日：2017-07-05
申请人： 北京林业大学
摘要： 本发明涉及一处梅花种子的萌发方法，包括如下步骤：1)将梅花种子去壳；2)用赤霉素对去壳后的梅花种子进行浸泡处理；3)用次氯酸钠对浸泡处理后的梅花种子进行消毒处理；4)将消毒处理后的梅花种子播种于消毒后的蛭石基质中，在4℃条件下冷藏45～60d。本发明的方法可提早打破梅花种子休眠、提高萌发率和出苗率、缩短育苗周期，有很强的生产实践价值。而且本方法具有出苗整齐、成本低的特点。在本发明基础上，可加快梅花新品种的繁育和生产，减少杂交种子在冷藏和播种过程死亡。
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公开(公告)号：CN111718886B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202010378846.4
申请日：2020-05-07
申请人： 北京林业大学
摘要： 本发明涉及一种绿萼梅原生质体分离的方法及其应用，所述方法包括：选取绿萼梅枝条，剥皮后完全浸入酶解液中，在27～28℃温度酶解40～50min；酶解液包括：1.5～2.0％纤维素酶R‑10、0.75～1.0％离析酶R‑10、0.5M甘露醇、10mM KCl、20mM CaCl2、10mM MES、0.1％BSA和0.3％PVP，pH值为5.7～5.8。本发明将绿萼梅茎段木质部通过酶解进行原生质体分离，制备的原生质体产量大，活性高，产量最高为2.3×107个/g，活性达到93％以上。本发明制备得到的绿萼梅原生质体转化效率较高，在绿萼梅遗传转化和基因功能验证方面具备较大的应用价值。
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公开(公告)号：CN111718886A
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN202010378846.4
申请日：2020-05-07
申请人： 北京林业大学
摘要： 本发明涉及一种绿萼梅原生质体分离的方法及其应用，所述方法包括：选取绿萼梅枝条，剥皮后完全浸入酶解液中，在27～28℃温度酶解40～50min；酶解液包括：1.5～2.0％纤维素酶R-10、0.75～1.0％离析酶R-10、0.5M甘露醇、10mM KCl、20mM CaCl2、10mM MES、0.1％BSA和0.3％PVP，pH值为5.7～5.8。本发明将绿萼梅茎段木质部通过酶解进行原生质体分离，制备的原生质体产量大，活性高，产量最高为2.3×107个/g，活性达到93％以上。本发明制备得到的绿萼梅原生质体转化效率较高，在绿萼梅遗传转化和基因功能验证方面具备较大的应用价值。
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公开(公告)号：CN107345247B
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN201710487120.2
申请日：2017-06-23
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6851
摘要： 本发明涉及分子生物学领域，具体公开了Pm011905基因(SEQ ID NO.1)在监测梅花休眠状态方面的应用以及一种梅花花芽休眠状态的分子检测方法。所述方法包括如下步骤：(1)分两次采集待测梅花的花芽，分别提取所述花芽的RNA并反转录成cDNA，以所述cDNA为模板，利用SEQ ID NO.2～3所示的引物对Pm011905基因进行荧光定量PCR；(2)比较两次采集的花芽的Pm011905基因的表达量，判断梅花花芽处于何种休眠阶段。本发明首次发现了可通过梅花花芽中Pm011905基因的表达量的变化，监测或判断梅花花芽的休眠状态。提供了一种简单方便、快速准确，能够在分子层面检测梅花花芽休眠状态的方法。
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公开(公告)号：CN110819732A
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201911038349.3
申请日：2019-10-29
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11 , C12N15/29
摘要： 本发明涉及分子生物学及植物分子育种技术领域，具体涉及梅花垂枝性状紧密连锁的纯合SNP分子标记及其检测方法与应用。本发明提供两个梅花垂枝性状紧密连锁的纯合SNP分子标记，分别位于梅花第7号染色体第10245464bp处和第10284630bp处，多态性分别为G/A和G/T。这两个分子标记在垂枝/直枝性状的个体中均表现为纯合基因型，在梅花杂交后代分离群体的垂枝/直枝性状鉴定中重复性好、准确性高，可实现垂枝/直枝性状的幼苗期分子辅助选择，有助于缩短育种周期和提高育种效率。基于该SNP分子标记，本发明还提供梅花垂枝性状调控基因Pm024074，为梅花垂枝性状的调控和遗传育种提供了基础。
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公开(公告)号：CN109554493A
公开(公告)日：2019-04-02
申请号：CN201811504968.2
申请日：2018-12-10
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及一种梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记及其检测方法与应用。本发明提供一种梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记，其位于梅花第7号染色体第11182911bp处，多态性为A/C。本发明联合GWAS分析和群体选择方法开发了梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记，该SNP分子标记在梅花杂交后代分离群体的垂枝/直枝性状鉴定中重复性好、准确性高，实现了单分子标记鉴定垂枝/直枝性状的准确率达到96％以上。本发明提供的梅花垂枝性状紧密连锁的SNP分子标记及其检测方法可实现垂枝/直枝性状的幼苗期选择，极大缩短了育种周期，提高了育种效率，降低了育种成本，可以在实践中用于梅花分子辅助选择育种。
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公开(公告)号：CN109006106A
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201810713038.1
申请日：2018-06-29
申请人： 北京林业大学
IPC分类号： A01G17/00 , A01C1/00 , A01G24/28 , A01G24/15 , A01N43/12 , A01N59/16 , A01N59/20 , A01P21/00
摘要： 本发明提供了一种梅花种子播种育苗方法，包括梅花种子预催芽处理、冷藏基质制备、解除休眠、幼苗移栽步骤，本发明方法能够提早打破梅花种子休眠、缩短梅花种子解除休眠时间，缩短育苗周期，并且降低种子在冷藏和播种过程的死亡率，提高低温冷藏后梅花种子的萌发率，有很强的生产实践价值。传统的梅花育苗方法需要在播种前低温沙藏处理2个月以上以解除梅花种子休眠，而本发明可以在2月内获得大量梅花健康幼苗，发芽率达87％以上，成苗率达95％以上，与现有技术相比育苗更加快速高效。在本发明的方法在梅花新优品种的繁育和生产方面具有良好是应用前景。
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