一步法快速构建扩增子文库的引物组合

    公开(公告)号:CN106834286B

    公开(公告)日:2020-02-21

    申请号:CN201710218530.7

    申请日:2017-04-05

    IPC分类号: C12N15/11 C40B50/06

    摘要: 本发明公开了一步法快速构建扩增子文库的引物组合,其包括:根据目标扩增子设计的上游融合引物,所述上游融合引物包括第一接头序列和根据目标扩增子设计的特异性上游引物序列;根据目标扩增子设计的下游融合引物,所述下游融合引物包括第二接头序列和根据目标扩增子设计的特异性下游引物序列;上游通用引物,所述上游通用引物包括第三接头序列、barcode序列和第一接头序列;和下游通用引物,所述下游通用引物包括通用序列和第二接头序列。运用该融合引物组合可以简便、快速的经1步构建扩增子文库,且由于在PCR起始前就引入barcode,使得样本及文库间交叉污染的可能性大大降低。

    一种未知融合基因的检测方法
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN115074422A

    公开(公告)日:2022-09-20

    申请号:CN202110263664.7

    申请日:2021-03-11

    IPC分类号: C12Q1/686 C12Q1/6869

    摘要: 本发明公开了一种未知融合基因的检测方法。本发明所要保护的构建未知融合基因检测文库的方法,包括将样本的总RNA在逆转录体系中进行逆转录或将所述总RNA片段化后在逆转录体系中进行逆转录获得逆转录产物;将所得逆转录产物在第一轮扩增体系中进行PCR扩增,获得第一轮PCR扩增产物,所述第一轮扩增体系含有TSO‑F引物和第一特异性引物;将第一轮PCR扩增产物在第二轮扩增体系中进行扩增,获得未知融合基因检测文库,所述第二轮扩增体系含有所述TSO‑F引物、第二特异性引物和Barcode引物。通过对使用本发明所提供的构建方法得到的文库进行测序和生物信息分析,可准确得到与已知目标基因相融合基因的信息。

    一种用于检测常染色体拷贝数变异的引物组合、试剂盒和方法

    公开(公告)号:CN111304299B

    公开(公告)日:2022-04-26

    申请号:CN201911270317.6

    申请日:2019-12-11

    IPC分类号: C12Q1/6851 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种用于检测常染色体拷贝数变异的引物组合、试剂盒和方法。本发明首先提供了用于检测常染色体拷贝数变异的引物组合,包括:Barcode引物、上游引物、下游外引物和下游内引物。本发明进一步公开了检测常染色体拷贝数变异的方法。本发明以逆转座子区域为扩增特定目标区域,通过设计有限的一到几对引物就可以覆盖这些区域对全基因组进行富集,就可以真正的反应不同染色体各区域的拷贝数水平,结合一步法构建扩增子文库,杜绝样本污染,使得本发明检测常染色体拷贝数变异具有操作简单、高灵敏度、高准确性以及低成本的特点,可真正实现染色体拷贝数检测方法在实际检测中的应用。

    一种用于检测常染色体拷贝数变异的引物组合、试剂盒和方法

    公开(公告)号:CN111304299A

    公开(公告)日:2020-06-19

    申请号:CN201911270317.6

    申请日:2019-12-11

    IPC分类号: C12Q1/6851 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一种用于检测常染色体拷贝数变异的引物组合、试剂盒和方法。本发明首先提供了用于检测常染色体拷贝数变异的引物组合,包括:Barcode引物、上游引物、下游外引物和下游内引物。本发明进一步公开了检测常染色体拷贝数变异的方法。本发明以逆转座子区域为扩增特定目标区域,通过设计有限的一到几对引物就可以覆盖这些区域对全基因组进行富集,就可以真正的反应不同染色体各区域的拷贝数水平,结合一步法构建扩增子文库,杜绝样本污染,使得本发明检测常染色体拷贝数变异具有操作简单、高灵敏度、高准确性以及低成本的特点,可真正实现染色体拷贝数检测方法在实际检测中的应用。

    一步法快速构建扩增子文库的方法

    公开(公告)号:CN106835292B

    公开(公告)日:2019-04-09

    申请号:CN201710218529.4

    申请日:2017-04-05

    IPC分类号: C40B50/06 C12N15/11

    摘要: 本发明公开了一步法快速构建扩增子文库的方法,包括以下步骤:1、合成用于构建DNA样品的扩增子文库的引物组合,所述用于构建DNA样品的扩增子文库的引物组合包括:根据目标扩增子设计的上游融合引物,根据目标扩增子设计的下游融合引物,上游通用引物和下游通用引物;2、构建DNA样品的PCR反应体系;3、进行PCR。运用该方法可以简便、快速的经1步构建扩增子文库,且由于在PCR起始前就引入barcode,使得样本及文库间交叉污染的可能性大大降低。